HPLC法测定阿替洛尔注射液含量
【文献标识码】 B 【文章编号】 1609-6614(2003)09-0824-02
阿替洛尔(atenolol，ATN)亦称安酰心安，为选择性β 1 -受体阻滞剂 [1，2] ，具有起效快、持续时间长、无蓄积性中毒危险等特点 [3] 。临床主要用于治疗高血压、心绞痛、心肌梗死、心律失常等疾病 [4，5] 。中国药典2000年版规定阿替洛尔原料药及片剂含量测定采用HPLC(内标)法与分光光度法 [6] 。有关阿替洛尔注射液的研制和含量测定方法尚未见报道，我们建立了HPLC(外标)法测定阿替洛尔注射液含量，结果满意。
1 仪器与材料
Agilent-lloo高效液相色谱仪，二极管阵列紫外检测器(美国Agilent公司产);电子天平(Tokyo Japan);pHs-25型pH计(上海雷磁器厂);阿替洛尔(上海三稚制药有限公司);阿替洛尔注射液(山东大学药学院研制);甲醇为色谱纯。
, 百拇医药
2 含量测定
2.1 色谱条件 色谱柱:phenomenex C18(5μm，250×4.6mm);流动相:甲醇-0.68，pH3.0，磷酸二氢钾缓冲液3.5∶6.5，(取KH 2 PO 4 6.8g加水溶解并稀释至1000ml，混匀，调pH值为3.0即得。取该缓冲液650ml，加甲醇350ml与庚烷磺酸钠1.3g，混匀得流动相);检测波长为276nm;流速为1ml/min;柱温35℃;进样量为20μl;理论板数为9897;分离温度为12.5。
2.2 线性关系 精密称取阿替洛尔对照品适量，加流动相制成每1ml含20.2mg的母液，混匀。精密量取母液5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，混匀，在276nm波长处，分别进样20μl，测定峰面积，结果见表1。
表1 阿替洛尔浓度(C)与峰面积(A)数据 (略)
, 百拇医药
2.3 精密度试验 配制低、中、高三种不同浓度阿替洛尔标准液，按上述测定方法进样20μl，在1日内进样5次测定峰面积，计算日内精密度;每日4h测定1次，共计3次重复性试验，结果见表2，表3。
表2 日内精密度试验结果(略)
表3 重复性试验结果(略0
2.4 回收率试验 按处方比例称取辅料，配制阿替洛尔注射液空白辅料溶液。精密称取阿替洛尔对照品适量，加空白辅料溶液配制低、中、高三种不同浓度溶液，按上述方法测定，进样20μl，测定峰面积，计算回收率，见表4。
表4 回收率试验结果 (略 )
2.5 含量测定方法 精密量取阿替洛尔注射液6.0ml(约相当于阿替洛尔600μg)置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，混匀，得供试液。精密称取阿替洛尔对照品适量，用流动相稀释，制成每1ml含60μg的对照液。分别取上述对照液、供试液备20μl，于276nm波长处分别进样测定峰面积， 计算含量。三批样品测定结果见表5。
, 百拇医药
表5 三批样品含量测定结果(略)
3 讨论
3.1 采用HPLC液测定阿替洛尔注射液含量，浓度在40～150μg/ml范围内，峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9999);平均回收率为100.8%，RSD为1.87%。
3.2 处方中辅料及有关物质对测定无干扰，分离度12.5。本方法简便、灵敏、准确、可用于阿替洛尔注射液含量及有关物质检查。
参考文献
1 崔艳霞，姜卫国，李淑芬.阿替洛尔的合成.中国药物化学杂志，1996，6(6):62-63.
2 李锐松，盛宝恒.安酰心安的药理及抗心绞痛应用.医学文摘.1980，(1):8-12.
3 李锐松，姚秀娟，盛宝恒.安酰心安抗高血压病的临床应用.陕西新医药，1983，127:59-62.
4 戴德哉.β-肾上腺素能阻滞剂治疗心肌梗塞.江苏医药，1985，11:33-35.
5 汤光.现代药物学，第1版.北京:中国医药科技出版社，1997，44-45.
6 中国药典·二部，2000，341-342. (编辑 一坤), 百拇医药(王洪水)
阿替洛尔(atenolol，ATN)亦称安酰心安，为选择性β 1 -受体阻滞剂 [1，2] ，具有起效快、持续时间长、无蓄积性中毒危险等特点 [3] 。临床主要用于治疗高血压、心绞痛、心肌梗死、心律失常等疾病 [4，5] 。中国药典2000年版规定阿替洛尔原料药及片剂含量测定采用HPLC(内标)法与分光光度法 [6] 。有关阿替洛尔注射液的研制和含量测定方法尚未见报道，我们建立了HPLC(外标)法测定阿替洛尔注射液含量，结果满意。
1 仪器与材料
Agilent-lloo高效液相色谱仪，二极管阵列紫外检测器(美国Agilent公司产);电子天平(Tokyo Japan);pHs-25型pH计(上海雷磁器厂);阿替洛尔(上海三稚制药有限公司);阿替洛尔注射液(山东大学药学院研制);甲醇为色谱纯。
, 百拇医药
2 含量测定
2.1 色谱条件 色谱柱:phenomenex C18(5μm，250×4.6mm);流动相:甲醇-0.68，pH3.0，磷酸二氢钾缓冲液3.5∶6.5，(取KH 2 PO 4 6.8g加水溶解并稀释至1000ml，混匀，调pH值为3.0即得。取该缓冲液650ml，加甲醇350ml与庚烷磺酸钠1.3g，混匀得流动相);检测波长为276nm;流速为1ml/min;柱温35℃;进样量为20μl;理论板数为9897;分离温度为12.5。
2.2 线性关系 精密称取阿替洛尔对照品适量，加流动相制成每1ml含20.2mg的母液，混匀。精密量取母液5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，混匀，在276nm波长处，分别进样20μl，测定峰面积，结果见表1。
表1 阿替洛尔浓度(C)与峰面积(A)数据 (略)
, 百拇医药
2.3 精密度试验 配制低、中、高三种不同浓度阿替洛尔标准液，按上述测定方法进样20μl，在1日内进样5次测定峰面积，计算日内精密度;每日4h测定1次，共计3次重复性试验，结果见表2，表3。
表2 日内精密度试验结果(略)
表3 重复性试验结果(略0
2.4 回收率试验 按处方比例称取辅料，配制阿替洛尔注射液空白辅料溶液。精密称取阿替洛尔对照品适量，加空白辅料溶液配制低、中、高三种不同浓度溶液，按上述方法测定，进样20μl，测定峰面积，计算回收率，见表4。
表4 回收率试验结果 (略 )
2.5 含量测定方法 精密量取阿替洛尔注射液6.0ml(约相当于阿替洛尔600μg)置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，混匀，得供试液。精密称取阿替洛尔对照品适量，用流动相稀释，制成每1ml含60μg的对照液。分别取上述对照液、供试液备20μl，于276nm波长处分别进样测定峰面积， 计算含量。三批样品测定结果见表5。
, 百拇医药
表5 三批样品含量测定结果(略)
3 讨论
3.1 采用HPLC液测定阿替洛尔注射液含量，浓度在40～150μg/ml范围内，峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9999);平均回收率为100.8%，RSD为1.87%。
3.2 处方中辅料及有关物质对测定无干扰，分离度12.5。本方法简便、灵敏、准确、可用于阿替洛尔注射液含量及有关物质检查。
参考文献
1 崔艳霞，姜卫国，李淑芬.阿替洛尔的合成.中国药物化学杂志，1996，6(6):62-63.
2 李锐松，盛宝恒.安酰心安的药理及抗心绞痛应用.医学文摘.1980，(1):8-12.
3 李锐松，姚秀娟，盛宝恒.安酰心安抗高血压病的临床应用.陕西新医药，1983，127:59-62.
4 戴德哉.β-肾上腺素能阻滞剂治疗心肌梗塞.江苏医药，1985，11:33-35.
5 汤光.现代药物学，第1版.北京:中国医药科技出版社，1997，44-45.
6 中国药典·二部，2000，341-342. (编辑 一坤), 百拇医药(王洪水)