重症肝炎肺部真菌感染分类及药敏结果分析
【摘要】 目的 了解重症肝炎肺部感染真菌的种类及对抗真菌药物的敏感性，为临床诊断和用药提供帮助。方法 从合并肺部真菌感染的重症肝炎患者中分离出186株真菌进行鉴定和药敏分析。结果 分离出的186株阳性菌株中148株为白色假丝酵母菌，26株为热带假丝酵母菌。两种菌株对5-氟胞嘧啶、两性霉素B及制霉菌素的敏感率达到了98%以上，而对三种咪唑类药物的敏感率则相对较低，为80%左右。结论 重症肝炎肺部真菌感染以白色假丝酵母菌和热带假丝酵母菌为主，对5-氟胞嘧啶、制霉菌素和两性霉素B较敏感。
关键词 痰 真菌培养 药敏试验
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2003)15-2320-02
重症肝炎机体免疫力低下，极易引起各部位的感染。很多的重症肝炎患者常规使用抗生素预防和治疗感染，从而导致真菌引起的医院感染增多。国内外报道，近20年来人类真菌感染的发生率不断上升，居各种病原体感染率上升的首位 [1] 。随临床抗真菌药物的使用，使真菌的耐药现象出现 [2] 。因此，明确真菌感染的常见菌种和开展真菌的体外药敏试验为临床医生诊断和合理用药提供帮助已变得越来越重要。我们对中南大学湘雅二医院2001年1月～2002年12月传染科重症肝炎合并肺部感染的病人中分离出的186例真菌进行了分类和药敏试验分析，现报告如下。
, http://www.100md.com
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 (1)菌株来源:186例真菌都是从2001年1月～2002年12月中南大学湘雅二医院传染科重症肝炎患者的痰液中分离得到。(2)API ATB鉴定系统:法国生物-梅里埃公司(Biomerieux)生产。(3)ATB FUNGUS药敏 测试盒:法国生物-梅里埃公司(Biomerieux)生产，含有6种抗真菌药，即5-氟胞嘧啶(5-Fluorocytosine，5-FC)、两性霉素B(Amphotericine B，AMB)、制霉菌素(Nystatine，NYS)、咪康唑(Miconazole，MIC)、益康唑(Econazole，ECO)和酮康唑(Ketoconazole，KET)。(4)培养基:沙氏培养基及血培养基，由检验科配制。(5)恒温培养箱(江苏苏泰公司)。
1.2 方法
1.2.1 培养及菌株鉴定 将痰标本镜检同时接种到沙氏培养基上，30℃培养箱过夜，培养基生长菌落后挑取可疑菌落到血培养基中继续培养，血培养基变成浑浊云雾状即用API ATB系统进行真菌菌种鉴定(具体方法按API系统操作指南进行)。
, 百拇医药
1.2.2 药敏试验 采用ATB FUNGUS试剂盒，ATB真菌试验条包括16对杯，2对不含抗生素，作为阳性对照，其它对杯中含有不同的抗真菌剂(5-氟胞嘧啶、两性霉素、制霉菌素、咪康唑、益康唑和酮康唑)，有的杯用于最低抑菌浓度(MIC)的测定。将悬浮于液体培养基中待测的酵母菌转到生长培养基中，然后接种到试验条中，培养24～48h后，用自动ATB记录仪记录，所得的结果归类成敏感、中度敏感或耐药。并以啤酒酵母(S.cerevisiae ATCC9763)作为参考菌株。
2 结果
2.1 菌株分类结果 分离出的186株真菌中，以白色假丝酵母菌(148株)和热带假丝酵母菌(26株)为主，所占比例为93.6%，具体见表1。
表1 186株真菌菌株分布
2.2 真菌菌株对抗真菌药物的敏感性 两种分离最多的真菌菌株(148株白色假丝酵母菌和26株热带假丝酵母菌)对6种抗真菌药物的敏感百分率结果见表2。
, http://www.100md.com
表2 6种抗真菌药对174株真菌菌株的抗菌测定
3 讨论
真菌属于条件致病菌，只有在机体免疫力下降或菌群失调时引起感染。基本上为院内感染的疾病，占整个院内感染的28.41%，而检出真菌最多的部位是呼吸道 [3] 。重症肝炎患者由于肝细胞严重损害，机体免疫力明显下降，极易 引起真菌感染。除应用抗生素、免疫抑制剂等引起的内源性感染外，夏秋季节环境潮湿也成为诱发真菌的外源性感染的重要危险因素 [4] 。
白色假丝酵母菌为肺部真菌感染的主要病原菌，是因为其致病力最强且具有抑制机体免疫功能的能力 [5] 。我们从重症肝炎痰标本中分离到的186株真菌菌株中，白色假丝酵母菌为148株，占79.6%，热带假丝酵母菌为26株，占14%，与报道 [6] 的情况相一致。
, 百拇医药
随着临床抗真菌药物的运用，真菌耐药性也愈来愈严重 [7] 。李从荣 [8] 等报道，深部真菌对AMB、FCZ(氟康唑)、NYS与5-FC的敏感率均较高，但对KET、MIZ、ECO有不同程度的耐药。我们对最常见的白色假丝酵母菌和热带假丝酵母菌做了药敏试验，可以看出5-FC、AMB和NYS的抗菌效果较强，对白色假丝酵母菌的抗菌效果达到98%，对热带假丝酵母菌则为100%，而三种咪唑类药物的抗菌效果则相对弱一些。咪唑类药物，因其具有共同的作用机制，故更易造成交叉耐药。近年来，临床真菌感染多选毒副作用相对较少的咪唑类抗真菌药物为主，根据我们的实验结果，对临床真菌感染的病人，除非有明显的肝肾功能损害，不主张首选咪唑类药物。根据真菌感染的不同，临床可分别选用AMB、NYS、5-FC和FCZ等药物或联合应用这些药物，以提高疗效，达到快捷治愈目的。
总之，重症肝炎合并肺部真菌感染近年有上升趋势，临床上仍以白色假丝酵母菌和热带假丝酵母菌感染为主，AMB、NYS和5-FC等药物抗真菌效果作用强，可以作为抗真菌的首选药物。严格控制抗生素的使用，加强对医院流行真菌菌株的监测和药敏试验，合理选择抗真菌药物，是控制临床真菌感染的有效途径。
, 百拇医药
参考文献
1 Beck-Sague C，Jarvis WWR.Secular trends in the epidemiology of nosocomialfungal infections in the United States.1980～1990.J Infect Dis，1993，167:1247.
2 Ghannoum MA，Rex JH，Galgiani JN.Susceptibility testing of fungi:curˉrentstatus of correlation of in vitro data with clinical outcome.J Clin Microbiol，1996，34:489-495.
3 徐延模，扬薇，赵和平.6543例住院患者医院感染的临床调查分析.中华医院感染学杂志，2002，12(1):25-26.
, http://www.100md.com
4 杨建玲，孙宝恩，王梦华.雨季医院真菌感染原因分析及对策.中华医院感染学杂志，1996，6:82-82.
5 韦莉萍，桂希恩.医院深部真菌感染调查及其危险因素分析.中华医院感染学杂志，1998，8(1):28.
6 黄金才.医院感染主要病原菌分析.中华医院感染学杂志，1996，6:54-55.
7 Mitchell TG，Perfect JR.Cryptocococcosis in the era of AIDS100years after the discovery of Cryptococcus neoformans.Clin Microbiol Rev，1995，8(4):515.
8 李从荣，彭少华，李栋，等.深部真菌医院感染的临床调查与耐药现状研究.中华医院感染学杂志，2002，12(7):485-487.
作者单位:421600湖南省祁东县人民医院内科
(编辑小 川), http://www.100md.com
关键词 痰 真菌培养 药敏试验
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2003)15-2320-02
重症肝炎机体免疫力低下，极易引起各部位的感染。很多的重症肝炎患者常规使用抗生素预防和治疗感染，从而导致真菌引起的医院感染增多。国内外报道，近20年来人类真菌感染的发生率不断上升，居各种病原体感染率上升的首位 [1] 。随临床抗真菌药物的使用，使真菌的耐药现象出现 [2] 。因此，明确真菌感染的常见菌种和开展真菌的体外药敏试验为临床医生诊断和合理用药提供帮助已变得越来越重要。我们对中南大学湘雅二医院2001年1月～2002年12月传染科重症肝炎合并肺部感染的病人中分离出的186例真菌进行了分类和药敏试验分析，现报告如下。
, http://www.100md.com
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 (1)菌株来源:186例真菌都是从2001年1月～2002年12月中南大学湘雅二医院传染科重症肝炎患者的痰液中分离得到。(2)API ATB鉴定系统:法国生物-梅里埃公司(Biomerieux)生产。(3)ATB FUNGUS药敏 测试盒:法国生物-梅里埃公司(Biomerieux)生产，含有6种抗真菌药，即5-氟胞嘧啶(5-Fluorocytosine，5-FC)、两性霉素B(Amphotericine B，AMB)、制霉菌素(Nystatine，NYS)、咪康唑(Miconazole，MIC)、益康唑(Econazole，ECO)和酮康唑(Ketoconazole，KET)。(4)培养基:沙氏培养基及血培养基，由检验科配制。(5)恒温培养箱(江苏苏泰公司)。
1.2 方法
1.2.1 培养及菌株鉴定 将痰标本镜检同时接种到沙氏培养基上，30℃培养箱过夜，培养基生长菌落后挑取可疑菌落到血培养基中继续培养，血培养基变成浑浊云雾状即用API ATB系统进行真菌菌种鉴定(具体方法按API系统操作指南进行)。
, 百拇医药
1.2.2 药敏试验 采用ATB FUNGUS试剂盒，ATB真菌试验条包括16对杯，2对不含抗生素，作为阳性对照，其它对杯中含有不同的抗真菌剂(5-氟胞嘧啶、两性霉素、制霉菌素、咪康唑、益康唑和酮康唑)，有的杯用于最低抑菌浓度(MIC)的测定。将悬浮于液体培养基中待测的酵母菌转到生长培养基中，然后接种到试验条中，培养24～48h后，用自动ATB记录仪记录，所得的结果归类成敏感、中度敏感或耐药。并以啤酒酵母(S.cerevisiae ATCC9763)作为参考菌株。
2 结果
2.1 菌株分类结果 分离出的186株真菌中，以白色假丝酵母菌(148株)和热带假丝酵母菌(26株)为主，所占比例为93.6%，具体见表1。
表1 186株真菌菌株分布
2.2 真菌菌株对抗真菌药物的敏感性 两种分离最多的真菌菌株(148株白色假丝酵母菌和26株热带假丝酵母菌)对6种抗真菌药物的敏感百分率结果见表2。
, http://www.100md.com
表2 6种抗真菌药对174株真菌菌株的抗菌测定
3 讨论
真菌属于条件致病菌，只有在机体免疫力下降或菌群失调时引起感染。基本上为院内感染的疾病，占整个院内感染的28.41%，而检出真菌最多的部位是呼吸道 [3] 。重症肝炎患者由于肝细胞严重损害，机体免疫力明显下降，极易 引起真菌感染。除应用抗生素、免疫抑制剂等引起的内源性感染外，夏秋季节环境潮湿也成为诱发真菌的外源性感染的重要危险因素 [4] 。
白色假丝酵母菌为肺部真菌感染的主要病原菌，是因为其致病力最强且具有抑制机体免疫功能的能力 [5] 。我们从重症肝炎痰标本中分离到的186株真菌菌株中，白色假丝酵母菌为148株，占79.6%，热带假丝酵母菌为26株，占14%，与报道 [6] 的情况相一致。
, 百拇医药
随着临床抗真菌药物的运用，真菌耐药性也愈来愈严重 [7] 。李从荣 [8] 等报道，深部真菌对AMB、FCZ(氟康唑)、NYS与5-FC的敏感率均较高，但对KET、MIZ、ECO有不同程度的耐药。我们对最常见的白色假丝酵母菌和热带假丝酵母菌做了药敏试验，可以看出5-FC、AMB和NYS的抗菌效果较强，对白色假丝酵母菌的抗菌效果达到98%，对热带假丝酵母菌则为100%，而三种咪唑类药物的抗菌效果则相对弱一些。咪唑类药物，因其具有共同的作用机制，故更易造成交叉耐药。近年来，临床真菌感染多选毒副作用相对较少的咪唑类抗真菌药物为主，根据我们的实验结果，对临床真菌感染的病人，除非有明显的肝肾功能损害，不主张首选咪唑类药物。根据真菌感染的不同，临床可分别选用AMB、NYS、5-FC和FCZ等药物或联合应用这些药物，以提高疗效，达到快捷治愈目的。
总之，重症肝炎合并肺部真菌感染近年有上升趋势，临床上仍以白色假丝酵母菌和热带假丝酵母菌感染为主，AMB、NYS和5-FC等药物抗真菌效果作用强，可以作为抗真菌的首选药物。严格控制抗生素的使用，加强对医院流行真菌菌株的监测和药敏试验，合理选择抗真菌药物，是控制临床真菌感染的有效途径。
, 百拇医药
参考文献
1 Beck-Sague C，Jarvis WWR.Secular trends in the epidemiology of nosocomialfungal infections in the United States.1980～1990.J Infect Dis，1993，167:1247.
2 Ghannoum MA，Rex JH，Galgiani JN.Susceptibility testing of fungi:curˉrentstatus of correlation of in vitro data with clinical outcome.J Clin Microbiol，1996，34:489-495.
3 徐延模，扬薇，赵和平.6543例住院患者医院感染的临床调查分析.中华医院感染学杂志，2002，12(1):25-26.
, http://www.100md.com
4 杨建玲，孙宝恩，王梦华.雨季医院真菌感染原因分析及对策.中华医院感染学杂志，1996，6:82-82.
5 韦莉萍，桂希恩.医院深部真菌感染调查及其危险因素分析.中华医院感染学杂志，1998，8(1):28.
6 黄金才.医院感染主要病原菌分析.中华医院感染学杂志，1996，6:54-55.
7 Mitchell TG，Perfect JR.Cryptocococcosis in the era of AIDS100years after the discovery of Cryptococcus neoformans.Clin Microbiol Rev，1995，8(4):515.
8 李从荣，彭少华，李栋，等.深部真菌医院感染的临床调查与耐药现状研究.中华医院感染学杂志，2002，12(7):485-487.
作者单位:421600湖南省祁东县人民医院内科
(编辑小 川), http://www.100md.com