血小板源性内皮细胞生长因子的表达在肝癌诊断中的意义
【摘要】 目的 观察肝癌组织中PD-ECGF的表达情况及其在癌旁组织(小结节性肝硬化、肝细胞增生)和正常肝细胞的不同表达，探讨PD-ECGF在肝癌诊断、鉴别诊断中的意义。方法 应用S-P免疫组化方法观察5例肝癌细胞的PD-ECGF表达，分析其与肝癌诊断的关系。结果 肝癌细胞PD-ECGF表达强阳性(+++)、癌旁增生的肝细胞PD-ECGF弱阳性(+)、正常肝细胞PD-ECGF弱阳性或阴性(+/-)。PD-ECGF表达与组织学分型无关。结论 PD-ECGF的表达情况可作为肝癌诊断、鉴别诊断的一种标志物。
关键词 肝癌 PD-ECGF 免疫组化 标志物
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-6424(2003)07-0608-02
小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)在肝癌中的表达研究较少，我院在检测肝癌患者血浆中血小板源性内皮生长因子时发现肝癌组与正常对照组之间差异有显著性意义。本文应用S-P免疫组化方法观察肝癌细胞中PD-ECGF的表达，分析其与癌旁增生肝细胞和正常肝细胞的不同表达情况，进一步为肝癌的临床诊断、鉴别诊断提供依据。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 材料 收集5例肝癌手术切除标本，男4例，女1例，年龄40～66岁，其中4例男性分别为66、40、56、53岁，1例女性为50岁，平均53岁。按《中国常见病恶性肿瘤诊断规范》(第2册)原发性肝癌标准进行病理诊断 [1] :肝细胞性肝癌4例(3例Ⅲ级、1例Ⅱ～Ⅲ级)，其中3例伴肝细胞增生、小结节性肝硬化;胆管细胞性肝癌1例;肝内胆管结石手术标本2例，取其较正常肝细胞作为对照组。
1.2 试剂 鼠抗人PD-ECGF Ab-1(P-GF.44C)单克隆抗体、Biotinylated羊抗鼠抗体，为美国R&D Systems公司产品;免疫组化染色试剂盒(S-P即用型)、DAB3，3-二氨基联苯胺盐酸盐显色试剂盒均购自深圳晶美生物工程公司。
1.3 方法 HE染色按常规进行;免疫组化采用链酶菌素-生物素(S-P)法染色，操作按说明书进行，每次染色有阳、阴性对照。
, http://www.100md.com
1.4 结果判定 根据肿瘤细胞膜或细胞质的染色程度及染色细胞百分率来判断:凡细胞质或细胞膜上出现棕黄色物质为PD-ECGF阳性细胞，染色浅或未着色为阴性。阳性细胞数≥25%为弱阳性(+)、50%为阳性(++)、75%为强阳性(+++)，<25%为阴性(-)。
2 结果
PD-ECGF在5例肝癌细胞中呈阳性表达，其中3例强阳性(+++)，见图1，2例为阳性(++)，见图2，主要表达于癌细胞的胞质或胞膜，其表达呈明显的异质性，但与组织学分型没有明显的关系。癌旁小结节性肝硬化、肝细胞增生区呈弱阳性、有的区域呈阴性，见图3。PD-ECGF在2例肝胆管结石的正常肝细胞(非癌)中呈阴性(-)，见图4，仅少数慢性炎症所致的肝细胞增生区域呈弱阳性(+)。
图1略 图2略 图3略 图4略
3 讨论
, 百拇医药
血小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)与胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶或胶质抑制剂(gliostatin)是一样的。有无机磷酸的时候，它催化胸苷和脱氧尿苷可逆的(磷酸)裂解成它们对应的碱基和2-脱氧核糖-1-磷酸。其分子量为55KD。实体瘤的生长有赖于新生血管的形成，目前血管生长因子被认为是一种与恶性肿瘤血管增殖有关的新型肿瘤标志物 [2，3] 。在目前已知的血管生长因子有20多种 [4] ，但对于血小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)与人体肿瘤的关系，尤其是对其在肝癌中的意义研究甚少，根据文献 [5] 结果表明原发性肝癌(HCC)组血浆PD-ECGF水平较之慢性肝炎(CH)、肝硬化(HC)组有明显增高。血小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)的功能是对内皮细胞和血小板内的非肝素结合的血管生成因子有趋化性和致分裂作用。肝癌组织中有丰富的新生血管，PD-ECGF与肝癌组织中的新生血管关系密切，因而肝癌组织中免疫组化 PD-ECGF的表达为强阳性。慢性肝炎、癌旁小结节性肝硬化、肝细胞增生区呈弱阳性，有的区域呈阴性;这是由于炎症等也引起再生、增生等，并由于炎症或组织坏死、血小板聚集，可能引起血小板源性内皮细胞生长因子释放，因此在上述病变的免疫组化中PD-ECGF有所表达、呈弱阳性;而在癌组织中是呈强阳性表达，这与血浆的检测结果(原发性肝癌组血浆PD-ECGF水平较之慢性肝炎、肝硬化组有明显增高)是一致的。在正常肝组织中或多或少也有血小板源性内皮细胞生长因子，可呈弱阳性或阴性。本组病例显示肝癌组织中免疫组化PD-ECGF表达明显强阳性(+++)，有助于肝细胞癌的诊断。若是弱阳性或阴性则为肝组织的增生性疾病、炎症或正常肝组织，这对于肝癌的诊断、鉴别诊断是有价值的，通过进一步研究，PD-ECGF可望作为检测肝癌的一种标志物。
, 百拇医药
参考文献
1 中华人民共和国卫生部医政司.中国常见恶性肿瘤诊治规范(第二分册).原发性肝癌，北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1991，15-18.
2 何美琼，全新胜，张玲，等.肿瘤相关物质在恶性肿瘤与非恶性肿瘤的检测及其临床意义.福建医药杂志，2002，24(5):110-111.
3 范公忍，邬光惠，胡大荣，等.肿瘤特异性生长因子测定在肝癌诊断中应用及与AFP的比较.癌症，2001，20(2):203-203.
4 韩圣华，黄建富，殷凤峙.人肝细胞癌血管内皮生长因子的表达.福建医科大学学报，2000，34(1):33-34.
5 李文东，李兴光.血中血小板源性内皮细胞生长因子与肝细胞癌相关性的研究.现代检验医学杂志，2003，18(3):20-21.
基金项目:本课题为厦门市科委资助项目(厦卫教2001250)
作者单位:361006福建省厦门市湖里医院
(收稿日期:2003-09-29)
(编辑 夏天), 百拇医药
关键词 肝癌 PD-ECGF 免疫组化 标志物
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-6424(2003)07-0608-02
小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)在肝癌中的表达研究较少，我院在检测肝癌患者血浆中血小板源性内皮生长因子时发现肝癌组与正常对照组之间差异有显著性意义。本文应用S-P免疫组化方法观察肝癌细胞中PD-ECGF的表达，分析其与癌旁增生肝细胞和正常肝细胞的不同表达情况，进一步为肝癌的临床诊断、鉴别诊断提供依据。
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1 材料与方法
1.1 材料 收集5例肝癌手术切除标本，男4例，女1例，年龄40～66岁，其中4例男性分别为66、40、56、53岁，1例女性为50岁，平均53岁。按《中国常见病恶性肿瘤诊断规范》(第2册)原发性肝癌标准进行病理诊断 [1] :肝细胞性肝癌4例(3例Ⅲ级、1例Ⅱ～Ⅲ级)，其中3例伴肝细胞增生、小结节性肝硬化;胆管细胞性肝癌1例;肝内胆管结石手术标本2例，取其较正常肝细胞作为对照组。
1.2 试剂 鼠抗人PD-ECGF Ab-1(P-GF.44C)单克隆抗体、Biotinylated羊抗鼠抗体，为美国R&D Systems公司产品;免疫组化染色试剂盒(S-P即用型)、DAB3，3-二氨基联苯胺盐酸盐显色试剂盒均购自深圳晶美生物工程公司。
1.3 方法 HE染色按常规进行;免疫组化采用链酶菌素-生物素(S-P)法染色，操作按说明书进行，每次染色有阳、阴性对照。
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1.4 结果判定 根据肿瘤细胞膜或细胞质的染色程度及染色细胞百分率来判断:凡细胞质或细胞膜上出现棕黄色物质为PD-ECGF阳性细胞，染色浅或未着色为阴性。阳性细胞数≥25%为弱阳性(+)、50%为阳性(++)、75%为强阳性(+++)，<25%为阴性(-)。
2 结果
PD-ECGF在5例肝癌细胞中呈阳性表达，其中3例强阳性(+++)，见图1，2例为阳性(++)，见图2，主要表达于癌细胞的胞质或胞膜，其表达呈明显的异质性，但与组织学分型没有明显的关系。癌旁小结节性肝硬化、肝细胞增生区呈弱阳性、有的区域呈阴性，见图3。PD-ECGF在2例肝胆管结石的正常肝细胞(非癌)中呈阴性(-)，见图4，仅少数慢性炎症所致的肝细胞增生区域呈弱阳性(+)。
图1略 图2略 图3略 图4略
3 讨论
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血小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)与胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶或胶质抑制剂(gliostatin)是一样的。有无机磷酸的时候，它催化胸苷和脱氧尿苷可逆的(磷酸)裂解成它们对应的碱基和2-脱氧核糖-1-磷酸。其分子量为55KD。实体瘤的生长有赖于新生血管的形成，目前血管生长因子被认为是一种与恶性肿瘤血管增殖有关的新型肿瘤标志物 [2，3] 。在目前已知的血管生长因子有20多种 [4] ，但对于血小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)与人体肿瘤的关系，尤其是对其在肝癌中的意义研究甚少，根据文献 [5] 结果表明原发性肝癌(HCC)组血浆PD-ECGF水平较之慢性肝炎(CH)、肝硬化(HC)组有明显增高。血小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)的功能是对内皮细胞和血小板内的非肝素结合的血管生成因子有趋化性和致分裂作用。肝癌组织中有丰富的新生血管，PD-ECGF与肝癌组织中的新生血管关系密切，因而肝癌组织中免疫组化 PD-ECGF的表达为强阳性。慢性肝炎、癌旁小结节性肝硬化、肝细胞增生区呈弱阳性，有的区域呈阴性;这是由于炎症等也引起再生、增生等，并由于炎症或组织坏死、血小板聚集，可能引起血小板源性内皮细胞生长因子释放，因此在上述病变的免疫组化中PD-ECGF有所表达、呈弱阳性;而在癌组织中是呈强阳性表达，这与血浆的检测结果(原发性肝癌组血浆PD-ECGF水平较之慢性肝炎、肝硬化组有明显增高)是一致的。在正常肝组织中或多或少也有血小板源性内皮细胞生长因子，可呈弱阳性或阴性。本组病例显示肝癌组织中免疫组化PD-ECGF表达明显强阳性(+++)，有助于肝细胞癌的诊断。若是弱阳性或阴性则为肝组织的增生性疾病、炎症或正常肝组织，这对于肝癌的诊断、鉴别诊断是有价值的，通过进一步研究，PD-ECGF可望作为检测肝癌的一种标志物。
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参考文献
1 中华人民共和国卫生部医政司.中国常见恶性肿瘤诊治规范(第二分册).原发性肝癌，北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1991，15-18.
2 何美琼，全新胜，张玲，等.肿瘤相关物质在恶性肿瘤与非恶性肿瘤的检测及其临床意义.福建医药杂志，2002，24(5):110-111.
3 范公忍，邬光惠，胡大荣，等.肿瘤特异性生长因子测定在肝癌诊断中应用及与AFP的比较.癌症，2001，20(2):203-203.
4 韩圣华，黄建富，殷凤峙.人肝细胞癌血管内皮生长因子的表达.福建医科大学学报，2000，34(1):33-34.
5 李文东，李兴光.血中血小板源性内皮细胞生长因子与肝细胞癌相关性的研究.现代检验医学杂志，2003，18(3):20-21.
基金项目:本课题为厦门市科委资助项目(厦卫教2001250)
作者单位:361006福建省厦门市湖里医院
(收稿日期:2003-09-29)
(编辑 夏天), 百拇医药