Cloning of Mouse Enamel Matrix Serine Proteinase Encoding Mature Protein
牙胚|小鼠|丝氨酸内肽酰类|逆转录聚合酶链反应|聚合酶链反应|克隆|分子,ClonInGoFMousEEnamElMaTRIXSERInEPRoTEInasEEnCoDInGMaTuREPRoTEIn,关键词：
参见附件(214kb)。
MU Ya bing；SUN Hong chen；ZHANG Ze bing；OUYANG Jie Dept of Pathology School of Stomatology Jilin University Changchun 130041 China 吉林大学学报 2003 6
关键词：牙胚；小鼠；丝氨酸内肽酰类；逆转录聚合酶链反应；聚合酶链反应；克隆；分子
目的:克隆小鼠牙胚组织中釉基质丝氨酸蛋白酶( EMSP1 )成熟肽编码区基因。方法:提取出生后7d昆明种小白鼠切牙、磨牙牙胚总RNA,逆转录为c DNA,设计两对特异性引物,采用Touchdown PCR和嵌套PCR方法,扩增出小鼠EMSP1起始密码子至终止密码子基因片段。将目的基因连入载体p MD- 1 8T,转化入大肠杆菌JM1 0 9,通过蓝白筛选,挑选阳性克隆培养扩增,纯化重组质粒进行限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定。结果:限制性酶切图谱和核苷酸序列分析均表明所克隆c DNA为小鼠70 0 bp的EMSP1成熟肽基因编码。结论:成功地克隆了小鼠编码EMSP1成熟肽基因片段.
关键词：牙胚；小鼠；丝氨酸内肽酰类；逆转录聚合酶链反应；聚合酶链反应；克隆；分子
目的:克隆小鼠牙胚组织中釉基质丝氨酸蛋白酶( EMSP1 )成熟肽编码区基因。方法:提取出生后7d昆明种小白鼠切牙、磨牙牙胚总RNA,逆转录为c DNA,设计两对特异性引物,采用Touchdown PCR和嵌套PCR方法,扩增出小鼠EMSP1起始密码子至终止密码子基因片段。将目的基因连入载体p MD- 1 8T,转化入大肠杆菌JM1 0 9,通过蓝白筛选,挑选阳性克隆培养扩增,纯化重组质粒进行限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定。结果:限制性酶切图谱和核苷酸序列分析均表明所克隆c DNA为小鼠70 0 bp的EMSP1成熟肽基因编码。结论:成功地克隆了小鼠编码EMSP1成熟肽基因片段.
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