HPLC测定风湿安泰片中士的宁的含量
【摘要】 目的 建立以高效液相色谱法(HPLC)测定风湿安泰片中士的宁含量的方法。方法 色谱柱填料是硅胶，流动相为正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨试液(50:50:5:0.35)，柱温为40℃，检测波长为254nm，流速为1.0ml/min。结果 士的宁在0.4～3.6μg范围内呈良好的线性关系;相关系数为0.9998;士的宁的平均加样回收率为98.95%(RSD=1.1477%)。结论HPLC方法灵敏，简便，结果准确，适用于风湿安泰片中士的宁的含量测定。
关键词 风湿安泰片 士的宁 高效液相色谱法
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-6424(2003)12-1070-02
Determination of strychnine in fenshi
antai tablets by HPLC
, 百拇医药
Jin Xiangqun，Liu Yonggang，Li Lianfang，et al.
Department of Pharmaceutical Science，College of Pharmacy，Jilin University，Changchun130021.
【Abstract】 Objective To establish a method for determination of strychninein fenshiantai tablets by HPLC.Methods Using hypersil SiO 2 phase volum(200×4.6)mm，5μm and of n-hexane-dtchlormoethane-methanol-ammonia water(50:50:5:0.35)as mobile phase;The colum temperature was at40℃;The detection wavelength wasat254nm and the flow rate was at1.0ml/min.Results A good linearity was found over the concentration range of0.4～3.6μg(Strychnine).The correlation coefficient was0.9998.The mean recovery was98.95%.Conclusion The HPLC method was sensitive，simple，accurate，and reliable for determining the contents of strychnine in fenshi-anˉtaitablets.
, 百拇医药
Key words fenshi antai tablets strychnine HPLC
风湿安泰片是马钱子(制)等多味中药制成的糖衣片，具有舒筋活血，祛风镇痛等功能。风湿安泰片原标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂》，收载登记号为WS-B-3793-98，标准中无含量测定项。该方中马钱子为君药，又是剧毒药，因此，为了保证用药安全及进一步控制该药的质量，本实验采用高效液相色谱法，对风湿安泰片中士的宁进行含量测定。本法操作简便，测定准确，重现性好，可作为控制该制剂内在质量的依据。
1 材料
仪器与试药:岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪(日本岛津)，岛津UV-265紫外分光光度计(日本岛津)。对照品士的宁由中国药品生物制品检定所提供，样品由长春英平药厂提供。甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
, http://www.100md.com 2 方法与结果
2.1 色谱条件 Hypersil SiO 2 色谱柱(200×4.6mm，5μm);流动相:正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨试液(50:50:5:0.35)流速1.0ml/min;柱温:40℃;检测波长:254nm。士的宁的分离度值大于1.5，定量方法为归一化法，理论塔板数按士的宁峰计算应不低于2500。
2.2 标准曲线绘制 精密称取士的宁对照品，加甲醇制成每1ml分别含0.4mg的混合溶液。分别精密吸取1、3、5、7、9μl注入液相色谱仪，测定，以对照品进样量(μg)为横坐 标，峰面积值为纵坐标绘制标准曲线图，士的宁的回归方程为y=202015943.5x+42104.5，r=0.9998。
2.3 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，重复进样6次，结果RSD=0.9103%。
, http://www.100md.com 2.4 重现性试验 按样品测定方法对同一样品测定5次，结果士的宁的平均含量为0.1135%，RSD=1.4552%。
2.5 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，依正文色谱条件，分别在0、4、8、12、24h注入液相色谱仪测定，结果RSD=0.8616%，结果表明，供试品溶液在24h内稳定。
2.6 回收率试验 取已知含量的供试品(批号:20021201士的宁含量为3.958mg/片)5份，分别精密加入士的宁对照品适量，依法测定，计算回收率，结果士的宁平均回收率98.95%，RSD=1.15%。
2.7 含量测定 [1] 。取本品20片，除去糖衣，研细，取1.0g，精密称定，置索氏提取器中，加入1ml浓氨水后，用氯仿100ml提取至无色，提取液蒸干，用氯仿10ml定量移至分液漏斗中，用硫酸溶液(3→100)提取5次，每次15ml，合并硫酸提取液，用浓氨水调节pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加醋酸乙酯溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。详见表1。
, 百拇医药
2.8 空白试验 按处方取除去制除马钱子后碎成细粉，混合均匀成空白样品，按含量测定项下处理成空白供试品，进行测定。结果无干扰。表1 风湿安泰片中士的宁的测定结果 (略)
3 讨论
2000年版《中国药典》仅对马钱子药材中士的宁的含量进行了限量测定，而制马钱子药材无含量测定，由于制马钱子毒性仍较大，为了确保制马钱子药材的质量和用药安全，用正文叙述方法对制马钱子药材中的士的宁的含量进行了限量测定，测定结果见表2。表2 制马钱子药材中士的宁的测定结果 (略)
测定结果表明，制马钱子药材中士的宁的含量基本稳定。与文献报道基本一致 [2] ，参照《中国药典》2000年版对 马钱子药材中士的宁的含量测定，暂定制马钱子药材中士的宁的含量为1.10～1.20mg，马钱子的炮制方法为沙烫法，其它种炮制方法如油炸法 [3] 、樟帮尿泡法 [4] 、醋酸浸法 [5] 等炮制方法，由于2000年版《中国药典》未收载，因此未进行含量测定。
, http://www.100md.com
本文建立了高效液相测定风湿安泰片中士的宁含量的方法，为进一步完善风湿安泰片的质量控制标准提供了准确、简便、可行的测定方法。与一般制剂不同，中药制剂的质量受多种因素的影响，其中原料药为最主要影响因素。因此，在投料前应对原料药———制马钱子的含量也进行了测定，这样既能够检测原料药是否合格，又可保证制剂中士的宁的含量符合要求。
参考文献
1 中华人民共和国药典编委会.中华人民共和国药典(一部)，2000，37.
2 蒋以号，杨武亮，龚千峰.HPLC地测定马钱子及其炮制品中士的宁和马钱子碱的含量.中国中药杂志，2002，27(12):889.
3 吴皓，蔡宝昌，郑培新，等.炮制对马钱子生物碱的影响.中国中药杂志，1994，19(5):277.
4 龚千峰.樟树中药炮制全书，南昌:江西科学技术出版社，1990，250.
5 牟晨晔.几种炮制方法对马钱子士的宁含量的影响.现代应用药学，1995，12(3):266.
(收稿日期:2003-11-13)
作者单位:130021吉林大学药学院药剂教研室
(编辑阳 光), http://www.100md.com(金向群)
关键词 风湿安泰片 士的宁 高效液相色谱法
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-6424(2003)12-1070-02
Determination of strychnine in fenshi
antai tablets by HPLC
, 百拇医药
Jin Xiangqun，Liu Yonggang，Li Lianfang，et al.
Department of Pharmaceutical Science，College of Pharmacy，Jilin University，Changchun130021.
【Abstract】 Objective To establish a method for determination of strychninein fenshiantai tablets by HPLC.Methods Using hypersil SiO 2 phase volum(200×4.6)mm，5μm and of n-hexane-dtchlormoethane-methanol-ammonia water(50:50:5:0.35)as mobile phase;The colum temperature was at40℃;The detection wavelength wasat254nm and the flow rate was at1.0ml/min.Results A good linearity was found over the concentration range of0.4～3.6μg(Strychnine).The correlation coefficient was0.9998.The mean recovery was98.95%.Conclusion The HPLC method was sensitive，simple，accurate，and reliable for determining the contents of strychnine in fenshi-anˉtaitablets.
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Key words fenshi antai tablets strychnine HPLC
风湿安泰片是马钱子(制)等多味中药制成的糖衣片，具有舒筋活血，祛风镇痛等功能。风湿安泰片原标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂》，收载登记号为WS-B-3793-98，标准中无含量测定项。该方中马钱子为君药，又是剧毒药，因此，为了保证用药安全及进一步控制该药的质量，本实验采用高效液相色谱法，对风湿安泰片中士的宁进行含量测定。本法操作简便，测定准确，重现性好，可作为控制该制剂内在质量的依据。
1 材料
仪器与试药:岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪(日本岛津)，岛津UV-265紫外分光光度计(日本岛津)。对照品士的宁由中国药品生物制品检定所提供，样品由长春英平药厂提供。甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
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2.1 色谱条件 Hypersil SiO 2 色谱柱(200×4.6mm，5μm);流动相:正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨试液(50:50:5:0.35)流速1.0ml/min;柱温:40℃;检测波长:254nm。士的宁的分离度值大于1.5，定量方法为归一化法，理论塔板数按士的宁峰计算应不低于2500。
2.2 标准曲线绘制 精密称取士的宁对照品，加甲醇制成每1ml分别含0.4mg的混合溶液。分别精密吸取1、3、5、7、9μl注入液相色谱仪，测定，以对照品进样量(μg)为横坐 标，峰面积值为纵坐标绘制标准曲线图，士的宁的回归方程为y=202015943.5x+42104.5，r=0.9998。
2.3 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，重复进样6次，结果RSD=0.9103%。
, http://www.100md.com 2.4 重现性试验 按样品测定方法对同一样品测定5次，结果士的宁的平均含量为0.1135%，RSD=1.4552%。
2.5 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，依正文色谱条件，分别在0、4、8、12、24h注入液相色谱仪测定，结果RSD=0.8616%，结果表明，供试品溶液在24h内稳定。
2.6 回收率试验 取已知含量的供试品(批号:20021201士的宁含量为3.958mg/片)5份，分别精密加入士的宁对照品适量，依法测定，计算回收率，结果士的宁平均回收率98.95%，RSD=1.15%。
2.7 含量测定 [1] 。取本品20片，除去糖衣，研细，取1.0g，精密称定，置索氏提取器中，加入1ml浓氨水后，用氯仿100ml提取至无色，提取液蒸干，用氯仿10ml定量移至分液漏斗中，用硫酸溶液(3→100)提取5次，每次15ml，合并硫酸提取液，用浓氨水调节pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加醋酸乙酯溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。详见表1。
, 百拇医药
2.8 空白试验 按处方取除去制除马钱子后碎成细粉，混合均匀成空白样品，按含量测定项下处理成空白供试品，进行测定。结果无干扰。表1 风湿安泰片中士的宁的测定结果 (略)
3 讨论
2000年版《中国药典》仅对马钱子药材中士的宁的含量进行了限量测定，而制马钱子药材无含量测定，由于制马钱子毒性仍较大，为了确保制马钱子药材的质量和用药安全，用正文叙述方法对制马钱子药材中的士的宁的含量进行了限量测定，测定结果见表2。表2 制马钱子药材中士的宁的测定结果 (略)
测定结果表明，制马钱子药材中士的宁的含量基本稳定。与文献报道基本一致 [2] ，参照《中国药典》2000年版对 马钱子药材中士的宁的含量测定，暂定制马钱子药材中士的宁的含量为1.10～1.20mg，马钱子的炮制方法为沙烫法，其它种炮制方法如油炸法 [3] 、樟帮尿泡法 [4] 、醋酸浸法 [5] 等炮制方法，由于2000年版《中国药典》未收载，因此未进行含量测定。
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本文建立了高效液相测定风湿安泰片中士的宁含量的方法，为进一步完善风湿安泰片的质量控制标准提供了准确、简便、可行的测定方法。与一般制剂不同，中药制剂的质量受多种因素的影响，其中原料药为最主要影响因素。因此，在投料前应对原料药———制马钱子的含量也进行了测定，这样既能够检测原料药是否合格，又可保证制剂中士的宁的含量符合要求。
参考文献
1 中华人民共和国药典编委会.中华人民共和国药典(一部)，2000，37.
2 蒋以号，杨武亮，龚千峰.HPLC地测定马钱子及其炮制品中士的宁和马钱子碱的含量.中国中药杂志，2002，27(12):889.
3 吴皓，蔡宝昌，郑培新，等.炮制对马钱子生物碱的影响.中国中药杂志，1994，19(5):277.
4 龚千峰.樟树中药炮制全书，南昌:江西科学技术出版社，1990，250.
5 牟晨晔.几种炮制方法对马钱子士的宁含量的影响.现代应用药学，1995，12(3):266.
(收稿日期:2003-11-13)
作者单位:130021吉林大学药学院药剂教研室
(编辑阳 光), http://www.100md.com(金向群)