柴胡等单味中药对犬胆囊运动及血浆CCK含量影响的实验研究
【摘要】 目的 探讨治疗胆石症、胆囊炎的中药方剂中常用的柴胡、枳壳、大黄等单味中药对犬胆囊运动的影响及其作用机制。方法 用B超测量灌服单味中药前后犬胆囊大小，放免法测血浆中灌服中药前后胆囊收缩素(Cholecystokinin CCK)含量。结果 犬在灌服柴胡后胆囊明显收缩，CCK明显升高并且两者之间呈显著负相关。犬在灌服枳壳后胆囊大小及血浆CCK无明显改变。犬在灌服大黄后胆囊先收缩后扩张，血浆CCK无明显改变。结论 柴胡通过增加犬血浆中CCK含量使胆囊明显收缩。大黄可使胆囊先收缩后扩张，但对犬血浆CCK含量无明显影响。
关键词 单味中药 胆囊大小 胆囊收缩素
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)02-0101-03
The influence of single Chinese medicinal herb on the movement of dog gallbladder
, http://www.100md.com
Liu Jingjun，Zheng Changqing，Zhou Zhuo，et al.
Department of Digestive Medicine of Yingkou Municipal Central Hospital，Liaoning115002.
【Abstract】 Objective To study the effect of some kind of Chinese herb on dog gallbladder movement and its mechanism.Methods The size of the dog gallbladder before and after taking medicine was measured by means of B ultrasound，and the dog plasma CCK value was determined by radioimmunal assay.Results The volume of dog gallˉbladder after taking Radix Bupleuri reduced remarkably and the CCK value in the plasma enlarged.The volume of gallˉbladder after taking Radix Et Rhizoma Rhei reduced remarkably，and then enlarged，but the dog plasma CCK concenˉtration had no change.The volume of dog gallbladder and plasma CCK concentrationdidn’t changed after taking Frucˉtus Aurantii.Conclusion Radix Bupleuri makesdog gallbladder reduce by increasing plasma CCK concentration.Radix Et Rhizoma Rhei can make dog gallbldder contract first and then dilate，but has no effect onCCK content in plasma.Fructus Aurantii has no effect on dog gallbladder size and CCK content in plasma.
, http://www.100md.com
Key words single Chinese herb gallbladder volume cholecystokinin
胆石症是我国的常见病。口服药物(特别是中药)排出胆囊、胆道结石是理想的治疗方法。中药利胆排石方剂有多种，有一定效果，也有的效果不够确切，其主要原因是方剂中各单味中药组成不同，它们对胆囊、胆道系统的作用有待进一步的阐明。本研究从组成各利胆方剂中选出柴胡、枳壳、大黄三味中药，给犬灌服单味中药煎剂，通过B超测量用药前后胆囊大小，并通过放免法测定犬血浆中服药前后CCK含量，从而探讨每味中药对胆囊运动的影响及其作用机制。
1 实验材料
1.1 动物 杂种犬10只，体重10.5～15kg，雌雄不限。均由中国医科大学第二临床学院动物实验中心提供，并饲养。
1.2 中药 柴胡150g，枳壳150g，大黄150g，均为本院提供，省医药公司和药品检验所鉴定。煎制方法:每味生药煎煮前分别适当粉碎，于砂锅内分别加蒸馏水浸泡30min，强火加热煮沸，然后用文火加热微沸30min，玻璃棒搅拌，趁热过滤。合并滤液，用水稀释调整至浓度分别为柴胡1.0/ml，枳壳0.5/ml，大黄1.0/ml，罐封备用。
, http://www.100md.com
1.3 仪器 Aloka SSD-210DX超声诊断仪，探头频率3.5MHz。HITACHI OSPR-22低温离心机。胆囊收缩素放免
试剂盒，由第二军医大学神经生物学教研室提供。
2 实验方法
2.1 方法 10只犬编号。每天对2只犬进行实验，再次对同一只犬进行实验间隔7天，实验前禁食12h，实验均于上午进行。
2.1.1 麻醉 于室温下将硫喷妥钠用0.9%生理盐水配制成2.5%溶液，于4℃保存，供7天使用。实验时按20mg/kg进行右下腹腹腔注射麻醉。麻醉进针时有落空感，回抽无回血后注药。注射后约5min麻醉，如果麻醉效果不理想，可再注射原剂量的1/2。
2.1.2 插胃管 犬平卧固定于犬台，剃毛充分暴露右下腹及右上肢皮下头静脉。胃管前部涂适量凡士林，经口下胃管，如无呛咳，并可抽出胃液，说明胃管已下到胃中，固定。于灌药前抽血及测胆囊大小。
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2.1.3 抽血及血样的离心保存 于犬右上肢皮下头静脉抽血5ml，立即加入预冷的，加有(a)抗凝剂:0.3mol/L EDTA-Na 2 (乙二胺四乙酸二钠)100μL。(b)抑肽酶2500U的试管中，混匀，迅速低温离心(4℃，3000r/min，10min)取血浆-20℃保存。
2.1.4 胆囊测量 犬平卧位，探头置于右肋缘下，先顺胆囊长轴扫查，显示胆囊最大纵切面后，冻结图像，测出最大纵切面长径，然后旋转探头90°，扫查胆囊最大横切面，冻结图像，测量最大横切面宽径及高。计算胆囊容积，公式 [1] 如下。V=(L×W×H)×π/6(V:胆囊容积，L:胆囊最大纵切面长径，W:胆囊最大横切面宽，H:胆囊最大横切面高，π=3.14)。胆囊排空率=(空腹容积-剩余容积)/空腹容积×100%。
2.1.5 胃管注入中药 分别于15、30、60及90min抽血及测胆囊大小。方法同前。注入中药煎剂的量分别为:柴胡 0.71g/kg，枳壳0.71g/kg，大黄0.71g/kg。
, 百拇医药
2.2 统计学方法 各参数以均数±标准差(X±s)表示。各组均数比较采用配对t检验，胆囊大小改变与胆囊收缩素(CCK)改变之间进行相关分析。3 实验结果
3.1 胆囊大小变化比较 见表1。表1 用药前后胆囊大小比较 (略) ˇ 注:用药前后比较 ˇP<0.01
(1)犬胆囊在胃灌注柴胡后缩小，灌注药30min，大小(20.19±1.78)较用药前胆囊大小(32.93±3.65)缩小最明显(P<0.01)。灌药后30min较空腹时胆囊收缩38.7%。(2)犬胆囊在胃灌注枳壳前后，大小无明显改变。(3)犬胆囊在胃灌注大黄后30min，大小(24.41±2.74)较空腹大小 (32.62±3.05)显著缩小(P<0.01)，但90min时胆囊大小(41.62±5.12)较空腹显著增大(P<0.01)，较空腹缩小及增大分别为25.2%及27.6%。
3.2 血浆CCK含量变化比较 见表2。表2 用药前后血浆CCK含量比较 (略)ˇ P<0.01(1)犬在胃灌注柴胡30min时，血浆CCK含量(8.43±1.67)，较灌药前CCK含量(4.38±1.41)显著增高(P<0.01)。(2)犬胃在分别灌注枳壳及大黄后血浆CCK含量无明显改变。
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3.3 胆囊大小与血浆CCK含量之间的相关性 在犬胃灌注柴胡前后胆囊大小与血浆CCK含量之间呈显著负相关:r=-0.88，P<0.01。
4 讨论
胆石症是临床常见病，世界各地发病率都很高，我国患病率高达8%～13%。口服药物(特别是中药)是排出胆囊、胆道内结石的理想治疗方法。中药的利胆排石方剂有多种，有的有一定效果，有的效果不够确切，其中主要原因是方剂中各单味中药组成不同，其对胆囊、胆道系统的作用有待进一步的阐明。已有的临床观察及实验研究表明，中药的排石机制可概括为促进排胆功能，增加胆汁分泌，收缩胆囊，降低奥狄氏括约肌张力，加强肠蠕动，抗菌消炎6个方面。胆囊运动以体液调节为主，具有兴奋作用的激素主要有CCK，P物质，其中CCK是一主要的胆囊运动调节多肽。Ivy和Oldberg首先发现并命名CCK，整个小肠的典型内分泌细胞都可以合成贮存和释放CCK肽，尤以十二指肠和上端空肠最为丰富。一般认为，血浆CCK主要通过促进肝脏胆小管细胞分泌碳酸氢盐来刺激肝脏分泌，CCK对胆囊肌肉也有很强的收缩作用。本研究在已有的结论基础上，选取治疗胆石症各方剂中最常用的柴胡、枳壳、大黄三味中药，进一步观察它们对犬胆囊运动以及犬血浆中CCK含量的影响，并观察对胆囊运动的影响是否通过CCK来实现，从而更深一步探讨中药治疗胆石症的机制。 中医理论认为柴胡性苦、微寒，归肝、胆经，能疏散退热，舒肝、升阳。本研究观察到犬胃灌注柴胡水煎液后胆囊明显收缩，灌药后30min胆囊收缩最明显，CCK亦明显升高，灌药后30min CCK升高最明显，胆囊收缩与CCK升高之间有明显的相关性。有报道人口服蒸馏水200ml后胆囊大小并无改变 [2] ，考虑胆囊收缩为药物作用所致。柴胡能使犬的胆汁排出增加，因此考虑柴胡治疗胆石症的机制为增加胆汁流量，收缩胆囊，而柴胡的这些作用是通过CCK来实现的。枳壳性微寒，归脾胃经。本研究胃灌注枳壳水煎液，胆囊大小及血浆CCK含量均无明显改变。枳壳有增加肠蠕动，松弛奥狄氏括约肌的作用，因此考虑枳壳利胆排石作用是通过这两个方面作用来实现。
, http://www.100md.com
中医认为大黄性苦寒，归肝脾经，具有利胆作用。犬胃灌注大黄30min后，胆囊明显收缩，90min后明显扩张，而血浆CCK含量灌药前后无明显变化，这一结果与郑长青等 [2] 在人口服大黄后所观察到的胆囊变化情况一致，但与CorelloM等 [3] ，谢志慧等 [4] 报告:大黄能使人胆囊从30min开始即明显扩张，也能促进实验性急性化脓性胆囊炎胆汁的分泌不一致。这一差别考虑可能与大黄剂量不同有关。大黄能增加胆汁分泌，降低奥狄氏括约肌张力并且有抗菌作用，这使其能够应用于胆石症的治疗，但大黄对胆囊运动的影响，以及它可能通过哪种激素来实现这种作用，有待于深入研究。
参考文献
1 Wylie J.Sonographic measurment of gallbladder volume.AJR，1985，145:1009.
2 郑长青，李宇权，赵素云.利胆排石汤的单味药对健康人胆囊运动功能的影响.中国中西医结合杂志，1997，17(3):159.
3 Corello M.Boll Chim Farm，1967，166:791. 4 谢志慧.现代应用药学，1989，6(6):48.
(收稿日期:2002-08-20)
作者单位:1115002辽宁省营口市中心医院消化内科
2中国医科大学第二临床学院
(编辑张 璇), 百拇医药(刘敬军 郑长青 周卓 牛福玉)
关键词 单味中药 胆囊大小 胆囊收缩素
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)02-0101-03
The influence of single Chinese medicinal herb on the movement of dog gallbladder
, http://www.100md.com
Liu Jingjun，Zheng Changqing，Zhou Zhuo，et al.
Department of Digestive Medicine of Yingkou Municipal Central Hospital，Liaoning115002.
【Abstract】 Objective To study the effect of some kind of Chinese herb on dog gallbladder movement and its mechanism.Methods The size of the dog gallbladder before and after taking medicine was measured by means of B ultrasound，and the dog plasma CCK value was determined by radioimmunal assay.Results The volume of dog gallˉbladder after taking Radix Bupleuri reduced remarkably and the CCK value in the plasma enlarged.The volume of gallˉbladder after taking Radix Et Rhizoma Rhei reduced remarkably，and then enlarged，but the dog plasma CCK concenˉtration had no change.The volume of dog gallbladder and plasma CCK concentrationdidn’t changed after taking Frucˉtus Aurantii.Conclusion Radix Bupleuri makesdog gallbladder reduce by increasing plasma CCK concentration.Radix Et Rhizoma Rhei can make dog gallbldder contract first and then dilate，but has no effect onCCK content in plasma.Fructus Aurantii has no effect on dog gallbladder size and CCK content in plasma.
, http://www.100md.com
Key words single Chinese herb gallbladder volume cholecystokinin
胆石症是我国的常见病。口服药物(特别是中药)排出胆囊、胆道结石是理想的治疗方法。中药利胆排石方剂有多种，有一定效果，也有的效果不够确切，其主要原因是方剂中各单味中药组成不同，它们对胆囊、胆道系统的作用有待进一步的阐明。本研究从组成各利胆方剂中选出柴胡、枳壳、大黄三味中药，给犬灌服单味中药煎剂，通过B超测量用药前后胆囊大小，并通过放免法测定犬血浆中服药前后CCK含量，从而探讨每味中药对胆囊运动的影响及其作用机制。
1 实验材料
1.1 动物 杂种犬10只，体重10.5～15kg，雌雄不限。均由中国医科大学第二临床学院动物实验中心提供，并饲养。
1.2 中药 柴胡150g，枳壳150g，大黄150g，均为本院提供，省医药公司和药品检验所鉴定。煎制方法:每味生药煎煮前分别适当粉碎，于砂锅内分别加蒸馏水浸泡30min，强火加热煮沸，然后用文火加热微沸30min，玻璃棒搅拌，趁热过滤。合并滤液，用水稀释调整至浓度分别为柴胡1.0/ml，枳壳0.5/ml，大黄1.0/ml，罐封备用。
, http://www.100md.com
1.3 仪器 Aloka SSD-210DX超声诊断仪，探头频率3.5MHz。HITACHI OSPR-22低温离心机。胆囊收缩素放免
试剂盒，由第二军医大学神经生物学教研室提供。
2 实验方法
2.1 方法 10只犬编号。每天对2只犬进行实验，再次对同一只犬进行实验间隔7天，实验前禁食12h，实验均于上午进行。
2.1.1 麻醉 于室温下将硫喷妥钠用0.9%生理盐水配制成2.5%溶液，于4℃保存，供7天使用。实验时按20mg/kg进行右下腹腹腔注射麻醉。麻醉进针时有落空感，回抽无回血后注药。注射后约5min麻醉，如果麻醉效果不理想，可再注射原剂量的1/2。
2.1.2 插胃管 犬平卧固定于犬台，剃毛充分暴露右下腹及右上肢皮下头静脉。胃管前部涂适量凡士林，经口下胃管，如无呛咳，并可抽出胃液，说明胃管已下到胃中，固定。于灌药前抽血及测胆囊大小。
, http://www.100md.com
2.1.3 抽血及血样的离心保存 于犬右上肢皮下头静脉抽血5ml，立即加入预冷的，加有(a)抗凝剂:0.3mol/L EDTA-Na 2 (乙二胺四乙酸二钠)100μL。(b)抑肽酶2500U的试管中，混匀，迅速低温离心(4℃，3000r/min，10min)取血浆-20℃保存。
2.1.4 胆囊测量 犬平卧位，探头置于右肋缘下，先顺胆囊长轴扫查，显示胆囊最大纵切面后，冻结图像，测出最大纵切面长径，然后旋转探头90°，扫查胆囊最大横切面，冻结图像，测量最大横切面宽径及高。计算胆囊容积，公式 [1] 如下。V=(L×W×H)×π/6(V:胆囊容积，L:胆囊最大纵切面长径，W:胆囊最大横切面宽，H:胆囊最大横切面高，π=3.14)。胆囊排空率=(空腹容积-剩余容积)/空腹容积×100%。
2.1.5 胃管注入中药 分别于15、30、60及90min抽血及测胆囊大小。方法同前。注入中药煎剂的量分别为:柴胡 0.71g/kg，枳壳0.71g/kg，大黄0.71g/kg。
, 百拇医药
2.2 统计学方法 各参数以均数±标准差(X±s)表示。各组均数比较采用配对t检验，胆囊大小改变与胆囊收缩素(CCK)改变之间进行相关分析。3 实验结果
3.1 胆囊大小变化比较 见表1。表1 用药前后胆囊大小比较 (略) ˇ 注:用药前后比较 ˇP<0.01
(1)犬胆囊在胃灌注柴胡后缩小，灌注药30min，大小(20.19±1.78)较用药前胆囊大小(32.93±3.65)缩小最明显(P<0.01)。灌药后30min较空腹时胆囊收缩38.7%。(2)犬胆囊在胃灌注枳壳前后，大小无明显改变。(3)犬胆囊在胃灌注大黄后30min，大小(24.41±2.74)较空腹大小 (32.62±3.05)显著缩小(P<0.01)，但90min时胆囊大小(41.62±5.12)较空腹显著增大(P<0.01)，较空腹缩小及增大分别为25.2%及27.6%。
3.2 血浆CCK含量变化比较 见表2。表2 用药前后血浆CCK含量比较 (略)ˇ P<0.01(1)犬在胃灌注柴胡30min时，血浆CCK含量(8.43±1.67)，较灌药前CCK含量(4.38±1.41)显著增高(P<0.01)。(2)犬胃在分别灌注枳壳及大黄后血浆CCK含量无明显改变。
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3.3 胆囊大小与血浆CCK含量之间的相关性 在犬胃灌注柴胡前后胆囊大小与血浆CCK含量之间呈显著负相关:r=-0.88，P<0.01。
4 讨论
胆石症是临床常见病，世界各地发病率都很高，我国患病率高达8%～13%。口服药物(特别是中药)是排出胆囊、胆道内结石的理想治疗方法。中药的利胆排石方剂有多种，有的有一定效果，有的效果不够确切，其中主要原因是方剂中各单味中药组成不同，其对胆囊、胆道系统的作用有待进一步的阐明。已有的临床观察及实验研究表明，中药的排石机制可概括为促进排胆功能，增加胆汁分泌，收缩胆囊，降低奥狄氏括约肌张力，加强肠蠕动，抗菌消炎6个方面。胆囊运动以体液调节为主，具有兴奋作用的激素主要有CCK，P物质，其中CCK是一主要的胆囊运动调节多肽。Ivy和Oldberg首先发现并命名CCK，整个小肠的典型内分泌细胞都可以合成贮存和释放CCK肽，尤以十二指肠和上端空肠最为丰富。一般认为，血浆CCK主要通过促进肝脏胆小管细胞分泌碳酸氢盐来刺激肝脏分泌，CCK对胆囊肌肉也有很强的收缩作用。本研究在已有的结论基础上，选取治疗胆石症各方剂中最常用的柴胡、枳壳、大黄三味中药，进一步观察它们对犬胆囊运动以及犬血浆中CCK含量的影响，并观察对胆囊运动的影响是否通过CCK来实现，从而更深一步探讨中药治疗胆石症的机制。 中医理论认为柴胡性苦、微寒，归肝、胆经，能疏散退热，舒肝、升阳。本研究观察到犬胃灌注柴胡水煎液后胆囊明显收缩，灌药后30min胆囊收缩最明显，CCK亦明显升高，灌药后30min CCK升高最明显，胆囊收缩与CCK升高之间有明显的相关性。有报道人口服蒸馏水200ml后胆囊大小并无改变 [2] ，考虑胆囊收缩为药物作用所致。柴胡能使犬的胆汁排出增加，因此考虑柴胡治疗胆石症的机制为增加胆汁流量，收缩胆囊，而柴胡的这些作用是通过CCK来实现的。枳壳性微寒，归脾胃经。本研究胃灌注枳壳水煎液，胆囊大小及血浆CCK含量均无明显改变。枳壳有增加肠蠕动，松弛奥狄氏括约肌的作用，因此考虑枳壳利胆排石作用是通过这两个方面作用来实现。
, http://www.100md.com
中医认为大黄性苦寒，归肝脾经，具有利胆作用。犬胃灌注大黄30min后，胆囊明显收缩，90min后明显扩张，而血浆CCK含量灌药前后无明显变化，这一结果与郑长青等 [2] 在人口服大黄后所观察到的胆囊变化情况一致，但与CorelloM等 [3] ，谢志慧等 [4] 报告:大黄能使人胆囊从30min开始即明显扩张，也能促进实验性急性化脓性胆囊炎胆汁的分泌不一致。这一差别考虑可能与大黄剂量不同有关。大黄能增加胆汁分泌，降低奥狄氏括约肌张力并且有抗菌作用，这使其能够应用于胆石症的治疗，但大黄对胆囊运动的影响，以及它可能通过哪种激素来实现这种作用，有待于深入研究。
参考文献
1 Wylie J.Sonographic measurment of gallbladder volume.AJR，1985，145:1009.
2 郑长青，李宇权，赵素云.利胆排石汤的单味药对健康人胆囊运动功能的影响.中国中西医结合杂志，1997，17(3):159.
3 Corello M.Boll Chim Farm，1967，166:791. 4 谢志慧.现代应用药学，1989，6(6):48.
(收稿日期:2002-08-20)
作者单位:1115002辽宁省营口市中心医院消化内科
2中国医科大学第二临床学院
(编辑张 璇), 百拇医药(刘敬军 郑长青 周卓 牛福玉)