糖尿病酮症酸中毒的生化检测及临床意义
【文献标识码】 B 【文章编号】 1684-2030(2003)01-0064-02
近年来随着人民生活水平的提高，糖尿病发病率也逐年上升，随之由于各种因素引起的并发症也相继增多。糖尿病酮症酸中毒是糖尿病一种严重急性并发症，由于其病情常较重，如不及时抢救会危及患者生命，为了及时、准确判断病情，非常需要一个高灵敏度且特异性强的指标，D- 3-羟丁酸的测定不仅满足了上述要求，而且还可作为糖尿病昏迷的诊断及鉴别诊断指标。笔者在自动生化分析仪上，在340nm下进行连续监测，操作简单，迅速可得结果，精密度好，线性范围较宽，适合于各种自动生化分析仪，建立了适合于临床应用及自动生化分析仪的方法和参考值。
1 材料和方法
1.1 原理 D-3-羟丁酸+NAD + 3-羟丁酸脱氢酶乙酰乙酸+NADH NADH在340nm处有最大吸收峰，此波长下的吸光度变化与D-3-羟丁酸的浓度成正比。
, http://www.100md.com
1.2 材料 100mmol/L Tris缓冲液，pH8.5;NAD + 2.5mmol/L，3-HBDH0.12U/ml;标准1mmol/L(Randox公司);血糖异常病人及正常人空腹采血，离心，取血清备用。日立7170全自动生化分析仪。
1.3 方法 7170分析仪主要参数:标准液浓度S 1 ∶0，S 2 ∶1.0样品:4.0μl，试剂:200μl，测试方法:两点速率法，副/主波长700/340，测定点(3)(10)。
2 结果
2.1 线性范围 取D-3-羟丁酸值高于5.8mmol/L的标本，制成混合高值血清，配成不同稀释度测定，相关系数r=0.987，说明在0～5.8mmol/L范围内，本法具有很好的线性。
2.2 精密度 取正常体检混合血清标本，在1天内重复测定20次，求得批内精密度，均值X=0.20mmol/L，标准差s=0.0082，变异系数CV=4.1%;将该标本连续测定5d，每天测10次，求得批间精密度，X=0.20mmol/L，s=0.0122，CV=6.1%。说明本方法重复性好，精密度较高。
, 百拇医药
2.3 干扰实验 对高浓度胆红素(0.23g/L)，甘油三酯(8g/L)，血红素(10g/L)标本进行测定，没有发现对测定结果有影响，说明至少在此浓度下的标本不受干扰。Fe 3+ (100μmol/L)、Ca 2+ (8.2mmol/L)对测定不干扰。
2.4 实验稳定性 取1份正常体检血清标本置于4℃冰箱，连续测定6d，CV=5.2%，说明至少可稳定6d。
2.5 参考值 取健康体检血清50份，按上述方法检测D-3-羟丁酸，所得范围为0.16±0.12mmol/L。
3 讨论
糖尿病酮症酸中毒是糖尿病的急性并发症，也是内科 常见危象之一。当糖尿病代谢紊乱发展至严重阶段，脂肪分解加速，酮体形成增加而利用减慢，大量消耗体内储备碱，而发生代谢性酸中毒，病情严重时发生昏迷 [1，2] 。临床上常通过测定酮体来进行监测，酮体包括:D-3-羟丁酸、乙酰乙酸和丙酮，其中D-3-羟丁酸在酮体中占总量的70%，它可在体内转化成乙酰乙酸，经三羧酸循环代谢 [3] 。酮症时D-3-羟丁酸的改变要比血糖早2h，且早于乙酰乙酸，随着治疗的进行，D-3-羟丁酸不断氧化生成乙酰乙酸，尿中乙酰乙酸升高，导致尿酮体升高，易误导治疗，但血中D-3-羟丁酸水平开始下降，因此D-3-羟丁酸可反映体内酮体的情况和酸中毒的真实情况，在糖尿病酮症酸中毒的治疗过程中监测血D-3-羟丁酸的变化，可准确了解酮症酸中毒的治疗效果 [3] 。以往由于不能常规进行D-3-羟丁酸定量测定，而是先测尿糖和尿酮体，阳性之后才用酮试纸进行半定量试验，试验时须将血浆进行系列稀释后检测，既繁琐又贻误抢救时间，而D-3-羟丁酸的定量测定不仅可以解决此问题，而且还对病情的准确判断及疗效观察起重要作用 [4] 。此外，由于胰岛素过量而导致低血糖昏迷时，D-3-羟丁酸水平升高，而神经性低血糖昏迷时，D-3-羟丁酸水平正常，所以，D-3-羟丁酸还可作为糖尿病昏迷的鉴别诊断指标。
, 百拇医药
参考文献
1 张文武.急诊内科学，北京:人民卫生出版社，2000，447.
2 Gefalu WT.Diabetic ketoacidosis.Crit Care Clin，1991，7:89.
3 倪桂臣，吴玉筠，朱逞.应用胰岛素泵治疗儿童1型糖尿病合并酮症酸中毒.中华儿科杂志，2000，38:494.
4 Knight G.Intersified injection regimens and insulin pump therapy.In:Tattersall RB，Gale EAM，eds.Diabetes clinical management.Singapore:Longman Group UK Limited，1990，207.
(收稿日期:2002-11-01)
作者单位:100730卫生部北京医院检验科
(编辑晓 亮), 百拇医药(王冬环)
近年来随着人民生活水平的提高，糖尿病发病率也逐年上升，随之由于各种因素引起的并发症也相继增多。糖尿病酮症酸中毒是糖尿病一种严重急性并发症，由于其病情常较重，如不及时抢救会危及患者生命，为了及时、准确判断病情，非常需要一个高灵敏度且特异性强的指标，D- 3-羟丁酸的测定不仅满足了上述要求，而且还可作为糖尿病昏迷的诊断及鉴别诊断指标。笔者在自动生化分析仪上，在340nm下进行连续监测，操作简单，迅速可得结果，精密度好，线性范围较宽，适合于各种自动生化分析仪，建立了适合于临床应用及自动生化分析仪的方法和参考值。
1 材料和方法
1.1 原理 D-3-羟丁酸+NAD + 3-羟丁酸脱氢酶乙酰乙酸+NADH NADH在340nm处有最大吸收峰，此波长下的吸光度变化与D-3-羟丁酸的浓度成正比。
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1.2 材料 100mmol/L Tris缓冲液，pH8.5;NAD + 2.5mmol/L，3-HBDH0.12U/ml;标准1mmol/L(Randox公司);血糖异常病人及正常人空腹采血，离心，取血清备用。日立7170全自动生化分析仪。
1.3 方法 7170分析仪主要参数:标准液浓度S 1 ∶0，S 2 ∶1.0样品:4.0μl，试剂:200μl，测试方法:两点速率法，副/主波长700/340，测定点(3)(10)。
2 结果
2.1 线性范围 取D-3-羟丁酸值高于5.8mmol/L的标本，制成混合高值血清，配成不同稀释度测定，相关系数r=0.987，说明在0～5.8mmol/L范围内，本法具有很好的线性。
2.2 精密度 取正常体检混合血清标本，在1天内重复测定20次，求得批内精密度，均值X=0.20mmol/L，标准差s=0.0082，变异系数CV=4.1%;将该标本连续测定5d，每天测10次，求得批间精密度，X=0.20mmol/L，s=0.0122，CV=6.1%。说明本方法重复性好，精密度较高。
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2.3 干扰实验 对高浓度胆红素(0.23g/L)，甘油三酯(8g/L)，血红素(10g/L)标本进行测定，没有发现对测定结果有影响，说明至少在此浓度下的标本不受干扰。Fe 3+ (100μmol/L)、Ca 2+ (8.2mmol/L)对测定不干扰。
2.4 实验稳定性 取1份正常体检血清标本置于4℃冰箱，连续测定6d，CV=5.2%，说明至少可稳定6d。
2.5 参考值 取健康体检血清50份，按上述方法检测D-3-羟丁酸，所得范围为0.16±0.12mmol/L。
3 讨论
糖尿病酮症酸中毒是糖尿病的急性并发症，也是内科 常见危象之一。当糖尿病代谢紊乱发展至严重阶段，脂肪分解加速，酮体形成增加而利用减慢，大量消耗体内储备碱，而发生代谢性酸中毒，病情严重时发生昏迷 [1，2] 。临床上常通过测定酮体来进行监测，酮体包括:D-3-羟丁酸、乙酰乙酸和丙酮，其中D-3-羟丁酸在酮体中占总量的70%，它可在体内转化成乙酰乙酸，经三羧酸循环代谢 [3] 。酮症时D-3-羟丁酸的改变要比血糖早2h，且早于乙酰乙酸，随着治疗的进行，D-3-羟丁酸不断氧化生成乙酰乙酸，尿中乙酰乙酸升高，导致尿酮体升高，易误导治疗，但血中D-3-羟丁酸水平开始下降，因此D-3-羟丁酸可反映体内酮体的情况和酸中毒的真实情况，在糖尿病酮症酸中毒的治疗过程中监测血D-3-羟丁酸的变化，可准确了解酮症酸中毒的治疗效果 [3] 。以往由于不能常规进行D-3-羟丁酸定量测定，而是先测尿糖和尿酮体，阳性之后才用酮试纸进行半定量试验，试验时须将血浆进行系列稀释后检测，既繁琐又贻误抢救时间，而D-3-羟丁酸的定量测定不仅可以解决此问题，而且还对病情的准确判断及疗效观察起重要作用 [4] 。此外，由于胰岛素过量而导致低血糖昏迷时，D-3-羟丁酸水平升高，而神经性低血糖昏迷时，D-3-羟丁酸水平正常，所以，D-3-羟丁酸还可作为糖尿病昏迷的鉴别诊断指标。
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参考文献
1 张文武.急诊内科学，北京:人民卫生出版社，2000，447.
2 Gefalu WT.Diabetic ketoacidosis.Crit Care Clin，1991，7:89.
3 倪桂臣，吴玉筠，朱逞.应用胰岛素泵治疗儿童1型糖尿病合并酮症酸中毒.中华儿科杂志，2000，38:494.
4 Knight G.Intersified injection regimens and insulin pump therapy.In:Tattersall RB，Gale EAM，eds.Diabetes clinical management.Singapore:Longman Group UK Limited，1990，207.
(收稿日期:2002-11-01)
作者单位:100730卫生部北京医院检验科
(编辑晓 亮), 百拇医药(王冬环)