病甲组织软化处理的实验方法改进
【文献标识码】 C 【文章编号】 1726-6424(2004)04-0368-02
很多皮肤病常伴有指(趾)甲的变化，特别是累及甲附近的皮肤病更易引起甲病，因此，认识甲病不仅具有局部的意义，而且对了解整体状况也有一定帮助。但由于甲组织是由致密而坚实的角质组成，按常规的组织处理程序要制成一张完整的组织切片很困难。我们经过反复摸索，体会到先采用酸类溶液脱钙，将甲组织的角质软化，再按常规制片程序进行，可以制作出较好的切片。现将实验方法报告如下。
1 方法
将手术取下的甲组织作纵行(从甲游离缘至甲根皱褶包括甲床)切成约1.5cm×0.3cm×0.2cm大小的甲标本，经甲醛固定后，置于酸性脱钙液中约5～12h或过夜，然后取出流水冲洗15～30min后放入固定液中，或直接浸泡在70%乙醇中，其后按常规操作程序脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和H·E染色。
脱钙液的配制:盐酸20ml，甲酸(蚁酸)20ml，加入蒸馏水100ml，此液可反复使用至混浊后弃之。
2 结果与讨论
指(趾)甲是由致密而坚实的角化上皮所组成。根据分光光度测定法的分析，甲中钙仅为微量，但硫的含量高，以胱氨酸及其双硫键的形式存在 [1] 。电镜证实，甲细胞的角化类似手毛皮质细胞“硬”角蛋白的形式，硬角蛋白由各种 氨基酸组成，含硫量高，以胱氨酸及其双硫键的形式存在，不受蛋白分解酶的影响，二硫键对酶消化的抵抗力最强，在使用强碱或强酸时，才能使二硫键断裂 [2] 。因此采用以酸类溶液来软化角质的处理方法，材料都来自于甲下有凹陷点、甲剥离、甲下增厚、甲板浑浊、粗糙、失去光泽、增厚、高低不平甚至碎裂的甲病变组织，常见的为甲银屑病与甲扁平苔藓 [3] 。经过此方法的处理，即不损伤组织的细胞和纤维，也不妨碍以后的染色，又可同常规组织一起脱水处理。经过本所病理室的应用后，解决了切片烂、不完整的问题，能为病理诊断提供较好的切片。该方法操作步骤、原液配制均简单，易操作，试剂可反复使用，原料价廉，适用性好。
参考文献
1 杨国亮.皮肤病学，第1版.上海:上海医科大学出版社，1992，7，37.
2 赵辨.临床皮肤病学，第2版.南京:江苏科学技术出版社，1989，1，31-32.
3 王泊云.病理学技术，第1版.北京:人民卫生出版社，2000，6，71.
作者单位:610031四川省皮肤病性病防治研究所
(收稿日期:2004-02-09)
(编辑清 泉), 百拇医药
很多皮肤病常伴有指(趾)甲的变化，特别是累及甲附近的皮肤病更易引起甲病，因此，认识甲病不仅具有局部的意义，而且对了解整体状况也有一定帮助。但由于甲组织是由致密而坚实的角质组成，按常规的组织处理程序要制成一张完整的组织切片很困难。我们经过反复摸索，体会到先采用酸类溶液脱钙，将甲组织的角质软化，再按常规制片程序进行，可以制作出较好的切片。现将实验方法报告如下。
1 方法
将手术取下的甲组织作纵行(从甲游离缘至甲根皱褶包括甲床)切成约1.5cm×0.3cm×0.2cm大小的甲标本，经甲醛固定后，置于酸性脱钙液中约5～12h或过夜，然后取出流水冲洗15～30min后放入固定液中，或直接浸泡在70%乙醇中，其后按常规操作程序脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和H·E染色。
脱钙液的配制:盐酸20ml，甲酸(蚁酸)20ml，加入蒸馏水100ml，此液可反复使用至混浊后弃之。
2 结果与讨论
指(趾)甲是由致密而坚实的角化上皮所组成。根据分光光度测定法的分析，甲中钙仅为微量，但硫的含量高，以胱氨酸及其双硫键的形式存在 [1] 。电镜证实，甲细胞的角化类似手毛皮质细胞“硬”角蛋白的形式，硬角蛋白由各种 氨基酸组成，含硫量高，以胱氨酸及其双硫键的形式存在，不受蛋白分解酶的影响，二硫键对酶消化的抵抗力最强，在使用强碱或强酸时，才能使二硫键断裂 [2] 。因此采用以酸类溶液来软化角质的处理方法，材料都来自于甲下有凹陷点、甲剥离、甲下增厚、甲板浑浊、粗糙、失去光泽、增厚、高低不平甚至碎裂的甲病变组织，常见的为甲银屑病与甲扁平苔藓 [3] 。经过此方法的处理，即不损伤组织的细胞和纤维，也不妨碍以后的染色，又可同常规组织一起脱水处理。经过本所病理室的应用后，解决了切片烂、不完整的问题，能为病理诊断提供较好的切片。该方法操作步骤、原液配制均简单，易操作，试剂可反复使用，原料价廉，适用性好。
参考文献
1 杨国亮.皮肤病学，第1版.上海:上海医科大学出版社，1992，7，37.
2 赵辨.临床皮肤病学，第2版.南京:江苏科学技术出版社，1989，1，31-32.
3 王泊云.病理学技术，第1版.北京:人民卫生出版社，2000，6，71.
作者单位:610031四川省皮肤病性病防治研究所
(收稿日期:2004-02-09)
(编辑清 泉), 百拇医药