自动免疫比浊测定中检测抗原过量的参数探讨
【文献标识码】 B 【文章编号】 1684-2030(2003)05-0465-02
在免疫比浊测定中，抗原抗体的反应是按一定的分子比例结合的，当比例适合时，免疫反应最完全，当抗原或抗体过量特别是抗原过量时，免疫反应将减弱。本文以测定IgA为例，对抗原过量情况进行探讨，报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 试剂 IgA抗体及参考标准品，由上海北海精细化学研究所提供。有效期内使用。
1.1.2 仪器 COBAS-MIRA全自动生化分析(瑞士ROCHE公司生产)。
1.2 方法 免疫比浊测定，自编程序，参数有:标准模式，逻辑对数法(LOGIT/LOG5)，温度37℃，波长340nm，样本试剂比为1:50，计算模式:终点法多点监测，第一次读数0.5s，时间8min，每隔10s读一次吸光度，仪器可将原始吸光度制成随时间变化的曲线。
2 操作及结果
配制0～80g/L一系列IgA样本(通过加大样本的用量来实现的，其中4g/L以下0.5g/L递增，16g/L以下以2.0g/L递增，后按5g/L增加)，按本法测定后吸光度———浓度绘 制曲线，见图1，图1中各区的含义见表1。
表1 不同范围吸光度及浓度的测定结果 (略)
图2 不同值样本的反应速率曲线(略)
从图1得知线性范围为12g/L后，再对各值的原始吸光度随时间进程的曲线进行分析;见图2，可见它们的反应速率有很大差别，线性范围内的值，其抗原抗体比例适合，生成的免疫复合量多又快，因此把线性范围内的值在反应达90%以上时为接近终点的标准，反应时间在2.5min左右，然后将异常值在此点测定的结果与反应结束时的结果相比，即C 2.5 /C 8 的百分率值(见表1)可见抗原过量时其生成物量减少且反应慢，因此把反应到2.5min时的一点叫做抗原过量检查点，C 2.5 /C 8 的百分率叫抗原过量的限额，即80%，它们均作为仪器的参数，当仪器测定某样本时，把在报告点所得的百分率和此值相比较，若小于此值便提示抗原过量。
3 讨论
抗原抗体反应一个复杂的过程，特别在免疫比浊反应中，抗原的过量将干扰抗原抗体复合物的生成，造成抗原假阴性值。本文利用生化分析仪有抗原过量检查的功能，准确地设置参数，有效地避免了错误报告的发生，提高了结果的准确性。由于不同的生化分析仪有不同的特性，所以必须区别对待。
(收稿日期:2003-03-31) (编辑 纪永健), 百拇医药(曲红艳)
在免疫比浊测定中，抗原抗体的反应是按一定的分子比例结合的，当比例适合时，免疫反应最完全，当抗原或抗体过量特别是抗原过量时，免疫反应将减弱。本文以测定IgA为例，对抗原过量情况进行探讨，报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 试剂 IgA抗体及参考标准品，由上海北海精细化学研究所提供。有效期内使用。
1.1.2 仪器 COBAS-MIRA全自动生化分析(瑞士ROCHE公司生产)。
1.2 方法 免疫比浊测定，自编程序，参数有:标准模式，逻辑对数法(LOGIT/LOG5)，温度37℃，波长340nm，样本试剂比为1:50，计算模式:终点法多点监测，第一次读数0.5s，时间8min，每隔10s读一次吸光度，仪器可将原始吸光度制成随时间变化的曲线。
2 操作及结果
配制0～80g/L一系列IgA样本(通过加大样本的用量来实现的，其中4g/L以下0.5g/L递增，16g/L以下以2.0g/L递增，后按5g/L增加)，按本法测定后吸光度———浓度绘 制曲线，见图1，图1中各区的含义见表1。
表1 不同范围吸光度及浓度的测定结果 (略)
图2 不同值样本的反应速率曲线(略)
从图1得知线性范围为12g/L后，再对各值的原始吸光度随时间进程的曲线进行分析;见图2，可见它们的反应速率有很大差别，线性范围内的值，其抗原抗体比例适合，生成的免疫复合量多又快，因此把线性范围内的值在反应达90%以上时为接近终点的标准，反应时间在2.5min左右，然后将异常值在此点测定的结果与反应结束时的结果相比，即C 2.5 /C 8 的百分率值(见表1)可见抗原过量时其生成物量减少且反应慢，因此把反应到2.5min时的一点叫做抗原过量检查点，C 2.5 /C 8 的百分率叫抗原过量的限额，即80%，它们均作为仪器的参数，当仪器测定某样本时，把在报告点所得的百分率和此值相比较，若小于此值便提示抗原过量。
3 讨论
抗原抗体反应一个复杂的过程，特别在免疫比浊反应中，抗原的过量将干扰抗原抗体复合物的生成，造成抗原假阴性值。本文利用生化分析仪有抗原过量检查的功能，准确地设置参数，有效地避免了错误报告的发生，提高了结果的准确性。由于不同的生化分析仪有不同的特性，所以必须区别对待。
(收稿日期:2003-03-31) (编辑 纪永健), 百拇医药(曲红艳)