2种RT-PCR技术检测肠道病毒RNA的对比研究
逆转录多聚酶链反应|肠道病毒|感染,2种RT-PCR技术检测肠道病毒RNa的对比研究,关键词：
参见附件(23kb)。
秦璞；陈崇波 青岛大学医学院附属医院儿科 青岛266033 临床检验杂志 2004 2
关键词：逆转录多聚酶链反应；肠道病毒；感染
目的 比较2种逆转录多聚酶链反应(RT PCR)技术检测脑脊液中肠道病毒(EV)RNA。方法 设计与肠道病毒基因组保守的5′非编码区同源的引物。方法A :采用AMV逆转录酶和TaqDNA聚合酶,逆转录合成cDNA与PCR在不同缓冲体系中分别完成;方法B :AMV逆转录酶和TflDNA聚合酶同时加入,逆转录与PCR在同一缓冲体系中进行,逆转录后不打开反应管。结果 通过检测不同稀释度的PV1、CVB3和CVB4病毒及无菌性脑膜炎病人CSF中EVRNA ,证明2种方法有相同的敏感性,而方法B在逆转录后不需打开反应管,降低了污染的危险,更便于自动化操作。结论 2种RT PCR技术均是检测EV感染的有效.
关键词：逆转录多聚酶链反应；肠道病毒；感染
目的 比较2种逆转录多聚酶链反应(RT PCR)技术检测脑脊液中肠道病毒(EV)RNA。方法 设计与肠道病毒基因组保守的5′非编码区同源的引物。方法A :采用AMV逆转录酶和TaqDNA聚合酶,逆转录合成cDNA与PCR在不同缓冲体系中分别完成;方法B :AMV逆转录酶和TflDNA聚合酶同时加入,逆转录与PCR在同一缓冲体系中进行,逆转录后不打开反应管。结果 通过检测不同稀释度的PV1、CVB3和CVB4病毒及无菌性脑膜炎病人CSF中EVRNA ,证明2种方法有相同的敏感性,而方法B在逆转录后不需打开反应管,降低了污染的危险,更便于自动化操作。结论 2种RT PCR技术均是检测EV感染的有效.
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