甲状腺乳头状癌P27 KIP1 的表达及临床意义
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中华中西医杂志 2003年
【摘要】 目的 探讨p27 kip1 与甲状腺乳头状癌的相关性。方法 用免疫组化方法检测p27蛋白在6例结节性甲状腺肿、10例甲状腺瘤和36例甲状腺乳头状癌组织中的表达水平。结果 p27蛋白在6例结节性甲状腺肿、10例甲状腺瘤中均有表达，前者着色明显高于后者，在乳头状癌中阳性表达为30/36例，合并淋巴结转移、局部浸润标本阳性率明显低于无淋巴结转移、无组织浸润的甲状腺癌。结论 p27 kip1 的表达与甲状腺乳头状癌的淋巴转移及肿瘤浸润显著相关。
关键词 p27 kip1 甲状腺乳头状癌 免疫组织化学
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)07-0973-02
The expression and clinical significance
, 百拇医药
of p27 kip1 in papillary thyroid carcinoma
Chen Xiang，Tang Jierong，Gao Mingliang，et al.
Department of Pathology，Xiang Tan Hospital，Xiangtan411100.
【Abstract】 Objective To research the relationship between the level of expression of p27 kip1 and papillary thyroid carcinoma(PTC).Methods The expression of p27 kip1 of all specimens were detected by immunohistochemical method.Results 6goitres and10thyroid adenomas were all positive.30/36cases of papillary ca
, 百拇医药
rcinoma were also positive in the experiment.The level of p27protein in thyroid carcinoma with lymph node metastasis or invasion were more lower than those with no any.Conclusion Low p27 kip1 expression in papillary thyroid carcinoma was significantˉly associated with high incidence of lymph node metastasis and local i
nvasion，also poor prognosis.
Key words p27 kip1 thyroid papillary carcinoma immunohistochemistry
, http://www.100md.com
甲状腺乳头状癌(PTC)占甲状腺癌的60%～70%，是最常见的甲状腺恶性肿瘤 [1] 。本文采用免疫组化SAP法，研究抑癌基因p27 kip1 在甲状腺乳头状癌中的表达，探讨它与甲状腺乳头状癌生物学行为的关系。
1 材料与方法
1.1 病例选择 36例甲状腺乳头状癌及6例结节性甲状腺肿、10例甲状腺腺瘤标本取自湘雅医院、湘潭市立医院及湘潭市中心医院1993～2002年手术切除标本。其中甲状腺乳头状癌男11例，女25例，年龄29～64岁，平均年龄31.2岁。有组织浸润者10例，颈部淋巴结转移18例。所有标本经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋切片，厚度4μm。
1.2 试剂选择 鼠抗人p27 kip1 蛋白单克隆抗体及SABG试剂盒购自福州迈新公司，DAB试剂为武汉Boster公司产品。1.3 方法及统计 切片常规脱蜡，3%H 2 O 2 作用5min，微波修复抗原10～20min，依次加入一抗、二抗、三抗作用，经DAB显色，苏木素复染，PBS返蓝，脱水，二甲苯透明封片观察。以PBS液代替一抗作阴性对照。p27 kip1 阳性染色定位于细胞核内，为棕黄色颗粒。表达阳性病例判断参照Polliˉna标准:以切片阳性细胞数≥5%为阳性病例，<5%为阴性病例，每例标本任取3个高倍视野，计数不少于300个细胞，用χ 2 检验进行统计。
, 百拇医药
2 结果
2.1 p27蛋白在不同类型甲状腺肿瘤中的表达 如表1所示:结节性甲肿、甲状腺腺瘤细胞核中p27蛋白阳性表达率为100%，明显高于在甲状腺乳头状癌中的表达30/36(83%)，P<0.01。
2.2 p27 kip1 与甲状腺肿瘤组织浸润及淋巴转移的关系 p27 kip1 在无淋巴结转移甲状腺癌中的表达(18/18)明显高于合并淋巴结转移(7/18)甲状腺癌中的表达(P<0.01)，在合并组织浸润甲癌中的表达(4/10)明显低于无组织浸润(21/26)甲癌中的表达(P<0.05)。
表1 p27在PTC中的表达及与淋巴结转移、组织浸润的关系 (略)
3 讨论
p27蛋白又称激酶抑制蛋白，系KIP家族一员，是一种能够结合Cyclin E-CDK2复合体的多肽分子，通过抑制前者对Rb蛋白的磷酸化，抑制E2F的释放，在肿瘤细胞分裂增殖中起着重要的抑制作用。p27表达定位于细胞核，其通过N端、C端分别与CDK及PCNA的结合抑制细胞的增殖 [2] 。现多认为 [3] :p27与Cyclin D-CDK4的结合减少有利于Cyclin E-CDK2、Cyclin A-CDK2的结合，减少E2F的释放，从而抑制细胞周期的转换。
, 百拇医药
本研究显示p27在乳头状癌阳性表达为83%，而结甲与甲状腺腺瘤阳性表达均为100%。说明它们在不同甲状腺肿瘤病理类型有不同的表达。我们在实验中注意到乳头状瘤、乳头状癌的阳性片多为弱阳性，并常表现染色浅，合并淋巴结转移与无淋巴结转移、合并组织浸润与无组织浸润之间差异有显著性。这表明:p27表达低的多为恶性程度较高、分化较低、临床分期较晚的病例。p27在甲癌的发 生、发展过程中起着重要的作用，它的变化相对肿瘤的间变、浸润、转移为早期事件 [4] ，这有助于甲状腺肿瘤良恶性及预后的判定。
参考文献
1 邓仲端，刘子君.外科病理学.第二版.武汉:湖北科学技术出版社，1999，1299.
2 Coppock DL，Buffolino P，Kopman C，et al.Inhibition of the melanoma cell cycle and regulation at the G1/S transition by12-0-Tetradeˉcanoylphorbol-13-acetate(TPA)by modulation of CDK2activity.Exp Cell Res，1995，221:92-102.
, http://www.100md.com
3 Shin JY，Kim HS，Park J，et al.Mechanism for inactivation of the KIP family cyclin-dependent kinase inhibitior genes in gastric cancer cell.Cancer Res，2000，60:262-265.
4 Watanabe H，Pan ZQ，Nicole，et al.Suppression of cell transformation by the cyclin-dependent kinase inhibitor p57 KIP2 requires binding to prolifˉerating cell nuclear antigen.Biochemistry，1998，95:1392-1397.
作者单位:1 411100湖南省湘潭市立医院
2 411100湖南省湘潭市中心医院
(编辑 张璇), 百拇医药(陈湘)
关键词 p27 kip1 甲状腺乳头状癌 免疫组织化学
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)07-0973-02
The expression and clinical significance
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of p27 kip1 in papillary thyroid carcinoma
Chen Xiang，Tang Jierong，Gao Mingliang，et al.
Department of Pathology，Xiang Tan Hospital，Xiangtan411100.
【Abstract】 Objective To research the relationship between the level of expression of p27 kip1 and papillary thyroid carcinoma(PTC).Methods The expression of p27 kip1 of all specimens were detected by immunohistochemical method.Results 6goitres and10thyroid adenomas were all positive.30/36cases of papillary ca
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rcinoma were also positive in the experiment.The level of p27protein in thyroid carcinoma with lymph node metastasis or invasion were more lower than those with no any.Conclusion Low p27 kip1 expression in papillary thyroid carcinoma was significantˉly associated with high incidence of lymph node metastasis and local i
nvasion，also poor prognosis.
Key words p27 kip1 thyroid papillary carcinoma immunohistochemistry
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甲状腺乳头状癌(PTC)占甲状腺癌的60%～70%，是最常见的甲状腺恶性肿瘤 [1] 。本文采用免疫组化SAP法，研究抑癌基因p27 kip1 在甲状腺乳头状癌中的表达，探讨它与甲状腺乳头状癌生物学行为的关系。
1 材料与方法
1.1 病例选择 36例甲状腺乳头状癌及6例结节性甲状腺肿、10例甲状腺腺瘤标本取自湘雅医院、湘潭市立医院及湘潭市中心医院1993～2002年手术切除标本。其中甲状腺乳头状癌男11例，女25例，年龄29～64岁，平均年龄31.2岁。有组织浸润者10例，颈部淋巴结转移18例。所有标本经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋切片，厚度4μm。
1.2 试剂选择 鼠抗人p27 kip1 蛋白单克隆抗体及SABG试剂盒购自福州迈新公司，DAB试剂为武汉Boster公司产品。1.3 方法及统计 切片常规脱蜡，3%H 2 O 2 作用5min，微波修复抗原10～20min，依次加入一抗、二抗、三抗作用，经DAB显色，苏木素复染，PBS返蓝，脱水，二甲苯透明封片观察。以PBS液代替一抗作阴性对照。p27 kip1 阳性染色定位于细胞核内，为棕黄色颗粒。表达阳性病例判断参照Polliˉna标准:以切片阳性细胞数≥5%为阳性病例，<5%为阴性病例，每例标本任取3个高倍视野，计数不少于300个细胞，用χ 2 检验进行统计。
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2 结果
2.1 p27蛋白在不同类型甲状腺肿瘤中的表达 如表1所示:结节性甲肿、甲状腺腺瘤细胞核中p27蛋白阳性表达率为100%，明显高于在甲状腺乳头状癌中的表达30/36(83%)，P<0.01。
2.2 p27 kip1 与甲状腺肿瘤组织浸润及淋巴转移的关系 p27 kip1 在无淋巴结转移甲状腺癌中的表达(18/18)明显高于合并淋巴结转移(7/18)甲状腺癌中的表达(P<0.01)，在合并组织浸润甲癌中的表达(4/10)明显低于无组织浸润(21/26)甲癌中的表达(P<0.05)。
表1 p27在PTC中的表达及与淋巴结转移、组织浸润的关系 (略)
3 讨论
p27蛋白又称激酶抑制蛋白，系KIP家族一员，是一种能够结合Cyclin E-CDK2复合体的多肽分子，通过抑制前者对Rb蛋白的磷酸化，抑制E2F的释放，在肿瘤细胞分裂增殖中起着重要的抑制作用。p27表达定位于细胞核，其通过N端、C端分别与CDK及PCNA的结合抑制细胞的增殖 [2] 。现多认为 [3] :p27与Cyclin D-CDK4的结合减少有利于Cyclin E-CDK2、Cyclin A-CDK2的结合，减少E2F的释放，从而抑制细胞周期的转换。
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本研究显示p27在乳头状癌阳性表达为83%，而结甲与甲状腺腺瘤阳性表达均为100%。说明它们在不同甲状腺肿瘤病理类型有不同的表达。我们在实验中注意到乳头状瘤、乳头状癌的阳性片多为弱阳性，并常表现染色浅，合并淋巴结转移与无淋巴结转移、合并组织浸润与无组织浸润之间差异有显著性。这表明:p27表达低的多为恶性程度较高、分化较低、临床分期较晚的病例。p27在甲癌的发 生、发展过程中起着重要的作用，它的变化相对肿瘤的间变、浸润、转移为早期事件 [4] ，这有助于甲状腺肿瘤良恶性及预后的判定。
参考文献
1 邓仲端，刘子君.外科病理学.第二版.武汉:湖北科学技术出版社，1999，1299.
2 Coppock DL，Buffolino P，Kopman C，et al.Inhibition of the melanoma cell cycle and regulation at the G1/S transition by12-0-Tetradeˉcanoylphorbol-13-acetate(TPA)by modulation of CDK2activity.Exp Cell Res，1995，221:92-102.
, http://www.100md.com
3 Shin JY，Kim HS，Park J，et al.Mechanism for inactivation of the KIP family cyclin-dependent kinase inhibitior genes in gastric cancer cell.Cancer Res，2000，60:262-265.
4 Watanabe H，Pan ZQ，Nicole，et al.Suppression of cell transformation by the cyclin-dependent kinase inhibitor p57 KIP2 requires binding to prolifˉerating cell nuclear antigen.Biochemistry，1998，95:1392-1397.
作者单位:1 411100湖南省湘潭市立医院
2 411100湖南省湘潭市中心医院
(编辑 张璇), 百拇医药(陈湘)