RP-HPLC法测定红花中6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷含量
【摘要】 目的 建立红花中6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷的高效液相色谱测定方法。方法 50%乙醇超声提取，色谱柱C18柱，流动相为乙腈-0.15%磷酸(13.5:86.5)，检测波长342nm。结果 6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷在3.2～80μg/ml线性关系良好(r=0.99943)，回收率为99.27%，RSD为2.4%(n=4)。结论 为红花中6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷提供了良好的测定方法。
关键词 红花 6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷 高效液相色谱法 含量测定
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-7587(2003)08-0739-02
红花为菊科植物红花Carthmus tinctorius L.的干燥花，是活血化瘀的常用中药。6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷为红花中可作为质控的主要成分。因为高效液相色谱法操作简便，结果准确，具有良好的重现性，所以本文以6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷为质量控制指标，建立了用高效液相色谱法测定6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷的含量的方法。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 仪器 岛津LC-10AD高效液相色谱仪;检测器:LC- 10AVP UV-VIS检测器;固定相:C18硅胶(5μm);色谱柱:Diˉamonsil(钻石)(250mm×4.6mm);岛津UV-2450紫外可见分光光度计。
1.2 试药 6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品由合作方提供;乙腈:色谱纯;水:重蒸水;磷酸:分析纯;红花:为不同产地药材。
1.3 色谱条件 流动相:乙腈-0.15%磷酸(13.5∶86.5);检测波长:342nm;流速:1.5ml/min。柱温:35℃。
1.4 对照品储备液的制备 精密称取6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷标准品2mg于25ml容量瓶中并用甲醇溶解并定容至刻度，得到0.08mg/ml浓度。1.5 标准曲线的制作 分别精密吸取0.5、1、2、3、4、5ml至5ml容量瓶中，分别用甲醇稀释至刻度，得到3.2μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、48μg/ml、64μg/ml、80μg/ml。分别取6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品溶液20μl进样，并以峰面积(A)于浓度(C)回归，得6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷标准曲线为A=3.94948e-0.05C+0.846665，r=0.99943，浓度在3.2～80μg/ml有良好线性关系。
, 百拇医药
1.6 精密度试验 分别精密吸取6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品溶液20μl，重复进样5次结果显示6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品峰面积精密度良好，RSD为2.6%。
1.7 重复性试验 取同一批号得红花样品5份，按上述方法测定，结果表明:本方法重现性好，RSD为0.1%。
1.8 加样回收率试验 采用加样回收法，取已知含量的红花，分别添加6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品，依法测定回收率，见表1。
表1 6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷回收率测定结果略
1.9 稳定性试验 取已知含量的供试品溶液，分别于0、1、 2、3、4、5、24h进样20μl，测得6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷含量基本稳定，RSD为3%。
1.10 供试品溶液的制备与测定 取本品粉末约0.3g精密称定，置10ml具塞试管中，精确加入50%乙醇10ml，超声提取30min，离心(5000r/min，5min)，上清液过0.45μm滤膜，作为供试品试液。
表2 不同产地样品含量比较 (略)
2 结果与讨论
(1)采用RP-HPLC法测定样品中6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷的含量，方法简便，快速准确，可以作为该样品的含量控制方法。(2)用超声提取样品有效成分比较安全，方法简便易行。
作者单位:519020珠海国家中药现代化工程技术研究中心
(收稿日期:2003-08-29)
(编辑 李年令), 百拇医药(陈新发)
关键词 红花 6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷 高效液相色谱法 含量测定
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-7587(2003)08-0739-02
红花为菊科植物红花Carthmus tinctorius L.的干燥花，是活血化瘀的常用中药。6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷为红花中可作为质控的主要成分。因为高效液相色谱法操作简便，结果准确，具有良好的重现性，所以本文以6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷为质量控制指标，建立了用高效液相色谱法测定6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷的含量的方法。
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1 材料与方法
1.1 仪器 岛津LC-10AD高效液相色谱仪;检测器:LC- 10AVP UV-VIS检测器;固定相:C18硅胶(5μm);色谱柱:Diˉamonsil(钻石)(250mm×4.6mm);岛津UV-2450紫外可见分光光度计。
1.2 试药 6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品由合作方提供;乙腈:色谱纯;水:重蒸水;磷酸:分析纯;红花:为不同产地药材。
1.3 色谱条件 流动相:乙腈-0.15%磷酸(13.5∶86.5);检测波长:342nm;流速:1.5ml/min。柱温:35℃。
1.4 对照品储备液的制备 精密称取6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷标准品2mg于25ml容量瓶中并用甲醇溶解并定容至刻度，得到0.08mg/ml浓度。1.5 标准曲线的制作 分别精密吸取0.5、1、2、3、4、5ml至5ml容量瓶中，分别用甲醇稀释至刻度，得到3.2μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、48μg/ml、64μg/ml、80μg/ml。分别取6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品溶液20μl进样，并以峰面积(A)于浓度(C)回归，得6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷标准曲线为A=3.94948e-0.05C+0.846665，r=0.99943，浓度在3.2～80μg/ml有良好线性关系。
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1.6 精密度试验 分别精密吸取6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品溶液20μl，重复进样5次结果显示6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品峰面积精密度良好，RSD为2.6%。
1.7 重复性试验 取同一批号得红花样品5份，按上述方法测定，结果表明:本方法重现性好，RSD为0.1%。
1.8 加样回收率试验 采用加样回收法，取已知含量的红花，分别添加6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷对照品，依法测定回收率，见表1。
表1 6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷回收率测定结果略
1.9 稳定性试验 取已知含量的供试品溶液，分别于0、1、 2、3、4、5、24h进样20μl，测得6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷含量基本稳定，RSD为3%。
1.10 供试品溶液的制备与测定 取本品粉末约0.3g精密称定，置10ml具塞试管中，精确加入50%乙醇10ml，超声提取30min，离心(5000r/min，5min)，上清液过0.45μm滤膜，作为供试品试液。
表2 不同产地样品含量比较 (略)
2 结果与讨论
(1)采用RP-HPLC法测定样品中6-羟基山萘酚-3-O-葡萄糖苷的含量，方法简便，快速准确，可以作为该样品的含量控制方法。(2)用超声提取样品有效成分比较安全，方法简便易行。
作者单位:519020珠海国家中药现代化工程技术研究中心
(收稿日期:2003-08-29)
(编辑 李年令), 百拇医药(陈新发)