人类精子307例形态分析
【摘要】 目的 分析精子形态异常及畸形率过高对不育的影响。方法 采用苯伊石染色法，进行精液涂片染色，按WHO标准对307例(生育组31例，不育组276例)人精液进行精子形态学的观测分析。结果 生育组正常精子为(80.61±0.33)%，畸形精子为(19.39±0.33)%。不育组正常精子为(65.01±0.51)%，畸形精子为(34.99±0.51)%。生育组与不育组经t′检验P<0.01，说明两组精子畸形率的差异有非常显著性。结论 异常形态精子过多是导致不育的原因之一，而感染、放射线、吸烟及酒精中毒等均可导致精子形态异常。
关键词 人精子 形态学 畸形率
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)08-0706-02
A report on307examples of human sperms shape analysis
, 百拇医药
Guo Baozhu，Luo Huanyu，Shi Xiaoqin
Shaanxi Provincial Health Hospital for Women and Children，Shaanxi710003.
【Abstract】 Objective Analyse the influence of spermic shape abnormal and high malformed rate on sterileˉness.Method Put up semen smear dyeing by employing BenYiShi dyeing method.In accordance with WHO stanˉdard，authors of this article conducted a study on observation and analysis on seminal morphological to human semen of307cases in which fertile group contains31cases and infertile group276cases，Results The percentage of normal sperms in fertile group was(80.61±0.33)%，while that of abnormal sperms was(19.39±0.33)%.In infertile group，thepercentage of normal sperms was(65.01±0.51)%and that of malformed sperm was(34.99±0.51)%.By t′test，P<0.01.That shows the difference in the rate of malformed sperms between this two groups was tarnal distinctness.Conclusion Plethoricabnoraml shape sperms is one of the reason that lead to sterileness.Infection，radiˉation，smoking and alcoholism can all make spermic shape abnormity.
, 百拇医药
Key words human sperm morphology percentage of abnormality
随着近年来男性学的不断进展，男性学检测方法也不断增加。对精子形态学的检测分析，也逐渐为人们所重视。本试验采用苯伊石染色法，按WHO所规定的精子形态学分类方法对307例人精液的精子形态进行了分析，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 观察对象 22～48岁男性精液。生育组31例，不育组276例。
1.2 试剂 染液:5%苯胺兰水溶液，5%伊红B水溶液;1%石炭酸水溶液。以上溶液分别过滤后按2:1:1的比例混合，存入滴瓶使用。固定液:无水乙醇与乙醚按1:1比例混合。
1.3 方法
, http://www.100md.com
1.3.1 染色方法 待精液液化后，将精液滴于洁净玻片上，推成薄片。自然干燥后，以固定液滴片固定3min。再将涂片放于42℃水浴中用染液滴染5min。用蒸馏水冲片，脱去浮色。自然干燥后，树胶封固。油镜下观察。计数200个精子，按下列标准对精子形态进行分类，并分别记录其结果。以目镜测微尺测量精子大小。
1.3.2 观察标准 按照2001年WHO对精子形态的分类标准观察 [1] 。(1)正常精子:头部为椭圆形，长4.0～5.0μm，宽2.5～3.5μm，顶体界限清晰，占头部的40%～70%;中段细，宽度<1.0μm，长度为头部的1.5倍，并且在轴线上紧贴头部;尾部直、均一，比中段细，长约4.5μm;胞浆小滴小于头部大小的1/2。(2)头部异常:非正常精子头部形态，包括大头、小头、锥形头、圆头、梨形头、无定型头，有空泡头及双头、多头、无头等。(3)颈部及中段异常:包括颈部弯曲、中段非对称性地接于头部、中段增粗或变细及不规则等。(4)尾部异常:包括短尾、多尾、发卡尾、断尾、尾部弯曲(>90°)、尾宽不规则及尾部卷曲等。(5)胞浆小滴:大于正常精子头部的1/2。
, 百拇医药
2 结果
按以上标准，对307例人精液的精子形态进行分析，结果见表1。
表1 307例人精液精子形态学分析结果(略 )
3 讨论
生育及不育人群精液中均存在异常形态的精子。其异常形态发生率极为重要。一般而言，健康男性精液中正常形态精子在61%～81%，平均在70%左右。其中有20%～40%为异常精子。如异常精子数量过高，就会严重影响到精液的质量，造成不育。目前，对于健康男性精液中正常形态精子及畸形精子百分率的报道，国内外尚不一致。日本学者石神衰次报道的畸形率在15%以下;岩本晁明报道的畸形率在15%～20% [2，3] 。WHO确定的正常人精子细胞学检查标准为:正常形态精子占80.50%，我国成都为82.80%，上海为88.00%，重庆为76.70%，香港为66.10%，北京为76.90%，南京为80.00% [4，5] 。本组结果为:生育组:正常形态精子(80.61±0.33)%，畸形精子为(19.39±0.33%);不育组:正常形态精子为(65.01±0.51)%，畸形精子为(34.99±0.51)%，其结果与WHO标准近似。
, 百拇医药
本文生育组31例平均畸形率为(19.39±0.33)%，不育组276例平均畸形率为(34.99±0.51)%，经t′检验P<0.01，显示两组间精子畸形率的差异有非常显著性。说明异常形态精子过高是导致不育的原因之一。如:177号患者年龄36岁，婚后多年不育，精液常规多次检查均正常。经涂片染色，精子畸形率高达74%，本例为异常精子过多造成不育。
本组结果按WHO标准对精子形态进行分类，将精子形态分为正常精子及头部异常、颈部与中段异常、尾部异常及胞浆小滴五类。从结果看，生育组与不育组两组精子畸形率的差异主要在头部:生育组(11.13±0.51)%、不育组(20.21±0.53)%)，尾部次之:生育组(4.68±0.38)%、不育组:(9.19±0.66)%。如:81号患者，婚后3年不育，经涂片染色，精子畸形率为55%，头部畸形为50%，其中小头畸形占23%，无头占27%，且小头精子多为圆头。本例为精子顶体缺乏，使精子无法穿卵，导致不育。本例如不经涂片染色，则无法区别异常形态，将会造成畸形率不高的假象，进而延误诊断治疗。
, http://www.100md.com
273号患者，精子畸形率高达54%，其中尾部异常者占50%，且大部分为尾部卷曲的精子。据有关资料报道 [4～6] ，精子卷尾畸形是由于鞭毛生成障碍或精子肿胀所致，从而影响了精子的运动力，造成不育。
造成精子畸形率升高的原因很多，例如:感染、损伤、药物、高温、放射线、激光拍照、农药、吸烟及酒精中毒等都会影响睾丸的生精功能，导致精子形态异常 [7～12] 。感染可使小头及无定形畸形精子增多;精索静脉曲张时，常在精液中见到尖头、带状精子头、双头及中段畸形的精子。在病毒感染的2～3周内，畸形精子和未成熟精子的比例都会增加 [2，4] 。精子畸形率过高，必然导致不育症的发生。
对精子的形态学分析，许多基层医院实验室直接在显微镜下滴片观察精子形态，这种方法会影响观察结果，对精子的形态学分析造成很大误差。本组采用苯伊石染色法观察精子形态，较镜下直接观测准确。而且此方法简便、易学、快速、省时，试剂容易购得，基层人员不难掌握。
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参考文献
1 WHO编.人类精液及精子———宫颈粘液相互作用实验室检验手册.北京:人民卫生出版社，2001，15-21.
2 曹兴午.107例精子形态分析.(生殖健康最新诊疗技术学习班资料).中国性学会，1997，37-46.
3 曹兴午译.精液检查(生殖健康最新诊疗技术学习班资料).中国性学会，1997，205-209.
4 谢文英，王一飞，江鱼.男性学.上海:上海科学技术出版社，1991，133-136，219-220.
5 黄宇烽.男科诊断学.上海:第二军医大学出版社，1999，75-88.
6 黄宇烽.精液细胞与超微结构图谱.上海:第二军医大学出版社，2002，3-6.
, http://www.100md.com
7 张金萍.吸烟对男性精液质量的影响及相关性的研究.中华男科学，2002，8(1):35-37.
8 李浩勇.男性生殖道细菌感染对精子功能的影响.中华男科学，2002，8(6):442-444.
9 戴继灿.环境因素与男性不育.中华男科学，1999，13(1):58.
10 姚志文.环境激素与生殖健康.中国优生与遗传杂志.2001，9(1):12-13.
11 田中岭.解脲脲原体感染对精子膜功能的影响.临床检验杂志.1999，17(4):236.
12 陈国武.精液白细胞与精子功能间关系的研究.男科学杂志，1998，12(2):82-85.
(收稿日期:2003-03-18) (编辑 小川), http://www.100md.com(郭宝珠)
关键词 人精子 形态学 畸形率
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)08-0706-02
A report on307examples of human sperms shape analysis
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Guo Baozhu，Luo Huanyu，Shi Xiaoqin
Shaanxi Provincial Health Hospital for Women and Children，Shaanxi710003.
【Abstract】 Objective Analyse the influence of spermic shape abnormal and high malformed rate on sterileˉness.Method Put up semen smear dyeing by employing BenYiShi dyeing method.In accordance with WHO stanˉdard，authors of this article conducted a study on observation and analysis on seminal morphological to human semen of307cases in which fertile group contains31cases and infertile group276cases，Results The percentage of normal sperms in fertile group was(80.61±0.33)%，while that of abnormal sperms was(19.39±0.33)%.In infertile group，thepercentage of normal sperms was(65.01±0.51)%and that of malformed sperm was(34.99±0.51)%.By t′test，P<0.01.That shows the difference in the rate of malformed sperms between this two groups was tarnal distinctness.Conclusion Plethoricabnoraml shape sperms is one of the reason that lead to sterileness.Infection，radiˉation，smoking and alcoholism can all make spermic shape abnormity.
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Key words human sperm morphology percentage of abnormality
随着近年来男性学的不断进展，男性学检测方法也不断增加。对精子形态学的检测分析，也逐渐为人们所重视。本试验采用苯伊石染色法，按WHO所规定的精子形态学分类方法对307例人精液的精子形态进行了分析，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 观察对象 22～48岁男性精液。生育组31例，不育组276例。
1.2 试剂 染液:5%苯胺兰水溶液，5%伊红B水溶液;1%石炭酸水溶液。以上溶液分别过滤后按2:1:1的比例混合，存入滴瓶使用。固定液:无水乙醇与乙醚按1:1比例混合。
1.3 方法
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1.3.1 染色方法 待精液液化后，将精液滴于洁净玻片上，推成薄片。自然干燥后，以固定液滴片固定3min。再将涂片放于42℃水浴中用染液滴染5min。用蒸馏水冲片，脱去浮色。自然干燥后，树胶封固。油镜下观察。计数200个精子，按下列标准对精子形态进行分类，并分别记录其结果。以目镜测微尺测量精子大小。
1.3.2 观察标准 按照2001年WHO对精子形态的分类标准观察 [1] 。(1)正常精子:头部为椭圆形，长4.0～5.0μm，宽2.5～3.5μm，顶体界限清晰，占头部的40%～70%;中段细，宽度<1.0μm，长度为头部的1.5倍，并且在轴线上紧贴头部;尾部直、均一，比中段细，长约4.5μm;胞浆小滴小于头部大小的1/2。(2)头部异常:非正常精子头部形态，包括大头、小头、锥形头、圆头、梨形头、无定型头，有空泡头及双头、多头、无头等。(3)颈部及中段异常:包括颈部弯曲、中段非对称性地接于头部、中段增粗或变细及不规则等。(4)尾部异常:包括短尾、多尾、发卡尾、断尾、尾部弯曲(>90°)、尾宽不规则及尾部卷曲等。(5)胞浆小滴:大于正常精子头部的1/2。
, 百拇医药
2 结果
按以上标准，对307例人精液的精子形态进行分析，结果见表1。
表1 307例人精液精子形态学分析结果(略 )
3 讨论
生育及不育人群精液中均存在异常形态的精子。其异常形态发生率极为重要。一般而言，健康男性精液中正常形态精子在61%～81%，平均在70%左右。其中有20%～40%为异常精子。如异常精子数量过高，就会严重影响到精液的质量，造成不育。目前，对于健康男性精液中正常形态精子及畸形精子百分率的报道，国内外尚不一致。日本学者石神衰次报道的畸形率在15%以下;岩本晁明报道的畸形率在15%～20% [2，3] 。WHO确定的正常人精子细胞学检查标准为:正常形态精子占80.50%，我国成都为82.80%，上海为88.00%，重庆为76.70%，香港为66.10%，北京为76.90%，南京为80.00% [4，5] 。本组结果为:生育组:正常形态精子(80.61±0.33)%，畸形精子为(19.39±0.33%);不育组:正常形态精子为(65.01±0.51)%，畸形精子为(34.99±0.51)%，其结果与WHO标准近似。
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本文生育组31例平均畸形率为(19.39±0.33)%，不育组276例平均畸形率为(34.99±0.51)%，经t′检验P<0.01，显示两组间精子畸形率的差异有非常显著性。说明异常形态精子过高是导致不育的原因之一。如:177号患者年龄36岁，婚后多年不育，精液常规多次检查均正常。经涂片染色，精子畸形率高达74%，本例为异常精子过多造成不育。
本组结果按WHO标准对精子形态进行分类，将精子形态分为正常精子及头部异常、颈部与中段异常、尾部异常及胞浆小滴五类。从结果看，生育组与不育组两组精子畸形率的差异主要在头部:生育组(11.13±0.51)%、不育组(20.21±0.53)%)，尾部次之:生育组(4.68±0.38)%、不育组:(9.19±0.66)%。如:81号患者，婚后3年不育，经涂片染色，精子畸形率为55%，头部畸形为50%，其中小头畸形占23%，无头占27%，且小头精子多为圆头。本例为精子顶体缺乏，使精子无法穿卵，导致不育。本例如不经涂片染色，则无法区别异常形态，将会造成畸形率不高的假象，进而延误诊断治疗。
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273号患者，精子畸形率高达54%，其中尾部异常者占50%，且大部分为尾部卷曲的精子。据有关资料报道 [4～6] ，精子卷尾畸形是由于鞭毛生成障碍或精子肿胀所致，从而影响了精子的运动力，造成不育。
造成精子畸形率升高的原因很多，例如:感染、损伤、药物、高温、放射线、激光拍照、农药、吸烟及酒精中毒等都会影响睾丸的生精功能，导致精子形态异常 [7～12] 。感染可使小头及无定形畸形精子增多;精索静脉曲张时，常在精液中见到尖头、带状精子头、双头及中段畸形的精子。在病毒感染的2～3周内，畸形精子和未成熟精子的比例都会增加 [2，4] 。精子畸形率过高，必然导致不育症的发生。
对精子的形态学分析，许多基层医院实验室直接在显微镜下滴片观察精子形态，这种方法会影响观察结果，对精子的形态学分析造成很大误差。本组采用苯伊石染色法观察精子形态，较镜下直接观测准确。而且此方法简便、易学、快速、省时，试剂容易购得，基层人员不难掌握。
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2 曹兴午.107例精子形态分析.(生殖健康最新诊疗技术学习班资料).中国性学会，1997，37-46.
3 曹兴午译.精液检查(生殖健康最新诊疗技术学习班资料).中国性学会，1997，205-209.
4 谢文英，王一飞，江鱼.男性学.上海:上海科学技术出版社，1991，133-136，219-220.
5 黄宇烽.男科诊断学.上海:第二军医大学出版社，1999，75-88.
6 黄宇烽.精液细胞与超微结构图谱.上海:第二军医大学出版社，2002，3-6.
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10 姚志文.环境激素与生殖健康.中国优生与遗传杂志.2001，9(1):12-13.
11 田中岭.解脲脲原体感染对精子膜功能的影响.临床检验杂志.1999，17(4):236.
12 陈国武.精液白细胞与精子功能间关系的研究.男科学杂志，1998，12(2):82-85.
(收稿日期:2003-03-18) (编辑 小川), http://www.100md.com(郭宝珠)