脉络宁对早期糖尿病肾病患者血浆内皮素和血小板功能的影响
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中华医药杂志 2003年6月 第3卷 第6期
【摘要】 目的 观察脉络宁注射液对早期糖尿病肾病的治疗作用。方法 早期糖尿病肾病患者134例，随机分为常规治疗组(R 1 )50例和脉络宁治疗组(R 2 )84例，治疗3周，用放射免疫法和酶联免疫吸附法，分别测量糖尿病肾病患者药物治疗前后血内皮素-1(ET-1)，24h尿白蛋白排泄率(UAER)和血小板颗粒膜蛋白(GMP-140)，6-酮-前列环素(6-Keto-PGF 1a )及血栓素B 2 (TXB 2 )，并选择24例健康人为对照组(N)。结果 糖尿病肾病患者血浆ET-1、GMP-140、TXB 2 水平显著高于正常人，而6-Keto-PGF 1a 则低于正常人。R 1 组治疗后血ET-1水平降低，GMP-140，TXB 2 及6-Keto-PGF 1a ，24hUAER无改变，R 2 组治疗后ET-1，GMP-140，TXB 2 和UAER显著降低。结论 糖尿病肾病的发生和发展可能与血浆内皮素水平改变和血小板功能的改变有关，脉络宁具有改善早期糖尿病肾病患者血浆内皮素和血小板的功能。
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关键词 糖尿病肾病 内皮素类 血小板功能 治疗
【文献标识码】 B 【文章编号】 1680-077X(2003)06-0504-02
近年来，由于胰岛素的正确使用，糖尿病患者死于急性并发症者明显减少，糖尿病肾病成为致死的主要原因之一，其发生机制尚未完全明了，亦缺乏有效的治疗措施。目前认为除高血糖所致的蛋白质非酶性糖化反应及肌醇代谢紊乱外，高血凝状态，血小板功能亢进也是主要因素 [1] 。血小板颗粒膜蛋白(GMP-140)，6-酮-前列环素(6-Keto-PGF 1a )及血栓素B 2 (TXB 2)能良好地反映血小板功能状态 [2] 。内皮素是重要的血管活性物质，对肾血流动力学具有重要的调节作用 [3] 。而脉络宁具有扩张血管，改善微循环，增加肾血流量作用。因此，笔者观察了脉络宁注射液对早期糖尿病肾病患者血浆内皮素(ET-1)及血小板功能的影响，以了解其对糖尿病肾病的治疗作用。
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1 资料与方法
1.1 对象 (1)正常对照组(N组)24例，男14例，女10例，年龄(40±5.7)岁，系健康查体人员，血压正常，无心、脑、肾疾病，口服葡萄糖耐量试验(OGTT)排除糖尿病;(2)早期糖尿病肾病(尿白蛋白排泄率30～300mg/24h，除外原发性肾病、泌尿系感染、高血压、心力衰竭等原因所致的蛋白尿)患者134例，为1994年1月～1996年6月住院的2型糖尿病患者(糖尿病的诊断根据1980年WHO糖尿病诊断标准)。其中男74例，女60例，年龄(45±3.2)岁，病程(10±3.0)年，24h尿白蛋白排泄率(UAER)为35～290mg/24h。随机将糖尿病肾病患者分为常规治疗(R 1 )组50例和脉络宁注射液治疗(R 2 )组84例，2组患者治疗前空腹血糖、血 压、病程及UAER差异无显著性(P>0.05)。所有早期糖尿病肾病患者肾功能正常(血Cr、肾小球滤过率和BUN正常)，无严重心、脑、肝脏及其他内分泌疾病。
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1.2 方法
1.2.1 血ET-1含量测定 受试者清晨空腹卧床2h，取静脉血2ml置于预冷的试管中(内含100g/L EDTA-Na 2 30μl，抑肽酶40μl)，混匀，4℃3000r/min离心10min分离血浆，-20℃保存，存放时间不超过3个月，采用放射免疫分析法(RIA)测定，严格操作，批内变异系数8.4%;批间变异系数12.6%。
1.2.2 血GMP-140，TXB 2 及6-Keto-PGF 1a 含量测定 取早晨空腹静脉血5ml，用EDTA-Na 2 抗凝，采血后60min内离心，分离血浆，-20℃保存待测。3项指标均采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定，批内变异系数9.1%;批间变异系数14.6%。
1.2.3 24hUAER测定 收集24h尿样(女性月经过后5d以上)，不加防腐剂，分装-20℃保存待测，时间不超过1个月。
, 百拇医药
1.2.4 药物治疗方法 R 1 和R 2 组均在糖尿病饮食的基础上接受胰岛素治疗，并达到良好控制标准(FPG<6.0mmol/L，餐后2hPG<8.0mmol/L，24h尿糖测定<28mmol/L;
R 2 组除上述治疗外，脉络宁注射液20ml/d加入100ml生理盐水中静脉滴注，连续治疗3周后复查前述指标。两组患者血压升高者，用降压药治疗，使其控制在正常范围。
1.3 统计学处理 参数均以X±s表示，组间及治疗前后比较用t检验或卡方检验，患者血ET-1水平与24h尿白蛋白排泄率参数间进行直线回归分析。
2 结果
2.1 糖尿病肾病患者血浆ET-1水平治疗前后变化 134 例糖尿病肾病患者ET-1质量浓度为(110.0±41.0)ng/L，显著高于对照组(72.10±16.5)ng/L，(P<0.001)。见表1。
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表1 脉络宁注射液治疗前后血浆ET-1及血小板活性指标改变(X±s)
由表1可见，药物治疗后R 1 组下降了17.5%;显著低于R 2 组下降的28.8%(P<0.05)，说明糖尿病肾病患者血浆ET-1处于高水平，良好控制血糖可使血ET-1水平下降，脉络宁注射液治疗能显著降低血ET-1水平。
2.2 糖尿病肾病患者治疗前后血小板活性变化 134例糖尿病肾病患者血GMP-140(46.9±8.6)ng/L，TXB 2 (88.0±35.1)ng/L分别显著高于对照组(38.0±7.9)ng/L，(75.9±39.2)ng/L(P<0.05，P<0.01)，6-Keto-PGF 1a (12.3±6.9)ng/L测低于对照组(17.5±6.9)ng/L(P<0.05)。见表1。R 1 组治疗后GMP-140，TXB 2 ，6-Keto-PGF 1a 均无改变，R 2 组用脉络宁治疗后GMP-140，TXB 2 均显著降低，6-Keto-PGF 1a 无变化。
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2.3 24hUAER治疗前后变化 R 1 组治疗前UAER为(115.4±28.1)mg/24h，治疗后为(110.6±30.4)mg/24h，经t检验无显著性差异(P>0.05);R 2 组治疗前为(109.8±19.5)mg/24h，治疗后为(78.4±14)mg/24h，经t检验差异有显著性(P<0.001)。说明仅良好地控制血糖和对症处理不能降低糖尿病肾病患者尿白蛋白排泄量，脉络宁治疗能显著减少患者尿白蛋白排泄量。
2.4 相关分析 所有糖尿病患者治疗前血ET-1水平与24h尿白蛋白排泄率直线回归分析成正相关(r=0.45，P<0.001，n=156)
3 讨论
ET-1是由血管内皮细胞产生的一种血管活性肽，主要分布于肾、肺、肝脏、心脏及中枢神经系统，能引起肾血管收缩，减少肾血流量，降低肾小球滤过率 [4] 。有学者认为ET-1能直接刺激血管平滑肌细胞，肾小球系膜细胞增生、肥大。本实验证实糖尿病肾病患者血浆ET-1水平显著高于正常人，与24h尿白蛋白排泄率成正相关，因此认为ET-1可能与糖尿病肾病的发展有关。
, 百拇医药
GMP-140是血小板α-颗粒膜蛋白，当血小板被激活时，随α-颗粒释放而分布于血小板表面，并能释放入血浆，为目前发现最具有特征的血小板活化标志物 [5] 。TXB 2 是血栓烷A 2 的稳定代谢产物，具有收缩血管和促使血小板聚集作用。6-Keto-PGF 1a 是前列环素(PGI 2 )的稳定代谢产物，由血管内皮细胞合成，具有强烈的扩张血管抑制血小 板聚集作用 [6] 。
本文观察结果显示糖尿病肾病患者血GMP-140、TXB 2 水平均高于正常人，而6-Keto-PGF 1a 则低于正常人，说明患者血小板处于活化状态，内皮细胞受损，这正是糖尿病肾病发生、发展的原因之一。血小板功能异常，组织缺血、缺氧、微循环障碍可导致血管内皮细胞产生和释放ET-1。有学者认为糖尿病患者血浆ET-1水平升高是血管内皮细胞损伤的标志，而血管内皮细胞损伤是糖尿病微血管病变发生的主要原因 [7] 。依据本结果，糖尿病患者血中ET-1水平升高和血小板处于活化状态推测，两者可能协同导致了糖尿病肾病的发生和发展。
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脉络宁是由中药玄参、牛膝等用化学方法提取后制成的复方注射液，具有扩张血管、抑制血小板聚集、改善微循环，增加肾血流量的作用，本结果显示脉络宁能显著降低糖尿病肾病患者血GMP-140，TXB 2 和ET-1水平，同时24h尿白蛋白排泄量也明显减少，因此认为对早期糖尿病肾病有较好的治疗作用，作用机制可能与降低血浆ET-1水平和抑制血小板活性有关。
参考文献
1 董砚虎.糖尿病及其并发症当代治疗，济南:山东科学技术出版社，1994，134.
2 Bonfant R，Furie Bc，Furie B，et al.Padgem(GMP140)is a component of weibel palade bodies of human Endothelial cells.Blood，1989，73:1109.
, 百拇医药
3 Lee YJ，Shm SJ，Tsai jH.Increased uninary endothelin-like immunoreˉactivity excretion in NIDDM Patients with albumiburia Diabetes-care，1994，17:263.
4 Kon V，Badr KF.Biological actions and pathophysiologic significance of endothelin in the kidney.kidney Int，1991，40:1.
5 Yeo E，Feurie BC，Furie B.Padgem protein in human erythrolukemia cells.Blood，1989，73:772.
6 Needleman P，Moncada S，Bunting S，et al.Identfication of emzyme in platelet microsomes which generates thromboxane as from Prostaglandin and operoxides.Nature，1976，261:558.
7 Takshashi，Ghatei MA，IamHC，et al.Elevated Plasma kemdothelin conˉcentration in patients with diabetes mellitus.Diabetologia，1990，33:306.
(收稿日期:2003-01-19)
作者单位:430081武汉科技大学医学院
(编辑使 臻), http://www.100md.com(陈稚瑶)
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关键词 糖尿病肾病 内皮素类 血小板功能 治疗
【文献标识码】 B 【文章编号】 1680-077X(2003)06-0504-02
近年来，由于胰岛素的正确使用，糖尿病患者死于急性并发症者明显减少，糖尿病肾病成为致死的主要原因之一，其发生机制尚未完全明了，亦缺乏有效的治疗措施。目前认为除高血糖所致的蛋白质非酶性糖化反应及肌醇代谢紊乱外，高血凝状态，血小板功能亢进也是主要因素 [1] 。血小板颗粒膜蛋白(GMP-140)，6-酮-前列环素(6-Keto-PGF 1a )及血栓素B 2 (TXB 2)能良好地反映血小板功能状态 [2] 。内皮素是重要的血管活性物质，对肾血流动力学具有重要的调节作用 [3] 。而脉络宁具有扩张血管，改善微循环，增加肾血流量作用。因此，笔者观察了脉络宁注射液对早期糖尿病肾病患者血浆内皮素(ET-1)及血小板功能的影响，以了解其对糖尿病肾病的治疗作用。
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1 资料与方法
1.1 对象 (1)正常对照组(N组)24例，男14例，女10例，年龄(40±5.7)岁，系健康查体人员，血压正常，无心、脑、肾疾病，口服葡萄糖耐量试验(OGTT)排除糖尿病;(2)早期糖尿病肾病(尿白蛋白排泄率30～300mg/24h，除外原发性肾病、泌尿系感染、高血压、心力衰竭等原因所致的蛋白尿)患者134例，为1994年1月～1996年6月住院的2型糖尿病患者(糖尿病的诊断根据1980年WHO糖尿病诊断标准)。其中男74例，女60例，年龄(45±3.2)岁，病程(10±3.0)年，24h尿白蛋白排泄率(UAER)为35～290mg/24h。随机将糖尿病肾病患者分为常规治疗(R 1 )组50例和脉络宁注射液治疗(R 2 )组84例，2组患者治疗前空腹血糖、血 压、病程及UAER差异无显著性(P>0.05)。所有早期糖尿病肾病患者肾功能正常(血Cr、肾小球滤过率和BUN正常)，无严重心、脑、肝脏及其他内分泌疾病。
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1.2 方法
1.2.1 血ET-1含量测定 受试者清晨空腹卧床2h，取静脉血2ml置于预冷的试管中(内含100g/L EDTA-Na 2 30μl，抑肽酶40μl)，混匀，4℃3000r/min离心10min分离血浆，-20℃保存，存放时间不超过3个月，采用放射免疫分析法(RIA)测定，严格操作，批内变异系数8.4%;批间变异系数12.6%。
1.2.2 血GMP-140，TXB 2 及6-Keto-PGF 1a 含量测定 取早晨空腹静脉血5ml，用EDTA-Na 2 抗凝，采血后60min内离心，分离血浆，-20℃保存待测。3项指标均采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定，批内变异系数9.1%;批间变异系数14.6%。
1.2.3 24hUAER测定 收集24h尿样(女性月经过后5d以上)，不加防腐剂，分装-20℃保存待测，时间不超过1个月。
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1.2.4 药物治疗方法 R 1 和R 2 组均在糖尿病饮食的基础上接受胰岛素治疗，并达到良好控制标准(FPG<6.0mmol/L，餐后2hPG<8.0mmol/L，24h尿糖测定<28mmol/L;
R 2 组除上述治疗外，脉络宁注射液20ml/d加入100ml生理盐水中静脉滴注，连续治疗3周后复查前述指标。两组患者血压升高者，用降压药治疗，使其控制在正常范围。
1.3 统计学处理 参数均以X±s表示，组间及治疗前后比较用t检验或卡方检验，患者血ET-1水平与24h尿白蛋白排泄率参数间进行直线回归分析。
2 结果
2.1 糖尿病肾病患者血浆ET-1水平治疗前后变化 134 例糖尿病肾病患者ET-1质量浓度为(110.0±41.0)ng/L，显著高于对照组(72.10±16.5)ng/L，(P<0.001)。见表1。
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表1 脉络宁注射液治疗前后血浆ET-1及血小板活性指标改变(X±s)
由表1可见，药物治疗后R 1 组下降了17.5%;显著低于R 2 组下降的28.8%(P<0.05)，说明糖尿病肾病患者血浆ET-1处于高水平，良好控制血糖可使血ET-1水平下降，脉络宁注射液治疗能显著降低血ET-1水平。
2.2 糖尿病肾病患者治疗前后血小板活性变化 134例糖尿病肾病患者血GMP-140(46.9±8.6)ng/L，TXB 2 (88.0±35.1)ng/L分别显著高于对照组(38.0±7.9)ng/L，(75.9±39.2)ng/L(P<0.05，P<0.01)，6-Keto-PGF 1a (12.3±6.9)ng/L测低于对照组(17.5±6.9)ng/L(P<0.05)。见表1。R 1 组治疗后GMP-140，TXB 2 ，6-Keto-PGF 1a 均无改变，R 2 组用脉络宁治疗后GMP-140，TXB 2 均显著降低，6-Keto-PGF 1a 无变化。
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2.3 24hUAER治疗前后变化 R 1 组治疗前UAER为(115.4±28.1)mg/24h，治疗后为(110.6±30.4)mg/24h，经t检验无显著性差异(P>0.05);R 2 组治疗前为(109.8±19.5)mg/24h，治疗后为(78.4±14)mg/24h，经t检验差异有显著性(P<0.001)。说明仅良好地控制血糖和对症处理不能降低糖尿病肾病患者尿白蛋白排泄量，脉络宁治疗能显著减少患者尿白蛋白排泄量。
2.4 相关分析 所有糖尿病患者治疗前血ET-1水平与24h尿白蛋白排泄率直线回归分析成正相关(r=0.45，P<0.001，n=156)
3 讨论
ET-1是由血管内皮细胞产生的一种血管活性肽，主要分布于肾、肺、肝脏、心脏及中枢神经系统，能引起肾血管收缩，减少肾血流量，降低肾小球滤过率 [4] 。有学者认为ET-1能直接刺激血管平滑肌细胞，肾小球系膜细胞增生、肥大。本实验证实糖尿病肾病患者血浆ET-1水平显著高于正常人，与24h尿白蛋白排泄率成正相关，因此认为ET-1可能与糖尿病肾病的发展有关。
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GMP-140是血小板α-颗粒膜蛋白，当血小板被激活时，随α-颗粒释放而分布于血小板表面，并能释放入血浆，为目前发现最具有特征的血小板活化标志物 [5] 。TXB 2 是血栓烷A 2 的稳定代谢产物，具有收缩血管和促使血小板聚集作用。6-Keto-PGF 1a 是前列环素(PGI 2 )的稳定代谢产物，由血管内皮细胞合成，具有强烈的扩张血管抑制血小 板聚集作用 [6] 。
本文观察结果显示糖尿病肾病患者血GMP-140、TXB 2 水平均高于正常人，而6-Keto-PGF 1a 则低于正常人，说明患者血小板处于活化状态，内皮细胞受损，这正是糖尿病肾病发生、发展的原因之一。血小板功能异常，组织缺血、缺氧、微循环障碍可导致血管内皮细胞产生和释放ET-1。有学者认为糖尿病患者血浆ET-1水平升高是血管内皮细胞损伤的标志，而血管内皮细胞损伤是糖尿病微血管病变发生的主要原因 [7] 。依据本结果，糖尿病患者血中ET-1水平升高和血小板处于活化状态推测，两者可能协同导致了糖尿病肾病的发生和发展。
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脉络宁是由中药玄参、牛膝等用化学方法提取后制成的复方注射液，具有扩张血管、抑制血小板聚集、改善微循环，增加肾血流量的作用，本结果显示脉络宁能显著降低糖尿病肾病患者血GMP-140，TXB 2 和ET-1水平，同时24h尿白蛋白排泄量也明显减少，因此认为对早期糖尿病肾病有较好的治疗作用，作用机制可能与降低血浆ET-1水平和抑制血小板活性有关。
参考文献
1 董砚虎.糖尿病及其并发症当代治疗，济南:山东科学技术出版社，1994，134.
2 Bonfant R，Furie Bc，Furie B，et al.Padgem(GMP140)is a component of weibel palade bodies of human Endothelial cells.Blood，1989，73:1109.
, 百拇医药
3 Lee YJ，Shm SJ，Tsai jH.Increased uninary endothelin-like immunoreˉactivity excretion in NIDDM Patients with albumiburia Diabetes-care，1994，17:263.
4 Kon V，Badr KF.Biological actions and pathophysiologic significance of endothelin in the kidney.kidney Int，1991，40:1.
5 Yeo E，Feurie BC，Furie B.Padgem protein in human erythrolukemia cells.Blood，1989，73:772.
6 Needleman P，Moncada S，Bunting S，et al.Identfication of emzyme in platelet microsomes which generates thromboxane as from Prostaglandin and operoxides.Nature，1976，261:558.
7 Takshashi，Ghatei MA，IamHC，et al.Elevated Plasma kemdothelin conˉcentration in patients with diabetes mellitus.Diabetologia，1990，33:306.
(收稿日期:2003-01-19)
作者单位:430081武汉科技大学医学院
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