针刺治疗Wistar大鼠坐骨神经损伤的实验研究
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中华现代中西医杂志 2003年 第1卷 第4期
【摘要】 目的 探讨针刺对周围神经损伤的治疗作用。方法 以Wistar大鼠坐骨神经捻挫为动物模型，用针刺给予治疗，设立两个对照组，分别为VitB 1 、VitB 12 对照组，水对照组。3组于周围神经损伤后不同时期检测感觉神经传导速度(SCV)、病理形态计量学图像分析、坐骨神经功能指数(SFI)及电镜下的超微结构研究。结果 针刺组SCV、SFI、有髓纤维的密度好于水对照组(P<0.01)，与VitB 1 、VitB 12 对照组比较差异无显著性(P>0.05)。电镜下针刺组(VitB 1 、VitB 12 组的神经髓鞘厚度、轴突直径好于水对照组。结论 针刺能促进Wistar大鼠坐骨神经损伤后的有髓纤维再生，能促进感觉、运动神经纤维的功能恢复，是治疗周围神经损伤的一种简便、有效方法。
关键词 针刺 周围神经损伤 实验研究
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-6424(2003)04-0301-03
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周围神经损伤是临床常见的损伤性疾病，虽然治疗方法很多，但多是临床疗效报道，经过客观实验评价的报道却很少。针刺是周围神经损伤常用的治疗方法 [1] ，结合实验手段探讨针刺对周围神经损伤的修复作用具有重要的意义。为此我们以Wistar大鼠坐骨神经损伤为动物模型，以坐骨神经功能指数、电生理、病理形态计量学及电镜下的超微结构等指标来观察针刺对周围神经损伤的修复作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组 Wistar人鼠36只，体重140～160g，鼠龄6周，均为雄性，由华北煤炭医学院实验动物中心提供。将大鼠随机分成3组，每组12只，均于周围神经损伤后开始治疗。3组分别为:(1)针刺组，选穴:风市、腰俞，0.5寸毫针，针刺进针，小幅度提插、捻转，留针15min，然后凉开水2ml灌胃每天2次;(2)对照组1(VitB 1 、VitB 12 组):VitB 1 、VitB 12 混合2ml，灌胃每天2次;(3)对照组2(水对照组):凉开水2ml灌胃每天2次。3组实验动物条件均衡，饲养方式及饲食量相同。
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1.2 动物模型的制备 将Wistar大鼠称重后，用10%水合氯醛3ml/kg腹腔内注射，在左侧坐骨神经走向处切开皮肤，分离肌肉，在坐骨结节下方0.5cm处用钳捻挫坐骨神经15s，用丝线缝合在捻挫点处肌肉上做标记，然后缝合分离的肌肉和皮肤。
1.3 坐骨神经功能指数(SFI)测定 自制大鼠足印行走箱，按Bain公式计算出SFI [2]:SFI=-38.3(EPL-NPL/NPL )+109.5(ETS-NTS/NTS )+13.3(ETI-NTI/NTI )-8.8以SFI0为参考值，-100为神经完全断离指标，计算出SFI的恢复率(%)。3组分别在捻挫后第7、14、21、28天测量SFI。
1.4 电生理实验 将3组动物分别在捻挫后第1、3、7、14天测量坐骨神经感觉神经传导速度(SCV)。SCV(m/s)= 刺激点至记录的距离(mm)/刺激点至记录点的潜伏期(ms)
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1.5 病理形态计量学及超微结构的研究 2周后将3组动物各处死一半，取捻挫坐骨神经点下方5mm处的一段神经半薄切片处理，光镜下观察并进行形态计量学分析，并做电镜超微结构的研究。4周时方法同上，电镜及光镜下观察有髓纤维的形态、髓鞘的厚度、血管、巨噬细胞等。用图像分析仪分析有髓纤维的密度，并进行统计学处理。
1.6 统计学方法 所得结果均用X±s表示，两个样本均数比较用组间t检验，多个样本均数比较用方差分析。
2 结果
2.1 坐骨神经功能指数SFI测定结果 见表1。
表1 坐骨神经捻挫后不同时期SFI恢复率(略)
在损伤后1周时，各组间差异无显著性(P>0.05)，在神经损伤后2、3、4周时，针刺组SFI好于水对照组(P<0.01)，而与VitB 1 、VitB 12 对照组差异无显著性(P>0.05)。
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2.2 电生理实验结果 见表2。
表2 感觉神经传导速度 (m/s，X±s)(略)
在神经损伤后第1天测量感觉神经传导速度，结果呈电静息状态;第3天各组之间差异无显著性(P>0.05);第7、14天针刺组好于水对照组(P<0.01)，而与VitB 1 、VitB 12 对照组差异无显著性(P>0.05)。
2.3 形态学参数
2.3.1 坐骨神经捻挫2、4周时形态计量结果 见表3。
表3 捻挫2周及4周时有髓纤维的密度 (个/mm)(略)
坐骨神经捻挫2周及4周时，有髓纤维密度针刺组好于水对照组(P<0.01)，而与VitB 1 、VitB 12 对照组差异无显著性(P>0.05)。
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2.3.2 病理形态学 坐骨神经捻挫2、4周时病理形态学:光镜下可见有髓纤维的形态，针刺组轴突直径相对较大，且有髓纤维的密度、血管及巨噬细胞明显多于对照组。电镜下可见有髓纤维的形态针刺组和VitB 1 、VitB 12 组髓鞘厚度较水对照组为厚，髓鞘生长较好，变坏的雪旺细胞较少，轴突直径较大。
3 讨论
坐骨神经的走行部位为足少阳胆经和足太阳膀胱经循行部位，针灸临床工作中，坐骨神经疾病取足少阳胆经和足太阳膀胱经腧穴多能得到明显的疗效。现代研究也证明针刺对外周血管的功能有调整作用，对甲皱微循环的血流速度、血流形态、血流颜色均有明显的即刻效应，对异形管袢、袢顶瘀血，清晰度均有明显的远期效应;对损伤性炎症有一定抗炎作用;提插捻转轻刺激可兴奋运动神经，使肌肉产生节律性收缩和放松，形成“泵”作用，促使静脉血液及淋巴液回流，进而改善局部血液循环和促进物质代谢。由此我们认为针刺可以促进局部代谢并有益于神经损伤的恢复。以Wistar大鼠坐骨神经捻挫为动物模型，给予针刺腰俞穴、风市穴取其“通经活络、调气活血”之功效。设两个对照组，分别为水对照组、VitB1 、VitB 12 组，3组于周围神经损伤后不同时期检测坐骨神经功能指数、感觉神经传导速度、病理形态计量学图像分析及电镜下超微结构的研究。结果:(1)SFI是评价坐骨神经再生较有价值的检查方法 [3] ，通过测定Wistar大鼠坐骨神经损伤后第1、2、3、4周的SFI，发现在损伤后2、3、4周时，针刺组SFI好于水对照组(P<0.01)，所以认为针刺能促进神经损伤后的功能恢复。(2)神经传导是神经纤维最基本的电特性，神经电生理的变化是评价神经损伤及修复最早最敏感的客观指标。在神经损伤的最初几天，针刺实验组与对照组差异无显著性(P>0.05)，说明神经损伤有一个修复过程。在损伤后第7、14天时，针刺组、VitB 1、VitB 12 组感觉神经传导速度高于水对照组。说明针刺能够促进感觉神经功能的恢复。(3)神经损伤后再生比较明显的变化就是有髓纤维数量的改变 [4] ，在损伤后2、4周时通过图像分析仪对有髓纤维的个数与数面密度进行定量分析，结果发现针刺组、VitB 1 、VitB 12 组髓纤维的密度好于水对照组(P<0.01)。在电镜下可见针刺组髓鞘的厚度较水对照组明显厚，髓鞘生长比较完好，变坏的雪旺细胞较少，轴突直径较大。故针刺腰俞、风市能促进损伤的坐骨神经有髓纤维的再生，能促进感觉、运动神经纤维的恢复，是一种治疗坐骨神经损伤的有效方法。
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参考文献
1 高维滨.神经系统疾病针灸疗法，北京:中国医药科技出版社，1993，113.
2 Hare GMT.Walking track analysis A long-term assessment of peripheral nerve recovery.Plast Reconstr Sarg，1992，89:251.
3 沈宁江，朱家恺.坐骨神经功能指数在神经功能评价中的应用.中华显微外科杂志，1993，16(4):284-287.
4 何北平.大鼠坐骨神经再生纤维形态学变化、微机图像处理系统数字图像分析.解剖学杂志，1992，15(2):91-92.
作者单位:063000河北省唐山市路南医院
(收稿日期:2003-07-18) (编辑 李欣), 百拇医药(李继安)
关键词 针刺 周围神经损伤 实验研究
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-6424(2003)04-0301-03
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周围神经损伤是临床常见的损伤性疾病，虽然治疗方法很多，但多是临床疗效报道，经过客观实验评价的报道却很少。针刺是周围神经损伤常用的治疗方法 [1] ，结合实验手段探讨针刺对周围神经损伤的修复作用具有重要的意义。为此我们以Wistar大鼠坐骨神经损伤为动物模型，以坐骨神经功能指数、电生理、病理形态计量学及电镜下的超微结构等指标来观察针刺对周围神经损伤的修复作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组 Wistar人鼠36只，体重140～160g，鼠龄6周，均为雄性，由华北煤炭医学院实验动物中心提供。将大鼠随机分成3组，每组12只，均于周围神经损伤后开始治疗。3组分别为:(1)针刺组，选穴:风市、腰俞，0.5寸毫针，针刺进针，小幅度提插、捻转，留针15min，然后凉开水2ml灌胃每天2次;(2)对照组1(VitB 1 、VitB 12 组):VitB 1 、VitB 12 混合2ml，灌胃每天2次;(3)对照组2(水对照组):凉开水2ml灌胃每天2次。3组实验动物条件均衡，饲养方式及饲食量相同。
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1.2 动物模型的制备 将Wistar大鼠称重后，用10%水合氯醛3ml/kg腹腔内注射，在左侧坐骨神经走向处切开皮肤，分离肌肉，在坐骨结节下方0.5cm处用钳捻挫坐骨神经15s，用丝线缝合在捻挫点处肌肉上做标记，然后缝合分离的肌肉和皮肤。
1.3 坐骨神经功能指数(SFI)测定 自制大鼠足印行走箱，按Bain公式计算出SFI [2]:SFI=-38.3(EPL-NPL/NPL )+109.5(ETS-NTS/NTS )+13.3(ETI-NTI/NTI )-8.8以SFI0为参考值，-100为神经完全断离指标，计算出SFI的恢复率(%)。3组分别在捻挫后第7、14、21、28天测量SFI。
1.4 电生理实验 将3组动物分别在捻挫后第1、3、7、14天测量坐骨神经感觉神经传导速度(SCV)。SCV(m/s)= 刺激点至记录的距离(mm)/刺激点至记录点的潜伏期(ms)
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1.5 病理形态计量学及超微结构的研究 2周后将3组动物各处死一半，取捻挫坐骨神经点下方5mm处的一段神经半薄切片处理，光镜下观察并进行形态计量学分析，并做电镜超微结构的研究。4周时方法同上，电镜及光镜下观察有髓纤维的形态、髓鞘的厚度、血管、巨噬细胞等。用图像分析仪分析有髓纤维的密度，并进行统计学处理。
1.6 统计学方法 所得结果均用X±s表示，两个样本均数比较用组间t检验，多个样本均数比较用方差分析。
2 结果
2.1 坐骨神经功能指数SFI测定结果 见表1。
表1 坐骨神经捻挫后不同时期SFI恢复率(略)
在损伤后1周时，各组间差异无显著性(P>0.05)，在神经损伤后2、3、4周时，针刺组SFI好于水对照组(P<0.01)，而与VitB 1 、VitB 12 对照组差异无显著性(P>0.05)。
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2.2 电生理实验结果 见表2。
表2 感觉神经传导速度 (m/s，X±s)(略)
在神经损伤后第1天测量感觉神经传导速度，结果呈电静息状态;第3天各组之间差异无显著性(P>0.05);第7、14天针刺组好于水对照组(P<0.01)，而与VitB 1 、VitB 12 对照组差异无显著性(P>0.05)。
2.3 形态学参数
2.3.1 坐骨神经捻挫2、4周时形态计量结果 见表3。
表3 捻挫2周及4周时有髓纤维的密度 (个/mm)(略)
坐骨神经捻挫2周及4周时，有髓纤维密度针刺组好于水对照组(P<0.01)，而与VitB 1 、VitB 12 对照组差异无显著性(P>0.05)。
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2.3.2 病理形态学 坐骨神经捻挫2、4周时病理形态学:光镜下可见有髓纤维的形态，针刺组轴突直径相对较大，且有髓纤维的密度、血管及巨噬细胞明显多于对照组。电镜下可见有髓纤维的形态针刺组和VitB 1 、VitB 12 组髓鞘厚度较水对照组为厚，髓鞘生长较好，变坏的雪旺细胞较少，轴突直径较大。
3 讨论
坐骨神经的走行部位为足少阳胆经和足太阳膀胱经循行部位，针灸临床工作中，坐骨神经疾病取足少阳胆经和足太阳膀胱经腧穴多能得到明显的疗效。现代研究也证明针刺对外周血管的功能有调整作用，对甲皱微循环的血流速度、血流形态、血流颜色均有明显的即刻效应，对异形管袢、袢顶瘀血，清晰度均有明显的远期效应;对损伤性炎症有一定抗炎作用;提插捻转轻刺激可兴奋运动神经，使肌肉产生节律性收缩和放松，形成“泵”作用，促使静脉血液及淋巴液回流，进而改善局部血液循环和促进物质代谢。由此我们认为针刺可以促进局部代谢并有益于神经损伤的恢复。以Wistar大鼠坐骨神经捻挫为动物模型，给予针刺腰俞穴、风市穴取其“通经活络、调气活血”之功效。设两个对照组，分别为水对照组、VitB1 、VitB 12 组，3组于周围神经损伤后不同时期检测坐骨神经功能指数、感觉神经传导速度、病理形态计量学图像分析及电镜下超微结构的研究。结果:(1)SFI是评价坐骨神经再生较有价值的检查方法 [3] ，通过测定Wistar大鼠坐骨神经损伤后第1、2、3、4周的SFI，发现在损伤后2、3、4周时，针刺组SFI好于水对照组(P<0.01)，所以认为针刺能促进神经损伤后的功能恢复。(2)神经传导是神经纤维最基本的电特性，神经电生理的变化是评价神经损伤及修复最早最敏感的客观指标。在神经损伤的最初几天，针刺实验组与对照组差异无显著性(P>0.05)，说明神经损伤有一个修复过程。在损伤后第7、14天时，针刺组、VitB 1、VitB 12 组感觉神经传导速度高于水对照组。说明针刺能够促进感觉神经功能的恢复。(3)神经损伤后再生比较明显的变化就是有髓纤维数量的改变 [4] ，在损伤后2、4周时通过图像分析仪对有髓纤维的个数与数面密度进行定量分析，结果发现针刺组、VitB 1 、VitB 12 组髓纤维的密度好于水对照组(P<0.01)。在电镜下可见针刺组髓鞘的厚度较水对照组明显厚，髓鞘生长比较完好，变坏的雪旺细胞较少，轴突直径较大。故针刺腰俞、风市能促进损伤的坐骨神经有髓纤维的再生，能促进感觉、运动神经纤维的恢复，是一种治疗坐骨神经损伤的有效方法。
, http://www.100md.com
参考文献
1 高维滨.神经系统疾病针灸疗法，北京:中国医药科技出版社，1993，113.
2 Hare GMT.Walking track analysis A long-term assessment of peripheral nerve recovery.Plast Reconstr Sarg，1992，89:251.
3 沈宁江，朱家恺.坐骨神经功能指数在神经功能评价中的应用.中华显微外科杂志，1993，16(4):284-287.
4 何北平.大鼠坐骨神经再生纤维形态学变化、微机图像处理系统数字图像分析.解剖学杂志，1992，15(2):91-92.
作者单位:063000河北省唐山市路南医院
(收稿日期:2003-07-18) (编辑 李欣), 百拇医药(李继安)