熊黄汤对重型病毒性肝炎患者血清TNF-α、IL-6水平的影响
【摘要】 目的 研究“熊黄汤”治疗重型病毒性肝炎(SH)患者阻止肝细胞继续坏死的作用机制。方法 47例SH患者随机分成两组，对照组仅用常规综合疗法，治疗组用常规综合疗法联合加味“熊黄汤”，应用双抗体夹心酶联分析法检测两组病例治疗前后TNF-α、IL-6的水平变化，同时检测TBIL和PT。结果 治疗前，两组病例的TNF-α、IL-6、TBIL和PT差异均无显著性(P均>0.05);而治疗后，两组病例的TNF-α、IL-6及PT差异有显著性(P<0.01及P<0.05)，但TBIL差异无显著性(P>0.05);治疗组治疗前后比较，TNF-α、IL-6及PT差异有显著性(P<0.01及P<0.05)，TBIL差异无显著性(P>0.05)。结论 “熊黄汤”能显著降低SH患者血清TNF-α和IL-6的水平，并通过清除TNF-α和IL-6而发挥止肝细胞继续坏死的作用。
关键词 中医学 熊黄汤 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-6 重型病毒性肝炎
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)17-2564-02
, 百拇医药
The effect of Xiong huangtang on serum TNF-α、IL-6 of
serious in palients with viral hepatitis
Li Yijin，Liang Xiaobing，Chen Fuguang，et al.
The People’s Hospital of Zhuhai City，Guangdong519000.
【Abstract】 Objective To study the mechanism of preventing liver cell necrosis of serious viral hepatitis(SH)treated with“Xiong huangtang”.Methods 47SH patients were randomly assigned to two groups.Control group was only with general treatment.Test group was treated with general and combined with“Xiong huangtang”，In two groups post and pre-treatment we used elisa analysis to test TNF-α，IL-6changes，at the same time test TBIL and PT.Results Before the treatment，TNF-α，IL-6，TBIL and PT had no obvious differences in two groups(P>0.05)，after the treatment，TNF-α、IL-6and PT had markedly changes among two groups(P<0.01and P<0.05)，and TBIL had no obvious differences(P>0.05)，In test group the post-treatment condition was compared with that of pre-treatment，TNF-α，IL-6and PT had obvious differences(P<0.01and P<0.05)，TBIL had no obvious difˉferences(P>0.05).Conclusion “Xiong huangtang”can significantly reduce the serum TNF-αand IL-6level and through eliminating TNF-αand IL-6to prevent live cellfrom continuative necrosisis.
, 百拇医药
Key words TCM science Xiong huangtang TNF-α IL-6serious viral hepatitis
细胞因子在重型病毒性肝炎(SH)免疫病理过程中的作用，已受到国内外学者的关注，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)与肝细胞的坏死有密切相关，共同参与了SH的发病及全身多器官功能损害，动态观察这两种细胞因子的水平变化有助于判断SH患者的病情变化。为研究笔者治疗SH的自拟验方“熊黄汤”的作用机制，我们测定了47例SH患者治疗前后血清TNF-α和IL-6的水平变化，同时检测了反映SH的两项重要指标凝血酶时间(PT)和血清总胆红素(TBIL)，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 研究对象 47例SH均为我院1998年10月～2002年6月连续住院患者，全部病例均符合2000年西安第十次全国病毒性肝炎会议修定的诊断及分型标准，随机分成两组。治疗组27例，男24例，女3例，平均年龄36.5岁;其中急性SH6例，亚急性SH10例，慢性SH11例;有并发症者10例 (腹腔细菌感染5例，肝性脑病3例，肝肾综合征2例);按病原分型，甲型3例，乙型16例，乙型重叠甲型2例，乙型重叠戊型3例，未分型3例。对照组20例，男19例，女1例，平均年龄33.2岁;急性SH2例，亚急性SH6例，慢性SH12例;有并发病者6例(腹腔细菌感染3例，肝性脑病2例，消化道出血1例);按病原分，甲型1例，乙型10例，乙型重叠甲型3例，乙型重叠戊型4例，未分型2例。两组病例的病情轻重、性别、年龄均有可比性。
, 百拇医药
1.2 血清学检测 TNF-α、IL-6检测采用双抗体夹心酶联分析法，试剂购自法国IMMUNOTECH公司，全部病例治疗前及治疗后2周抽取清晨空腹静脉血5ml/次，每批标本集中由专人同一时间检测，同时检测的指标还有PT、TBIL等。
1.3 统计学处理 应用SPSS10.00分析软件包，计量资料用均数±标准差描述，两组比较采用t检验。
1.4 治疗方法 对照组的治疗采用常规综合治疗，静脉用药有促肝细胞生长素、甘利欣、门冬氨酸钾镁、苦参碱、胰高血糖素、胰岛素、葡萄糖、人血白蛋白、血浆及抗生素(氧氟沙星、氧哌嗪青霉素或复达欣)，口服乳果糖。有昏迷者加用肝安注射液静滴，弱酸溶液保留灌肠，少尿者加口服利尿药，有明显出血者加用凝血酶原复合物，有消化道出血者加用洛赛克或善宁注射液。治疗组除用以上常规综合治疗外，加用“熊黄汤”加味煎服或胃管鼻饲，每天2次。“熊黄汤”基本方由黑熊胆、天然牛黄，生大黄三味中药组成。湿热蕴阻者基本方配合茵陈四苓汤;热毒炽盛者配合黄连解毒汤;热陷心包者配合犀角散(用水牛角代替犀牛角);血热妄行者加犀角地黄汤;肝郁脾虚者加柴胡疏肝散配合异功散;寒湿中阻者加茵陈术附汤;肝肾阴虚者加一贯煎;脾肾 阳虚者加附子理中丸(汤)。
, http://www.100md.com
2 结果
治疗前，两组病例的TNF-α、IL-6、TBIL和PT差异无显著性(P均>0.05);治疗后，两组病例的TNF-α、IL-6及PT差异有显著性(P<0.01及P<0.05)，但TBIL差异无显著性(P>0.05);治疗组治疗前后比较，TNF-α、IL-6及PT差异有显著性(P<0.01及P<0.05)，TBIL差异无显著性(P>0.05);TNF-α、IL-6与PT的高低呈正相关，见表1。
表1 SH患者血清TNF-α、IL-6、TBIL、PT检测结果 (ˉx±s)
注:与对照组治疗前比较 ˇ P>0.05;与对照组治疗后比较ˇˇ P<0.01， ˇˇˇ P<0.05， ˇˇˇˇ P>0.05;与本组治疗前比较， Δ P<0.01， ΔΔ P<0.05， ΔΔΔ P>0.05
3 讨论
, 百拇医药
重型病毒性肝炎，不论是急性SH，亚急性SH，还是慢性SH，其共同的病理本质是大量肝细胞坏死，治疗SH的中心环节是阻止肝细胞的继续坏死。SH的发病机制尚未阐明，国内外的研究证实，内毒素(ET)及多种细胞因子与肝细胞的坏死密切相关，肝脏的巨噬细胞(kupffe细胞)是TNF-α和IL-6等多种细胞因子产生的重要场所，内毒素、细菌或病毒可刺激肝内kupffer细胞和血窦内皮细胞产生过量的TNF-α、IL-6和IL-1等细胞因子，肝脏内皮细胞受TNF-α的刺激也可产生大量的IL-6和其它炎症介质，即TNF-α具有生物放大作用 [1，2] 。TNF-α、IL-6等细胞因子不但加重肝实质细胞的损伤，而且促使肝功能衰竭的发展，并通过循环损伤多种器官导致多器官功能衰竭 [3，4] 。已有研究证实，动态观察TNF-α、IL-6的水平变化，在判断病毒性肝炎重症程度和预后方面有临床实用价值，鉴于SH患者体内TNF-α和IL-6处于一种高活性状态，而动物实验也证实，降低TNF-α和IL-6水平即可保护肝细胞，缓解肝坏死 [5] 。
, http://www.100md.com
国内已有学者提出，如能在SH早期阶段应用TNF-α、IL-6拮抗剂清除过量的TNF-α和IL-6，可望减轻TNF-α、IL-6所致的组织和器官损害 [6] 。目前尚无拮抗TNF-α和IL-6的西药或生物制剂，但临床已证实有不少清热解毒类中药可能具有这方面的作用，笔者筛选了黑熊胆、天然牛黄、生大黄这三味中药自拟成“熊黄汤”，根据中医辨证施治的原则加味应用，治疗SH有较好疗效 [7] 。方中黑熊胆具有清热镇惊、凉肝解毒的功效，书中记载主治小儿风热惊痫，热毒黄疸，《鲁府禁方》:“熊胆治伤寒热极发狂，不认亲疏，烦热至甚”，说明古时候已有用熊胆治疗类似肝昏迷的病者，黑熊胆有利胆保肝作用，对CCl 4 所致的小鼠实验性肝损伤有明显的保肝作用，减轻肝脏病理改变 [8] ;天然牛黄具有清心定惊，豁痰开窍，清热解毒的功效，牛黄中的主要 成分脱氧胆酸通过松弛胆道括约肌而起利胆作用，而其牛磺酸通过抗脂质过氧化，减少线粒体内钙蓄积和稳定肝溶酶体膜，而起保肝作用 [8] ;大黄有攻下导滞，泻火解毒的功效，《神农本草经》:“大黄荡涤肠胃，推陈致新，通利水谷，调中化食，安和五脏。”三药联用具有清热解毒，利胆保肝的功效。
, http://www.100md.com
本文两组资料证实，在常规综合治疗的基础上，根据中医证候应用“熊黄汤”加味，不但能明显改善SH患者的症状，而且能显著降低其血清TNF-α、IL-6及PT。对TBIL降低不显著与疗程短有关，随着疗程的延长，多数病例的TBIL会逐渐降低。我们推测“熊黄汤”加味应用有类似TNF-α、IL-6拮抗剂的作用，并通过清除TNF-α和IL-6而达到阻止SH肝细胞继续坏死的作用。
参考文献
1 Torre D，Zeroli C，Ciola M，et al.Serum levels of interleukin-1α，interˉleukin-1β，interleukin-6，and tumor necrosis factor in patients with aˉcute viral hepatitis.Clin Infect Dis，1994，18:194.
, http://www.100md.com 2 Kakumu S，Fukatsu A，Shinagawa T，et al.Localization of intrahepatic interleukin6in patients with acute and chronic liver disease.J Clin Pathol，1992，45:408.
3 梁扩寰.肝脏病学.北京:人民卫生出版社，1995，402-403.
4 韩德伍.肝功能衰竭发病机制的研究进展.中国病理生理杂志，1993，9:770.
5 张定凤，任红，郭树华，等.肿瘤坏死因子在病毒性肝炎肝坏死中的作用及其防护.中华医学杂志，1996，70:438.
6 何有成，谢俊强，黄仰更，等.重症病毒性肝炎患者血清TNF-α和IL-6水平变化及其意义.上海免疫学杂志，1998，18(3):170.
7 黎义锦.牛黄、熊胆为主治疗重型肝炎44例.中西医结合肝病杂志，1994，4(4):37.
8 宋立人，洪恂，丁绪亮，等.现代中药学大辞典.北京:人民卫生出版社，2001，2360，397.
基金项目:珠海市卫生局立项资助课题(编号:98201)
作者单位:519000广东省珠海市人民医院
(编辑于少伟), 百拇医药
关键词 中医学 熊黄汤 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-6 重型病毒性肝炎
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)17-2564-02
, 百拇医药
The effect of Xiong huangtang on serum TNF-α、IL-6 of
serious in palients with viral hepatitis
Li Yijin，Liang Xiaobing，Chen Fuguang，et al.
The People’s Hospital of Zhuhai City，Guangdong519000.
【Abstract】 Objective To study the mechanism of preventing liver cell necrosis of serious viral hepatitis(SH)treated with“Xiong huangtang”.Methods 47SH patients were randomly assigned to two groups.Control group was only with general treatment.Test group was treated with general and combined with“Xiong huangtang”，In two groups post and pre-treatment we used elisa analysis to test TNF-α，IL-6changes，at the same time test TBIL and PT.Results Before the treatment，TNF-α，IL-6，TBIL and PT had no obvious differences in two groups(P>0.05)，after the treatment，TNF-α、IL-6and PT had markedly changes among two groups(P<0.01and P<0.05)，and TBIL had no obvious differences(P>0.05)，In test group the post-treatment condition was compared with that of pre-treatment，TNF-α，IL-6and PT had obvious differences(P<0.01and P<0.05)，TBIL had no obvious difˉferences(P>0.05).Conclusion “Xiong huangtang”can significantly reduce the serum TNF-αand IL-6level and through eliminating TNF-αand IL-6to prevent live cellfrom continuative necrosisis.
, 百拇医药
Key words TCM science Xiong huangtang TNF-α IL-6serious viral hepatitis
细胞因子在重型病毒性肝炎(SH)免疫病理过程中的作用，已受到国内外学者的关注，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)与肝细胞的坏死有密切相关，共同参与了SH的发病及全身多器官功能损害，动态观察这两种细胞因子的水平变化有助于判断SH患者的病情变化。为研究笔者治疗SH的自拟验方“熊黄汤”的作用机制，我们测定了47例SH患者治疗前后血清TNF-α和IL-6的水平变化，同时检测了反映SH的两项重要指标凝血酶时间(PT)和血清总胆红素(TBIL)，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 研究对象 47例SH均为我院1998年10月～2002年6月连续住院患者，全部病例均符合2000年西安第十次全国病毒性肝炎会议修定的诊断及分型标准，随机分成两组。治疗组27例，男24例，女3例，平均年龄36.5岁;其中急性SH6例，亚急性SH10例，慢性SH11例;有并发症者10例 (腹腔细菌感染5例，肝性脑病3例，肝肾综合征2例);按病原分型，甲型3例，乙型16例，乙型重叠甲型2例，乙型重叠戊型3例，未分型3例。对照组20例，男19例，女1例，平均年龄33.2岁;急性SH2例，亚急性SH6例，慢性SH12例;有并发病者6例(腹腔细菌感染3例，肝性脑病2例，消化道出血1例);按病原分，甲型1例，乙型10例，乙型重叠甲型3例，乙型重叠戊型4例，未分型2例。两组病例的病情轻重、性别、年龄均有可比性。
, 百拇医药
1.2 血清学检测 TNF-α、IL-6检测采用双抗体夹心酶联分析法，试剂购自法国IMMUNOTECH公司，全部病例治疗前及治疗后2周抽取清晨空腹静脉血5ml/次，每批标本集中由专人同一时间检测，同时检测的指标还有PT、TBIL等。
1.3 统计学处理 应用SPSS10.00分析软件包，计量资料用均数±标准差描述，两组比较采用t检验。
1.4 治疗方法 对照组的治疗采用常规综合治疗，静脉用药有促肝细胞生长素、甘利欣、门冬氨酸钾镁、苦参碱、胰高血糖素、胰岛素、葡萄糖、人血白蛋白、血浆及抗生素(氧氟沙星、氧哌嗪青霉素或复达欣)，口服乳果糖。有昏迷者加用肝安注射液静滴，弱酸溶液保留灌肠，少尿者加口服利尿药，有明显出血者加用凝血酶原复合物，有消化道出血者加用洛赛克或善宁注射液。治疗组除用以上常规综合治疗外，加用“熊黄汤”加味煎服或胃管鼻饲，每天2次。“熊黄汤”基本方由黑熊胆、天然牛黄，生大黄三味中药组成。湿热蕴阻者基本方配合茵陈四苓汤;热毒炽盛者配合黄连解毒汤;热陷心包者配合犀角散(用水牛角代替犀牛角);血热妄行者加犀角地黄汤;肝郁脾虚者加柴胡疏肝散配合异功散;寒湿中阻者加茵陈术附汤;肝肾阴虚者加一贯煎;脾肾 阳虚者加附子理中丸(汤)。
, http://www.100md.com
2 结果
治疗前，两组病例的TNF-α、IL-6、TBIL和PT差异无显著性(P均>0.05);治疗后，两组病例的TNF-α、IL-6及PT差异有显著性(P<0.01及P<0.05)，但TBIL差异无显著性(P>0.05);治疗组治疗前后比较，TNF-α、IL-6及PT差异有显著性(P<0.01及P<0.05)，TBIL差异无显著性(P>0.05);TNF-α、IL-6与PT的高低呈正相关，见表1。
表1 SH患者血清TNF-α、IL-6、TBIL、PT检测结果 (ˉx±s)
注:与对照组治疗前比较 ˇ P>0.05;与对照组治疗后比较ˇˇ P<0.01， ˇˇˇ P<0.05， ˇˇˇˇ P>0.05;与本组治疗前比较， Δ P<0.01， ΔΔ P<0.05， ΔΔΔ P>0.05
3 讨论
, 百拇医药
重型病毒性肝炎，不论是急性SH，亚急性SH，还是慢性SH，其共同的病理本质是大量肝细胞坏死，治疗SH的中心环节是阻止肝细胞的继续坏死。SH的发病机制尚未阐明，国内外的研究证实，内毒素(ET)及多种细胞因子与肝细胞的坏死密切相关，肝脏的巨噬细胞(kupffe细胞)是TNF-α和IL-6等多种细胞因子产生的重要场所，内毒素、细菌或病毒可刺激肝内kupffer细胞和血窦内皮细胞产生过量的TNF-α、IL-6和IL-1等细胞因子，肝脏内皮细胞受TNF-α的刺激也可产生大量的IL-6和其它炎症介质，即TNF-α具有生物放大作用 [1，2] 。TNF-α、IL-6等细胞因子不但加重肝实质细胞的损伤，而且促使肝功能衰竭的发展，并通过循环损伤多种器官导致多器官功能衰竭 [3，4] 。已有研究证实，动态观察TNF-α、IL-6的水平变化，在判断病毒性肝炎重症程度和预后方面有临床实用价值，鉴于SH患者体内TNF-α和IL-6处于一种高活性状态，而动物实验也证实，降低TNF-α和IL-6水平即可保护肝细胞，缓解肝坏死 [5] 。
, http://www.100md.com
国内已有学者提出，如能在SH早期阶段应用TNF-α、IL-6拮抗剂清除过量的TNF-α和IL-6，可望减轻TNF-α、IL-6所致的组织和器官损害 [6] 。目前尚无拮抗TNF-α和IL-6的西药或生物制剂，但临床已证实有不少清热解毒类中药可能具有这方面的作用，笔者筛选了黑熊胆、天然牛黄、生大黄这三味中药自拟成“熊黄汤”，根据中医辨证施治的原则加味应用，治疗SH有较好疗效 [7] 。方中黑熊胆具有清热镇惊、凉肝解毒的功效，书中记载主治小儿风热惊痫，热毒黄疸，《鲁府禁方》:“熊胆治伤寒热极发狂，不认亲疏，烦热至甚”，说明古时候已有用熊胆治疗类似肝昏迷的病者，黑熊胆有利胆保肝作用，对CCl 4 所致的小鼠实验性肝损伤有明显的保肝作用，减轻肝脏病理改变 [8] ;天然牛黄具有清心定惊，豁痰开窍，清热解毒的功效，牛黄中的主要 成分脱氧胆酸通过松弛胆道括约肌而起利胆作用，而其牛磺酸通过抗脂质过氧化，减少线粒体内钙蓄积和稳定肝溶酶体膜，而起保肝作用 [8] ;大黄有攻下导滞，泻火解毒的功效，《神农本草经》:“大黄荡涤肠胃，推陈致新，通利水谷，调中化食，安和五脏。”三药联用具有清热解毒，利胆保肝的功效。
, http://www.100md.com
本文两组资料证实，在常规综合治疗的基础上，根据中医证候应用“熊黄汤”加味，不但能明显改善SH患者的症状，而且能显著降低其血清TNF-α、IL-6及PT。对TBIL降低不显著与疗程短有关，随着疗程的延长，多数病例的TBIL会逐渐降低。我们推测“熊黄汤”加味应用有类似TNF-α、IL-6拮抗剂的作用，并通过清除TNF-α和IL-6而达到阻止SH肝细胞继续坏死的作用。
参考文献
1 Torre D，Zeroli C，Ciola M，et al.Serum levels of interleukin-1α，interˉleukin-1β，interleukin-6，and tumor necrosis factor in patients with aˉcute viral hepatitis.Clin Infect Dis，1994，18:194.
, http://www.100md.com 2 Kakumu S，Fukatsu A，Shinagawa T，et al.Localization of intrahepatic interleukin6in patients with acute and chronic liver disease.J Clin Pathol，1992，45:408.
3 梁扩寰.肝脏病学.北京:人民卫生出版社，1995，402-403.
4 韩德伍.肝功能衰竭发病机制的研究进展.中国病理生理杂志，1993，9:770.
5 张定凤，任红，郭树华，等.肿瘤坏死因子在病毒性肝炎肝坏死中的作用及其防护.中华医学杂志，1996，70:438.
6 何有成，谢俊强，黄仰更，等.重症病毒性肝炎患者血清TNF-α和IL-6水平变化及其意义.上海免疫学杂志，1998，18(3):170.
7 黎义锦.牛黄、熊胆为主治疗重型肝炎44例.中西医结合肝病杂志，1994，4(4):37.
8 宋立人，洪恂，丁绪亮，等.现代中药学大辞典.北京:人民卫生出版社，2001，2360，397.
基金项目:珠海市卫生局立项资助课题(编号:98201)
作者单位:519000广东省珠海市人民医院
(编辑于少伟), 百拇医药