实验性大鼠急性肝损伤时血清ALT与NO的检测及意义
【摘要】 目的 探讨ALT及NO在急性肝损伤中的意义。方法 制备大鼠四氯化碳(CCL4 )实验性急性肝损伤模型，并设正常对照组，观察大鼠血清中ALT及NO浓度变化。结果 实验性急性肝损伤大鼠血清中NO水平较正常对照组显著增高(P<0.01)，且肝功能越差，其血清NO含量越高。NO含量与ALT成正相关。结论 NO同样可作为急性肝损伤的重要检测指标之一。
关键词 丙氨酸氨基转移酶 一氧化氮 大鼠 肝损伤
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-6424(2003)11-1001-02
本研究以Wistar大鼠为实验对象，成功复制CCL 4 致急性肝损伤大鼠模型，检验血清ALT及NO浓度变化，探讨二者在肝损伤中的意义。
1 材料与方法
1.1 材料 雄性Wistar大鼠(湖南中医学院动物中心提供)，CCL 4 分析纯(湖南化工厂生产，批号:020104)。
, 百拇医药
1.2 方法 将40只大鼠随机分为A组(模型组)和B组(正常对照组)，A组经腹腔注射0.1%CCL 4 花生油液10ml/kg2次(中间隔3天)，B组在同等时间经腹腔注射等容量的花生油液，均于末次注射16h后眼球采血分离血清。血清ALT及NO分别用速率法和化学比色硝酸还原酶法检测。处死大鼠，取肝右叶组织5cm×1cm×1cm常规固定、脱水、 包埋、石蜡切片、HE染色，两组各检查14只大鼠肝脏。-或±为肝细胞正常或轻度变性;+为肝细胞呈点状坏死;++为肝细胞呈灶状坏死;+++为肝细胞呈片状坏死。统计学处理应用四格表确切概率法、t检验及一元线性相关与回归进行检验。
2 结果
2.1 病理学结果 A组大鼠中，7只光镜下肝细胞呈片状坏死，5只呈灶状坏死，2只呈点状坏死。B组大鼠中，13只肝脏结构未见明显异常，1只呈点状坏死。运用四格表确切概率法检验两组差异有显著性(P<0.01)。
2.2 血清ALT及NO水平测定结果 A组大鼠血清中ALT和NO水平均明显高于B组，两组大鼠血清ALT水平分别为283.17±29.18U/L和81.8±8.33U/L，两组比较差异有显著性(P<0.01)。两组大鼠血清NO水平分别为250.72±18.66μmol/L和49.84±3.51μmol/L，差异亦有显著性(P<0.01)。
, 百拇医药
2.3 ALT与NO关系 经一元线性相关与回归分析两者呈显著正相关(P<0.01)，即ALT表达水平越高，NO水平亦越高。
3 讨论CCL
4 进入肝细胞后，使线粒体膜的脂质溶解，从而影响线粒体的结构和功能，造成酶的破坏，从而影响代谢功能和能量的生成，致使肝细胞变性、坏死 [1] 。NO是近年来认识的一种新型细胞间信息交换的重要载体，兼有第二信使和神经递质的功能 [2] 。其生物合成由NO合成酶催化L-精氨酸加氧反应形成，体内存在两种类型，一种是原生型(cNOS)，另一种是诱生型(iNOS)。肝细胞是合成NO的主要来源之一。由于ALT广泛存在于肝细胞的细胞质和线 粒体中，在肝细胞受损时，肝细胞膜通透性增加，胞浆内及线粒体内的ALT释放入血浆，致使血清ALT的酶活性升高，ALT的半衰期为47h，因此ALT测定反映肝细胞损伤的灵敏度较高。本文资料显示，实验性急性肝损伤大鼠血清中NO水平较正常对照组显著增高，且肝功能越差，NO含量越高，NO的含量与ALT成正相关。NO同样可作为急性肝损伤的重要指标之一。
, 百拇医药
参考文献
1 李义奎.中药药理实验方法学，上海:上海科学技术出版社，1991，459-462.
2 Davies MG，Fulton GI，Hagen PO.Clinical biology of nitric oxide.Br J Surg，1995，82(12):1598.
(收稿日期:2003-11-14)
作者单位:1410007湖南中医学院(中医肝病学在读研究生)
2湖南省中医院 3山东省枣庄市中医院
(编辑阳 光), 百拇医药(孙晓峰 罗令 孙一枚)
关键词 丙氨酸氨基转移酶 一氧化氮 大鼠 肝损伤
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-6424(2003)11-1001-02
本研究以Wistar大鼠为实验对象，成功复制CCL 4 致急性肝损伤大鼠模型，检验血清ALT及NO浓度变化，探讨二者在肝损伤中的意义。
1 材料与方法
1.1 材料 雄性Wistar大鼠(湖南中医学院动物中心提供)，CCL 4 分析纯(湖南化工厂生产，批号:020104)。
, 百拇医药
1.2 方法 将40只大鼠随机分为A组(模型组)和B组(正常对照组)，A组经腹腔注射0.1%CCL 4 花生油液10ml/kg2次(中间隔3天)，B组在同等时间经腹腔注射等容量的花生油液，均于末次注射16h后眼球采血分离血清。血清ALT及NO分别用速率法和化学比色硝酸还原酶法检测。处死大鼠，取肝右叶组织5cm×1cm×1cm常规固定、脱水、 包埋、石蜡切片、HE染色，两组各检查14只大鼠肝脏。-或±为肝细胞正常或轻度变性;+为肝细胞呈点状坏死;++为肝细胞呈灶状坏死;+++为肝细胞呈片状坏死。统计学处理应用四格表确切概率法、t检验及一元线性相关与回归进行检验。
2 结果
2.1 病理学结果 A组大鼠中，7只光镜下肝细胞呈片状坏死，5只呈灶状坏死，2只呈点状坏死。B组大鼠中，13只肝脏结构未见明显异常，1只呈点状坏死。运用四格表确切概率法检验两组差异有显著性(P<0.01)。
2.2 血清ALT及NO水平测定结果 A组大鼠血清中ALT和NO水平均明显高于B组，两组大鼠血清ALT水平分别为283.17±29.18U/L和81.8±8.33U/L，两组比较差异有显著性(P<0.01)。两组大鼠血清NO水平分别为250.72±18.66μmol/L和49.84±3.51μmol/L，差异亦有显著性(P<0.01)。
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2.3 ALT与NO关系 经一元线性相关与回归分析两者呈显著正相关(P<0.01)，即ALT表达水平越高，NO水平亦越高。
3 讨论CCL
4 进入肝细胞后，使线粒体膜的脂质溶解，从而影响线粒体的结构和功能，造成酶的破坏，从而影响代谢功能和能量的生成，致使肝细胞变性、坏死 [1] 。NO是近年来认识的一种新型细胞间信息交换的重要载体，兼有第二信使和神经递质的功能 [2] 。其生物合成由NO合成酶催化L-精氨酸加氧反应形成，体内存在两种类型，一种是原生型(cNOS)，另一种是诱生型(iNOS)。肝细胞是合成NO的主要来源之一。由于ALT广泛存在于肝细胞的细胞质和线 粒体中，在肝细胞受损时，肝细胞膜通透性增加，胞浆内及线粒体内的ALT释放入血浆，致使血清ALT的酶活性升高，ALT的半衰期为47h，因此ALT测定反映肝细胞损伤的灵敏度较高。本文资料显示，实验性急性肝损伤大鼠血清中NO水平较正常对照组显著增高，且肝功能越差，NO含量越高，NO的含量与ALT成正相关。NO同样可作为急性肝损伤的重要指标之一。
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参考文献
1 李义奎.中药药理实验方法学，上海:上海科学技术出版社，1991，459-462.
2 Davies MG，Fulton GI，Hagen PO.Clinical biology of nitric oxide.Br J Surg，1995，82(12):1598.
(收稿日期:2003-11-14)
作者单位:1410007湖南中医学院(中医肝病学在读研究生)
2湖南省中医院 3山东省枣庄市中医院
(编辑阳 光), 百拇医药(孙晓峰 罗令 孙一枚)