复方参芪克糖片的药效学研究
【摘要】 目的 探讨复方参芪克糖片对实验性糖尿病模型血糖、甘油三酯、胆固醇及免疫指标的影响。方法 利用实验性糖尿病、食物性高血脂动物模型和免疫指标进行观察。结果 复方参芪克糖片对实验性糖尿病模型的高血糖具有明显的抑制作用，并且对四氧嘧啶性糖尿病小鼠的细胞免疫和体液免疫功能有明显的增强作用。结论 对食物性高血脂大鼠具有明显的降脂作用。
关键词 复方参芪克糖片/药效学 实验性糖尿病模型/血糖 食物性高血脂动物模型/甘油三酯和胆固醇 免疫指标
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2003)18-2724-03
复方参芪克糖片是一种新型的抗糖尿病中药复方，由人参、当归、黄芪、枸杞等成分组成，临床上用于治疗糖尿病多年，收到了满意疗效。笔者观察了该药对实验性糖尿病模型血糖及免疫指标的影响，并观察了该药对食物性高血脂大鼠血脂的影响。
, 百拇医药
1 材料
1.1 药物 复方参芪克糖片:自制批号20010412;降糖舒(吉林天泰药业有限责任公司)、四氧嘧啶(Alloxan，ALX，Sigˉma公司);肾上腺素:山东新华制药厂，批号20010508;RPMI1640液，RPMI干粉10.4g，碳酸氢钠2g，丙酮酸钠110mg，L—谷氨酸胺280mg，0.4%酚红0.8ml，青霉素20万U，溶于1000ml重蒸水中;植物血凝素(PHA):广东医药工业研究所;H—TdR:中国科学院上海原子能研究所，批号20010207;胆固醇:上海长征生化制药厂生产;肌酸烟酸酯片:北京第二制药厂生产;丙氧硫嘧啶片:第二军医大学朝晖制药厂生产;胆固醇、甘油三酯试剂盒:东欧生物工程公司提供。
1.2 仪器 ABBOTT—CCX，全自动生化分析仪，美国产;β液闪计数仪，美国产;721分光光度计，上海产。
1.3 实验动物 雄性Wistar大鼠，体重180～220g，雄性昆明种小鼠，体重(20±2)g，由广东省医学实验动物中心提供;Balb/c小鼠，体重(23±1)g，由北京中华人民共和国卫生部药品生物制品鉴定所提供。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 对实验性糖尿病模型血糖的影响
2.1.1 对四氧嘧啶性大鼠高血糖的影响 [1] 雄性Wistar大鼠60只，10只为正常对照组，其余大鼠禁食14h后尾静脉注射四氧嘧啶40mg/kg，注射48h后取空腹血，用葡葡糖氧化酶法 [2] 测定血糖含量，按升高的血糖值分组(血糖值不在17～27mmol/L范围者剔除)，每组10只，分别为四氧嘧啶对照组，复方参芪克糖片大剂量组6g/kg，小剂量组2g/kg，降糖舒组3g/kg，每日灌胃给药1次，正常对照组及四氧嘧啶对照组给予等容积生理盐水(以下试验相同)，连续给药10天，于末次给药1h后取血测血糖值，结果做t检验，见表1。
表1 复方参芪克糖片对四氧嘧啶性高血糖的影响
注:与四氧嘧啶对照组比较， ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01
, 百拇医药
结果表明，复方参芪克糖片对大鼠四氧嘧啶性高血糖有明显的抑制作用，P<0.05。
2.1.2 对四氧嘧啶性小鼠高血糖的影响 [3] 雄性昆明种小鼠80只，10只为正常对照，其余小鼠禁食20h后尾静脉注射四氧嘧啶70mg/kg，注射40h后取空腹血测血糖值，按血糖升高值平均分为4组(血糖值不在10～80mmol/L范围 者剔除)，每组13只，分别为四氧嘧啶对照组、参芪克糖大剂量组(13.5g/kg)，小剂量组(4.5g/kg)，降糖舒组(3g/kg)，每日灌胃给药1次，连续给药20天后取血测血糖值，结果做t检验，见表2。
表2 复方参芪克糖片对四氧嘧啶性小鼠高血糖的影响
注:与四氧嘧啶组比较， ˇˇ P<0.01
结果表明，复方参芪克糖片可明显抑制四氧嘧啶性小鼠血糖升高(P<0.01)。
, http://www.100md.com
2.1.3 对肾上腺素性小鼠高血糖的影响 雄性昆明种小鼠按体重平均分为5组，分别为正常对照组，肾上腺素对照组、参芪克糖大剂量组(13.5g/kg)，小剂量组(4.5g/kg)及降糖舒组(3g/kg)，每日灌胃给药1次，连续给药10天，于末次给药1h后，除正常对照组外其余各组小鼠腹腔注射肾上腺素0.2mg/kg，注射1h后取血测血糖值，结果做t检验，见表3。
表3复方参芪克糖片对肾上腺素性小鼠高血糖的影响
注:与肾上腺素对照组比较， ˇˇP<0.01
结果表明，复方参芪克糖片可明显抑制肾上腺素性小鼠血糖升高(P<0.01)。
2.1.4 对正常大鼠血糖的影响 雄性Wistar大鼠20只，分正常对照组及参芪克糖组(6g/kg)，每日灌胃给药1次，连续给药20天后测血糖值，结果做t检验，见表4。
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表4 复方参芪克糖片对正常大鼠血糖的影响
结果表明，复方参芪克糖片对正常大鼠血糖无明显影响。
2.2 对糖尿病模型小鼠免疫指标的影响 [4]
2.2.1 对小鼠细胞免疫功能的影响 Balb/c小鼠40只，雌雄各半，尾静脉注射四氧嘧啶25mg/kg，出现多饮多尿等糖尿病症状，稳定喂养1周后，随机分为参芪克糖大剂量组(10g/kg)、小剂量组(3g/kg)、降糖舒组(3g/kg)及空白对照组，每日灌胃给药1次，连续给药7天，末次给药0.5h后处死小鼠，取出脾脏，于含20%的小牛血清的RPMI1640液中制得脾细胞悬液，调细胞数为1×10 7 /ml，在96孔培养板上，每孔加入脾细胞悬液0.1ml，然后加入含PHA的RPMI1640液0.1ml(PHA终浓度为150μg/ml)，置37℃，5%CO 2 培养箱培养3天，加入3 H—TdR每孔1μCi，连续培养16h，收集培养细胞于玻璃纤维滤纸上，烘干，放测量杯中，测其CPM值，CPM值越高，脾淋巴细胞转化的越快，掺入的 3 H—TdR越多，结果做t检验，见表5。
, 百拇医药
表5 复方参芪克糖片在PHA刺激下对小鼠T淋巴细胞转化的影响
注:与空白对照组比较， ˇˇ P<0.01
结果表明，复方参芪克糖片有明显的促进PHA刺激的脾淋巴细胞增殖作用(P<0.01)。
2.2.2 对小鼠体液免疫功能的影响 Balb/c小鼠40只，糖尿病造模、分组及给药方法同实验
2.2.1，连续给药7天，给药第三天用2%的新鲜绵羊红细胞(SRBC)腹腔免疫小鼠0.5ml/只，末次给药0.5h后处死小鼠，取脾脏制成单个脾 细胞悬液，以pH7.2的PBS洗2次，调细胞数为2×10 7 /ml，每管加上述脾细胞悬液1ml，0.2%SRBC1ml，1∶30补体1ml，移试管于37℃温育1h，离心取上清液，在波长413nm处测光密度OD值，OD值越高，说明淋巴细胞产生的抗体越多，对红细胞的裂解能力越强，结果做t检验，见表6。
, 百拇医药
表6 复方参芪克糖片对小鼠体液免疫功能的影响
注:与空白对照组比较，ˇˇ P<0.01
结果表明，复方参芪克糖片能明显增加小鼠体液免疫功能(P<0.01)。
2.3 对食物性高血脂大鼠的影响 [4] 雄性Wistar大鼠50只，取空腹血测药前胆固醇(CH)及甘油三酯(TG)，然后开始建高血脂模型。除10只作为正常对照给予普通饲料外，其余均给予高脂饲料(胆固醇2%，猪油5%，丙硫氧嘧啶0.2%)，连续喂饲10天后取血测CH及TG，确定高脂模型建成。模型建成后继续饲高脂饲料，并灌胃给药。参芪克糖片大剂量18g/kg，小剂量9g/kg，肌酸烟酸酯组0.2g/kg，每日给药1次，连续给药20天后再取血测CH及TG，结果做t检验见表7、8。
表7 复方参芪克糖片对食物性高血脂大鼠血清胆固醇的影响
, 百拇医药
注:与高脂组比较， ˇ P<0.05
表8 复方参芪克糖片对食物性高血脂大鼠血清甘油三酯的影响
注:与高脂组比较， ˇ P<0.05
结果表明，复方参芪克糖片18g/kg能明显降低食物性高血脂大鼠血清CH及TG水平(P<0.05)。
3 讨论
糖尿病属于祖国医学“消渴”范畴。消渴之名，首见于《内经》。《灵枢·五变》篇说:“五脏皆柔弱者，善病消瘅。”指出了五脏虚弱是发生消渴的重要因素。其发病多为肾气渐亏、肾阴不足、体内阴液亏虚而发为多饮、多食、多尿、消瘦等三多一少症。由于本病病程长，肾虚日久，临床多表现为气阴两伤，治疗则以补气养阴滋肾为主。以人参、黄芪健脾补气，配枸杞、麦冬滋肝肾阴，加当归补气生血，黄精补中益气，有利于改善多食善饥症状，诸药合用，发挥补气养血滋阴之功。本实验结果表明，复方参芪克糖片对实验性糖尿 病模型的高血糖具有明显的抑制作用，并且对四氧嘧啶性糖尿病小鼠的细胞免疫和体液免疫功能有明显的增强作用，对食物性高血脂大鼠具有明显的降脂作用，提示该药用于临床治疗糖尿病既可发挥降糖作用，又可提高患者机体免疫功能。
, 百拇医药
参考文献
1 徐淑云.药理实验方法学.北京:人民卫生出版社，1991，1047.
2 周序开.葡萄糖氧化酶法测定血糖含量.中华医学检验杂志，1982，5:56.
3 徐淑云.药理实验方法学.北京:人民卫生出版社.1982，987.
4 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社，1993，625，707-708.
作者单位:519020广东珠海国家中药现代化工程技术研究中心
274031山东省菏泽市立医院内分泌科
(编辑秋实), 百拇医药(解荷芝)
关键词 复方参芪克糖片/药效学 实验性糖尿病模型/血糖 食物性高血脂动物模型/甘油三酯和胆固醇 免疫指标
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2003)18-2724-03
复方参芪克糖片是一种新型的抗糖尿病中药复方，由人参、当归、黄芪、枸杞等成分组成，临床上用于治疗糖尿病多年，收到了满意疗效。笔者观察了该药对实验性糖尿病模型血糖及免疫指标的影响，并观察了该药对食物性高血脂大鼠血脂的影响。
, 百拇医药
1 材料
1.1 药物 复方参芪克糖片:自制批号20010412;降糖舒(吉林天泰药业有限责任公司)、四氧嘧啶(Alloxan，ALX，Sigˉma公司);肾上腺素:山东新华制药厂，批号20010508;RPMI1640液，RPMI干粉10.4g，碳酸氢钠2g，丙酮酸钠110mg，L—谷氨酸胺280mg，0.4%酚红0.8ml，青霉素20万U，溶于1000ml重蒸水中;植物血凝素(PHA):广东医药工业研究所;H—TdR:中国科学院上海原子能研究所，批号20010207;胆固醇:上海长征生化制药厂生产;肌酸烟酸酯片:北京第二制药厂生产;丙氧硫嘧啶片:第二军医大学朝晖制药厂生产;胆固醇、甘油三酯试剂盒:东欧生物工程公司提供。
1.2 仪器 ABBOTT—CCX，全自动生化分析仪，美国产;β液闪计数仪，美国产;721分光光度计，上海产。
1.3 实验动物 雄性Wistar大鼠，体重180～220g，雄性昆明种小鼠，体重(20±2)g，由广东省医学实验动物中心提供;Balb/c小鼠，体重(23±1)g，由北京中华人民共和国卫生部药品生物制品鉴定所提供。
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2 方法与结果
2.1 对实验性糖尿病模型血糖的影响
2.1.1 对四氧嘧啶性大鼠高血糖的影响 [1] 雄性Wistar大鼠60只，10只为正常对照组，其余大鼠禁食14h后尾静脉注射四氧嘧啶40mg/kg，注射48h后取空腹血，用葡葡糖氧化酶法 [2] 测定血糖含量，按升高的血糖值分组(血糖值不在17～27mmol/L范围者剔除)，每组10只，分别为四氧嘧啶对照组，复方参芪克糖片大剂量组6g/kg，小剂量组2g/kg，降糖舒组3g/kg，每日灌胃给药1次，正常对照组及四氧嘧啶对照组给予等容积生理盐水(以下试验相同)，连续给药10天，于末次给药1h后取血测血糖值，结果做t检验，见表1。
表1 复方参芪克糖片对四氧嘧啶性高血糖的影响
注:与四氧嘧啶对照组比较， ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01
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结果表明，复方参芪克糖片对大鼠四氧嘧啶性高血糖有明显的抑制作用，P<0.05。
2.1.2 对四氧嘧啶性小鼠高血糖的影响 [3] 雄性昆明种小鼠80只，10只为正常对照，其余小鼠禁食20h后尾静脉注射四氧嘧啶70mg/kg，注射40h后取空腹血测血糖值，按血糖升高值平均分为4组(血糖值不在10～80mmol/L范围 者剔除)，每组13只，分别为四氧嘧啶对照组、参芪克糖大剂量组(13.5g/kg)，小剂量组(4.5g/kg)，降糖舒组(3g/kg)，每日灌胃给药1次，连续给药20天后取血测血糖值，结果做t检验，见表2。
表2 复方参芪克糖片对四氧嘧啶性小鼠高血糖的影响
注:与四氧嘧啶组比较， ˇˇ P<0.01
结果表明，复方参芪克糖片可明显抑制四氧嘧啶性小鼠血糖升高(P<0.01)。
, http://www.100md.com
2.1.3 对肾上腺素性小鼠高血糖的影响 雄性昆明种小鼠按体重平均分为5组，分别为正常对照组，肾上腺素对照组、参芪克糖大剂量组(13.5g/kg)，小剂量组(4.5g/kg)及降糖舒组(3g/kg)，每日灌胃给药1次，连续给药10天，于末次给药1h后，除正常对照组外其余各组小鼠腹腔注射肾上腺素0.2mg/kg，注射1h后取血测血糖值，结果做t检验，见表3。
表3复方参芪克糖片对肾上腺素性小鼠高血糖的影响
注:与肾上腺素对照组比较， ˇˇP<0.01
结果表明，复方参芪克糖片可明显抑制肾上腺素性小鼠血糖升高(P<0.01)。
2.1.4 对正常大鼠血糖的影响 雄性Wistar大鼠20只，分正常对照组及参芪克糖组(6g/kg)，每日灌胃给药1次，连续给药20天后测血糖值，结果做t检验，见表4。
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表4 复方参芪克糖片对正常大鼠血糖的影响
结果表明，复方参芪克糖片对正常大鼠血糖无明显影响。
2.2 对糖尿病模型小鼠免疫指标的影响 [4]
2.2.1 对小鼠细胞免疫功能的影响 Balb/c小鼠40只，雌雄各半，尾静脉注射四氧嘧啶25mg/kg，出现多饮多尿等糖尿病症状，稳定喂养1周后，随机分为参芪克糖大剂量组(10g/kg)、小剂量组(3g/kg)、降糖舒组(3g/kg)及空白对照组，每日灌胃给药1次，连续给药7天，末次给药0.5h后处死小鼠，取出脾脏，于含20%的小牛血清的RPMI1640液中制得脾细胞悬液，调细胞数为1×10 7 /ml，在96孔培养板上，每孔加入脾细胞悬液0.1ml，然后加入含PHA的RPMI1640液0.1ml(PHA终浓度为150μg/ml)，置37℃，5%CO 2 培养箱培养3天，加入3 H—TdR每孔1μCi，连续培养16h，收集培养细胞于玻璃纤维滤纸上，烘干，放测量杯中，测其CPM值，CPM值越高，脾淋巴细胞转化的越快，掺入的 3 H—TdR越多，结果做t检验，见表5。
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表5 复方参芪克糖片在PHA刺激下对小鼠T淋巴细胞转化的影响
注:与空白对照组比较， ˇˇ P<0.01
结果表明，复方参芪克糖片有明显的促进PHA刺激的脾淋巴细胞增殖作用(P<0.01)。
2.2.2 对小鼠体液免疫功能的影响 Balb/c小鼠40只，糖尿病造模、分组及给药方法同实验
2.2.1，连续给药7天，给药第三天用2%的新鲜绵羊红细胞(SRBC)腹腔免疫小鼠0.5ml/只，末次给药0.5h后处死小鼠，取脾脏制成单个脾 细胞悬液，以pH7.2的PBS洗2次，调细胞数为2×10 7 /ml，每管加上述脾细胞悬液1ml，0.2%SRBC1ml，1∶30补体1ml，移试管于37℃温育1h，离心取上清液，在波长413nm处测光密度OD值，OD值越高，说明淋巴细胞产生的抗体越多，对红细胞的裂解能力越强，结果做t检验，见表6。
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表6 复方参芪克糖片对小鼠体液免疫功能的影响
注:与空白对照组比较，ˇˇ P<0.01
结果表明，复方参芪克糖片能明显增加小鼠体液免疫功能(P<0.01)。
2.3 对食物性高血脂大鼠的影响 [4] 雄性Wistar大鼠50只，取空腹血测药前胆固醇(CH)及甘油三酯(TG)，然后开始建高血脂模型。除10只作为正常对照给予普通饲料外，其余均给予高脂饲料(胆固醇2%，猪油5%，丙硫氧嘧啶0.2%)，连续喂饲10天后取血测CH及TG，确定高脂模型建成。模型建成后继续饲高脂饲料，并灌胃给药。参芪克糖片大剂量18g/kg，小剂量9g/kg，肌酸烟酸酯组0.2g/kg，每日给药1次，连续给药20天后再取血测CH及TG，结果做t检验见表7、8。
表7 复方参芪克糖片对食物性高血脂大鼠血清胆固醇的影响
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注:与高脂组比较， ˇ P<0.05
表8 复方参芪克糖片对食物性高血脂大鼠血清甘油三酯的影响
注:与高脂组比较， ˇ P<0.05
结果表明，复方参芪克糖片18g/kg能明显降低食物性高血脂大鼠血清CH及TG水平(P<0.05)。
3 讨论
糖尿病属于祖国医学“消渴”范畴。消渴之名，首见于《内经》。《灵枢·五变》篇说:“五脏皆柔弱者，善病消瘅。”指出了五脏虚弱是发生消渴的重要因素。其发病多为肾气渐亏、肾阴不足、体内阴液亏虚而发为多饮、多食、多尿、消瘦等三多一少症。由于本病病程长，肾虚日久，临床多表现为气阴两伤，治疗则以补气养阴滋肾为主。以人参、黄芪健脾补气，配枸杞、麦冬滋肝肾阴，加当归补气生血，黄精补中益气，有利于改善多食善饥症状，诸药合用，发挥补气养血滋阴之功。本实验结果表明，复方参芪克糖片对实验性糖尿 病模型的高血糖具有明显的抑制作用，并且对四氧嘧啶性糖尿病小鼠的细胞免疫和体液免疫功能有明显的增强作用，对食物性高血脂大鼠具有明显的降脂作用，提示该药用于临床治疗糖尿病既可发挥降糖作用，又可提高患者机体免疫功能。
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参考文献
1 徐淑云.药理实验方法学.北京:人民卫生出版社，1991，1047.
2 周序开.葡萄糖氧化酶法测定血糖含量.中华医学检验杂志，1982，5:56.
3 徐淑云.药理实验方法学.北京:人民卫生出版社.1982，987.
4 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社，1993，625，707-708.
作者单位:519020广东珠海国家中药现代化工程技术研究中心
274031山东省菏泽市立医院内分泌科
(编辑秋实), 百拇医药(解荷芝)