海带硫酸多糖对CP所致小鼠白细胞减少症影响的研究
【摘要】 目的 观察海带硫酸多糖对小鼠白细胞减少症的影响。方法 小鼠用CP(环磷酰胺)处理成白细胞减少的模型，实验组小鼠腹腔注射不同剂量(100、50.、25和12.5mg·kg -1 ·d -1 )的海带硫酸多糖，对照组注射生理盐水，在不同的时间进行白细胞计数;最后处死小鼠，称脾脏重量。结果 实验组小鼠的白细胞比对照组恢复的快，脾脏量重。结论 海带硫酸多糖能很好的拮抗和预防CP所导致的白细胞下降。
关键词 海带硫酸多糖 环磷酰胺 白细胞 生物学功能
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)17-2571-03
Study on the influence of laminaria polysaccharide sulphate on
increasing leukocyte of mouse treated with CP
, 百拇医药
Wang Qilin，Qu Aiqin，Wang Hairen
School of Life Science，Liaocheng University，Shandong252059.
【Abstract】 Objective To observe the role of Laminaria polysaccharide sulphate(LPS)in increasing leukoˉcyte.Methods The mice were treated with cyclophosphamide(CP)，the leukocyte numbers were detected at different time，and the spleen weights were also tested.Results The leukocyte number of the experiment groups had more rapidly recovery than that of control group(P<0.05)，and the spleen weight was heavier.Conclusion The result suggested LPS possessed the inhibitor effects on mutagenesis induced by CP.
, 百拇医药
Key words laminaria polysaccharide sulfate CP leukocyte biological functions
从海带中提取的海带硫酸多糖是一类高分子杂多糖，具有多种生物学功能，如降血糖、血脂 [1] ，抗肿瘤 [2] 、抗病毒 [3] 、提高机体免疫力 [4] 等。海带硫酸多糖的这些生物学功能和其单糖组成、硫酸根的含量是有一定的关系。我们从海带中提取的海带硫酸多糖，含有岩藻糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖，还有糖醛酸，硫酸根含量在35%左右。我们研究了海带硫酸多糖对CP所致小鼠白细胞减少的影响。
1 材料与方法
1.1 材料 海带硫酸多糖自制成白色粉末，达到电泳纯和层析纯，分子量在1.7×10 5 ;环磷酰胺，上海第十二药厂;昆明种小鼠，山东医科大学实验动物中心提供。
, http://www.100md.com
1.2 拮抗实验 取小鼠36只，随机分为6组，4个实验组的每只小鼠腹腔注射海带硫酸多糖剂量分别为100、50、25和12.5mg·kg -1 ·d -1 ，并设阴性对照组(腹腔注射生理盐水)和正常组。4个实验组和对照组用CP处理成白细胞减少的模型(腹腔注射CP100mg·kg -1 ·d -1 ，共3天)。各实验组在开始腹腔注射CP的同一天，注射海带硫酸多糖，连续10天;对照组注射生理盐水10天。各组小鼠于用药前尾部取血1次;注射CP后，每隔3天取血1次，进行白细胞计数。在第13天，处死小鼠，称取脾重。
1.3 预防实验 取小鼠36只，分组方法同实验1，实验组先分别注射不同剂量的海带硫酸多糖，共10天;对照组每只 注射生理盐水0.2ml·kg -1 ·d -1 10天。在最后3天，给对照组和实验组腹腔注射CP(100mg·kg -1 ·d -1 )。用药前，从小鼠尾部取血1次，计数白细胞;用药后，每4天尾部取血1次进行白细胞计数。在第十三天处死小鼠，称脾重、体重。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 拮抗实验 实验前所测小鼠白细胞平均数设为100%，将实验中测定的细胞数转换成百分数绘制图表，结果见表1和图1。
图1 各组小鼠给药后白细胞数的变化曲线(Ⅰ)
系列1:正常组 系列2:对照组 系列3～6:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ
如图所示，在给予CP后，各组小鼠白细胞数量均有明显下降。对照组在第6天开始回升，在第9天，恢复接近正常水平。而实验组，在第6天，就已经接近原来水平，在第9天，白细胞数量均高于正常组。如表1所示，进行方差分 析表明，用CP后第6天，除12.5mg·kg -1 ·d -1 剂量组外，其它实验组与对照组差异均有显著性(P<0.05)。
2.2 预防实验 数据处理同实验1，结果见表2和图2。
, http://www.100md.com
表1 海带硫酸多糖(LPS)对CP所导致小鼠白细胞减少拮抗作用
注:与对照组相比 ˇ P<0.05
表2 海带硫酸多糖(LPS)对CP所导致小鼠白细胞减少的预防作用
注:与对照组相比 ˇ P<0.05
图2 各组小鼠给药后白细胞数的变化曲线(Ⅱ)
系列1:正常组 系列2:对照组 系列3～6:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ
在预防实验中，由图2和表2可以看出，在注射3天CP后，对照组和实验组的白细胞数量均大幅度下降，但是除了12.5mg·kg -1 ·d -1 剂量组外，其它实验组下降的程度均小于 对照组。在第12天白细胞计数时，实验组和对照组的白细胞数目均有一定程度的恢复，但是实验组明显比对照组恢复的快。其中100和50两个剂量组与对照组差异有显著性(P<0.05)。
, 百拇医药
以上两个实验中，实验组的脾脏指数均高于对照组。以上实验结果表明，海带硫酸多糖对CP所导致的小鼠白细胞减少具有明显的保护作用。
3 讨论
海带硫酸多糖具有多种生物学功能，该实验证明其能拮抗和预防由CP所导致的白细胞下降，具有重要的意义。因为CP是一种化疗药物，在临床上多用于肿瘤的治疗，但它具有较强的毒副作用，在杀死肿瘤细胞的同时，将大量的正常细胞也杀死，尤其是淋巴细胞和造血干细胞，造成机体免疫功能下降。因此研制出能配合化学治疗，拮抗和预防白细胞下降的药物在临床上具有重要的意义。海带硫酸多糖是小鼠有丝分裂原，并可诱导巨噬细胞产生IL-1 [5] 。而IL-1对T淋巴细胞的活化增殖有促进作用，推测海带硫酸多糖能拮抗白细胞下降的作用机制与此有关。但进一步的机制还有待于探讨研究。
参考文献
1 李福川，唐志红.三种海带多糖的降糖作用.中国海洋药物，2000，5:12.
, 百拇医药
2 徐中平，李福川.昆布多糖硫酸酯的抑制血管生成和抗肿瘤作用.中草药，1999，30(9):551.
3 M.Zumoto T et al.Jpn J Exp Med，1988，58(3):145-151.
4 陈琉强，吴丙南.四种多糖化合物的抗癌作用及其对免疫功能的影响.癌症，1997，16(3):198.
5 宋剑秋，徐誉泰.海带硫酸多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用.中国免疫学杂志，2000，16(2):70.
作者单位:252059山东聊城大学生命科学院
山东大学生命科学院
(编辑维 兰), http://www.100md.com(王琪琳 曲爱琴 王海仁)
关键词 海带硫酸多糖 环磷酰胺 白细胞 生物学功能
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)17-2571-03
Study on the influence of laminaria polysaccharide sulphate on
increasing leukocyte of mouse treated with CP
, 百拇医药
Wang Qilin，Qu Aiqin，Wang Hairen
School of Life Science，Liaocheng University，Shandong252059.
【Abstract】 Objective To observe the role of Laminaria polysaccharide sulphate(LPS)in increasing leukoˉcyte.Methods The mice were treated with cyclophosphamide(CP)，the leukocyte numbers were detected at different time，and the spleen weights were also tested.Results The leukocyte number of the experiment groups had more rapidly recovery than that of control group(P<0.05)，and the spleen weight was heavier.Conclusion The result suggested LPS possessed the inhibitor effects on mutagenesis induced by CP.
, 百拇医药
Key words laminaria polysaccharide sulfate CP leukocyte biological functions
从海带中提取的海带硫酸多糖是一类高分子杂多糖，具有多种生物学功能，如降血糖、血脂 [1] ，抗肿瘤 [2] 、抗病毒 [3] 、提高机体免疫力 [4] 等。海带硫酸多糖的这些生物学功能和其单糖组成、硫酸根的含量是有一定的关系。我们从海带中提取的海带硫酸多糖，含有岩藻糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖，还有糖醛酸，硫酸根含量在35%左右。我们研究了海带硫酸多糖对CP所致小鼠白细胞减少的影响。
1 材料与方法
1.1 材料 海带硫酸多糖自制成白色粉末，达到电泳纯和层析纯，分子量在1.7×10 5 ;环磷酰胺，上海第十二药厂;昆明种小鼠，山东医科大学实验动物中心提供。
, http://www.100md.com
1.2 拮抗实验 取小鼠36只，随机分为6组，4个实验组的每只小鼠腹腔注射海带硫酸多糖剂量分别为100、50、25和12.5mg·kg -1 ·d -1 ，并设阴性对照组(腹腔注射生理盐水)和正常组。4个实验组和对照组用CP处理成白细胞减少的模型(腹腔注射CP100mg·kg -1 ·d -1 ，共3天)。各实验组在开始腹腔注射CP的同一天，注射海带硫酸多糖，连续10天;对照组注射生理盐水10天。各组小鼠于用药前尾部取血1次;注射CP后，每隔3天取血1次，进行白细胞计数。在第13天，处死小鼠，称取脾重。
1.3 预防实验 取小鼠36只，分组方法同实验1，实验组先分别注射不同剂量的海带硫酸多糖，共10天;对照组每只 注射生理盐水0.2ml·kg -1 ·d -1 10天。在最后3天，给对照组和实验组腹腔注射CP(100mg·kg -1 ·d -1 )。用药前，从小鼠尾部取血1次，计数白细胞;用药后，每4天尾部取血1次进行白细胞计数。在第十三天处死小鼠，称脾重、体重。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 拮抗实验 实验前所测小鼠白细胞平均数设为100%，将实验中测定的细胞数转换成百分数绘制图表，结果见表1和图1。
图1 各组小鼠给药后白细胞数的变化曲线(Ⅰ)
系列1:正常组 系列2:对照组 系列3～6:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ
如图所示，在给予CP后，各组小鼠白细胞数量均有明显下降。对照组在第6天开始回升，在第9天，恢复接近正常水平。而实验组，在第6天，就已经接近原来水平，在第9天，白细胞数量均高于正常组。如表1所示，进行方差分 析表明，用CP后第6天，除12.5mg·kg -1 ·d -1 剂量组外，其它实验组与对照组差异均有显著性(P<0.05)。
2.2 预防实验 数据处理同实验1，结果见表2和图2。
, http://www.100md.com
表1 海带硫酸多糖(LPS)对CP所导致小鼠白细胞减少拮抗作用
注:与对照组相比 ˇ P<0.05
表2 海带硫酸多糖(LPS)对CP所导致小鼠白细胞减少的预防作用
注:与对照组相比 ˇ P<0.05
图2 各组小鼠给药后白细胞数的变化曲线(Ⅱ)
系列1:正常组 系列2:对照组 系列3～6:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ
在预防实验中，由图2和表2可以看出，在注射3天CP后，对照组和实验组的白细胞数量均大幅度下降，但是除了12.5mg·kg -1 ·d -1 剂量组外，其它实验组下降的程度均小于 对照组。在第12天白细胞计数时，实验组和对照组的白细胞数目均有一定程度的恢复，但是实验组明显比对照组恢复的快。其中100和50两个剂量组与对照组差异有显著性(P<0.05)。
, 百拇医药
以上两个实验中，实验组的脾脏指数均高于对照组。以上实验结果表明，海带硫酸多糖对CP所导致的小鼠白细胞减少具有明显的保护作用。
3 讨论
海带硫酸多糖具有多种生物学功能，该实验证明其能拮抗和预防由CP所导致的白细胞下降，具有重要的意义。因为CP是一种化疗药物，在临床上多用于肿瘤的治疗，但它具有较强的毒副作用，在杀死肿瘤细胞的同时，将大量的正常细胞也杀死，尤其是淋巴细胞和造血干细胞，造成机体免疫功能下降。因此研制出能配合化学治疗，拮抗和预防白细胞下降的药物在临床上具有重要的意义。海带硫酸多糖是小鼠有丝分裂原，并可诱导巨噬细胞产生IL-1 [5] 。而IL-1对T淋巴细胞的活化增殖有促进作用，推测海带硫酸多糖能拮抗白细胞下降的作用机制与此有关。但进一步的机制还有待于探讨研究。
参考文献
1 李福川，唐志红.三种海带多糖的降糖作用.中国海洋药物，2000，5:12.
, 百拇医药
2 徐中平，李福川.昆布多糖硫酸酯的抑制血管生成和抗肿瘤作用.中草药，1999，30(9):551.
3 M.Zumoto T et al.Jpn J Exp Med，1988，58(3):145-151.
4 陈琉强，吴丙南.四种多糖化合物的抗癌作用及其对免疫功能的影响.癌症，1997，16(3):198.
5 宋剑秋，徐誉泰.海带硫酸多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用.中国免疫学杂志，2000，16(2):70.
作者单位:252059山东聊城大学生命科学院
山东大学生命科学院
(编辑维 兰), http://www.100md.com(王琪琳 曲爱琴 王海仁)