执业药师考试辅导：皂苷--中药化学(二十)
7、皂苷和皂苷元有哪些主要分离方法？
1、皂苷分离
(1)分段沉淀法：将皂苷溶于少量甲醇或乙醇，然后分步加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮混合溶剂，将皂苷分步沉淀出来。
(2)胆甾醇沉淀法：甾体皂苷与胆甾醇可生成难溶性分子复合物，据此分离。①凡有3β-OH，A/B环反式稠合(5α-H)或△δ的平展结构的甾醇，如β-谷甾醇、豆甾醇、胆甾醇和麦角甾醇等，与甾体皂苷形成的分子复合物的溶度积最小。②凡有3α-OH，或3β-OH经酯化或成苷的甾醇，不能与甾体皂苷生成难溶性的分子复合物。③三萜皂苷不能与甾醇形成稳定的分子复合物，据此可实现甾体皂苷和三萜皂苷的分离。
(3)铅盐沉淀法：可用以分离酸性皂苷和中性皂苷。
(4)色谱分离法：
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①吸附色谱法：常用的吸附剂是硅胶、氧化铝和反相硅胶，洗脱剂一般采用混合溶剂。例如分离混合甾体皂苷元的方法，先将样品溶于含2%氯仿的苯中，上柱后用此溶剂洗出单羟基皂苷元，再用含20%氯仿的苯洗出单羟基且具酮基的皂苷元，最后用含10%甲醇的苯洗出双羟基的皂苷元。
②分配色谱法：由于皂苷极性较大，可采用分配色谱法进行分离。一般用低活性的氧化铝或硅胶作吸附剂，用不同比例的氯仿-甲醇-水或其他极性较大的有机溶剂进行梯度洗脱。
③高效液相色谱法：一般使用反相色谱法，以乙腈-水或甲醇-水为流动相分离和纯化皂苷可得到良好的效果。也可将极性较大的皂苷做成衍生物后用正相柱进行分离。
④液滴逆流色谱法
8、甾体皂苷和三萜皂苷有何主要光谱特征？
1、甾体皂苷
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(1)紫外光谱：与硫酸反应后可在270～275nm范围出现最大吸收峰。凡含C-12羰基的甾体皂苷元均有350nm的最大吸收峰。
(2)红外光谱：可用于区别C-25的立体异构体。25D系甾体皂苷有866～863cm-1、899～894cm-1、920～951cm-1及982cm-1四条谱带，其中899～894cm-1处的吸收较920～915cm-1处的强2倍，25L系甾体皂苷在857～852cm-1、899～894cm-1、920～915cm-1及986cm-1
处也有吸收，其中920～915cm-1处的吸收较899～894cm-1 处强3～4倍。
(3)质谱：甾体皂苷元的质谱中均出现一个很强的m/z139的基峰和中等强度的m/z115碎片峰以及一个很弱的m/z126的辅助离子峰。
(4)NMR谱：螺旋甾烷醇类皂苷元的C-22信号大多数情况下出现在δ109.5处。
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2、三萜皂苷
(1)质谱：对于具有(12的三萜皂苷，分子中因具有环乙烯结构，容易发生
RDA 裂解，根据生成的碎片离子峰可以确定A、B环及D、E环上的取代基性质、数目、位置等。
(2)NMR谱：五环三萜齐墩果烷型(β-香树脂醇型)含有6个SP3杂化季碳原子，13CNMR谱中有6个季碳信号，乌索烷型(α-香树脂醇型)13CNMR谱中有5个季碳信号。羽扇豆烷型13CNMR谱中有异丙基信号。
9、人参皂苷可分为哪几类？各有何主要结构特点？
人参皂苷可分为3种类型：人参二醇型(A型)：代表化合物有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd等；人参三醇型(B型)：代表化合物有人参皂苷Re、Rf、Rg1、Rg2等；齐墩果酸型(C型)：代表化合物有人参皂苷Ro。
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A型、B型皂苷的皂苷元属于四环三萜，C型皂苷的皂苷元属于五环三萜。人参皂苷A型、B型皂苷元属达玛烷型，是达玛烷二醇的衍生物，其中C-20的结构为S。A型皂苷元为20(S)-原人参二醇；B型皂苷元为20(S)-原人参三醇。这两种皂苷元的性质均不太稳定，当皂苷用矿酸水解时，C-20构型容易由S型转为R型。继之侧链受热发生环合，环合后生成人参二醇及人参三醇。若将人参总皂苷用7%HCl的乙醇溶液进行酸水解，其酸水解产物用硅胶柱色谱分离，可得到人参二醇、人参三醇和齐墩果酸。
20(S)-原人参二醇分子中有3个羟基，其中C3 -OH，C29-OH可能与糖结合成苷，由于C-20羟基是叔羟基，结合的糖与50%乙酸共热即被水解，而C3-OH与糖形成的苷键必须在较强的酸性条件下才能水解。
10、甘草的主要成分是什么？有何主要理化性质和生物活性？常用提取方法是什么？
甘草主要含有三萜皂苷，其中含量较高的为甘草皂苷，又称甘草酸或甘草甜素，是由皂苷元甘草次酸与2分子葡萄糖醛酸所组成，为甘草的甜味成分。
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甘草皂苷易溶于热稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇或乙醚，但极易溶于稀氨水中。甘草皂苷水溶液有微弱的起泡性及溶血性。甘草皂苷多以钾盐或钙盐形式存在于甘草中。甘草皂苷与5%稀H2SO4在加压下，110~120℃进行水解，生成2分子葡萄糖醛酸及皂苷元——甘草次酸。
甘草皂苷和甘草次酸都具有促肾上腺皮质激素(ACTH)样的生物活性，临床上作为抗炎药使用，并用于治疗胃溃疡。
甘草皂苷常用提取方法为碱溶酸沉法。
11、柴胡和知母的主要成分是什么？有何生物活性？
柴胡：柴胡主要成分为三萜皂苷，其苷元为齐墩果烷衍生物，如柴胡皂苷a、b、c、d等。柴胡总皂苷具有镇静、止痛、镇咳和抗炎作用。
知母：知母中的化学成分主要为甾体皂苷，可分为螺甾烷醇类(如知母皂苷AⅢ和BⅠ等)、异螺甾烷醇类(如知母皂苷Ⅰ)和呋甾烷醇类(如知母皂苷BⅤ等)。其中知母皂苷AⅢ含量最高。知母皂苷可抑制血小板聚集。( 刘 斌 北京中医药大学中药学院), http://www.100md.com
1、皂苷分离
(1)分段沉淀法：将皂苷溶于少量甲醇或乙醇，然后分步加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮混合溶剂，将皂苷分步沉淀出来。
(2)胆甾醇沉淀法：甾体皂苷与胆甾醇可生成难溶性分子复合物，据此分离。①凡有3β-OH，A/B环反式稠合(5α-H)或△δ的平展结构的甾醇，如β-谷甾醇、豆甾醇、胆甾醇和麦角甾醇等，与甾体皂苷形成的分子复合物的溶度积最小。②凡有3α-OH，或3β-OH经酯化或成苷的甾醇，不能与甾体皂苷生成难溶性的分子复合物。③三萜皂苷不能与甾醇形成稳定的分子复合物，据此可实现甾体皂苷和三萜皂苷的分离。
(3)铅盐沉淀法：可用以分离酸性皂苷和中性皂苷。
(4)色谱分离法：
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①吸附色谱法：常用的吸附剂是硅胶、氧化铝和反相硅胶，洗脱剂一般采用混合溶剂。例如分离混合甾体皂苷元的方法，先将样品溶于含2%氯仿的苯中，上柱后用此溶剂洗出单羟基皂苷元，再用含20%氯仿的苯洗出单羟基且具酮基的皂苷元，最后用含10%甲醇的苯洗出双羟基的皂苷元。
②分配色谱法：由于皂苷极性较大，可采用分配色谱法进行分离。一般用低活性的氧化铝或硅胶作吸附剂，用不同比例的氯仿-甲醇-水或其他极性较大的有机溶剂进行梯度洗脱。
③高效液相色谱法：一般使用反相色谱法，以乙腈-水或甲醇-水为流动相分离和纯化皂苷可得到良好的效果。也可将极性较大的皂苷做成衍生物后用正相柱进行分离。
④液滴逆流色谱法
8、甾体皂苷和三萜皂苷有何主要光谱特征？
1、甾体皂苷
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(1)紫外光谱：与硫酸反应后可在270～275nm范围出现最大吸收峰。凡含C-12羰基的甾体皂苷元均有350nm的最大吸收峰。
(2)红外光谱：可用于区别C-25的立体异构体。25D系甾体皂苷有866～863cm-1、899～894cm-1、920～951cm-1及982cm-1四条谱带，其中899～894cm-1处的吸收较920～915cm-1处的强2倍，25L系甾体皂苷在857～852cm-1、899～894cm-1、920～915cm-1及986cm-1
处也有吸收，其中920～915cm-1处的吸收较899～894cm-1 处强3～4倍。
(3)质谱：甾体皂苷元的质谱中均出现一个很强的m/z139的基峰和中等强度的m/z115碎片峰以及一个很弱的m/z126的辅助离子峰。
(4)NMR谱：螺旋甾烷醇类皂苷元的C-22信号大多数情况下出现在δ109.5处。
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2、三萜皂苷
(1)质谱：对于具有(12的三萜皂苷，分子中因具有环乙烯结构，容易发生
RDA 裂解，根据生成的碎片离子峰可以确定A、B环及D、E环上的取代基性质、数目、位置等。
(2)NMR谱：五环三萜齐墩果烷型(β-香树脂醇型)含有6个SP3杂化季碳原子，13CNMR谱中有6个季碳信号，乌索烷型(α-香树脂醇型)13CNMR谱中有5个季碳信号。羽扇豆烷型13CNMR谱中有异丙基信号。
9、人参皂苷可分为哪几类？各有何主要结构特点？
人参皂苷可分为3种类型：人参二醇型(A型)：代表化合物有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd等；人参三醇型(B型)：代表化合物有人参皂苷Re、Rf、Rg1、Rg2等；齐墩果酸型(C型)：代表化合物有人参皂苷Ro。
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A型、B型皂苷的皂苷元属于四环三萜，C型皂苷的皂苷元属于五环三萜。人参皂苷A型、B型皂苷元属达玛烷型，是达玛烷二醇的衍生物，其中C-20的结构为S。A型皂苷元为20(S)-原人参二醇；B型皂苷元为20(S)-原人参三醇。这两种皂苷元的性质均不太稳定，当皂苷用矿酸水解时，C-20构型容易由S型转为R型。继之侧链受热发生环合，环合后生成人参二醇及人参三醇。若将人参总皂苷用7%HCl的乙醇溶液进行酸水解，其酸水解产物用硅胶柱色谱分离，可得到人参二醇、人参三醇和齐墩果酸。
20(S)-原人参二醇分子中有3个羟基，其中C3 -OH，C29-OH可能与糖结合成苷，由于C-20羟基是叔羟基，结合的糖与50%乙酸共热即被水解，而C3-OH与糖形成的苷键必须在较强的酸性条件下才能水解。
10、甘草的主要成分是什么？有何主要理化性质和生物活性？常用提取方法是什么？
甘草主要含有三萜皂苷，其中含量较高的为甘草皂苷，又称甘草酸或甘草甜素，是由皂苷元甘草次酸与2分子葡萄糖醛酸所组成，为甘草的甜味成分。
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甘草皂苷易溶于热稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇或乙醚，但极易溶于稀氨水中。甘草皂苷水溶液有微弱的起泡性及溶血性。甘草皂苷多以钾盐或钙盐形式存在于甘草中。甘草皂苷与5%稀H2SO4在加压下，110~120℃进行水解，生成2分子葡萄糖醛酸及皂苷元——甘草次酸。
甘草皂苷和甘草次酸都具有促肾上腺皮质激素(ACTH)样的生物活性，临床上作为抗炎药使用，并用于治疗胃溃疡。
甘草皂苷常用提取方法为碱溶酸沉法。
11、柴胡和知母的主要成分是什么？有何生物活性？
柴胡：柴胡主要成分为三萜皂苷，其苷元为齐墩果烷衍生物，如柴胡皂苷a、b、c、d等。柴胡总皂苷具有镇静、止痛、镇咳和抗炎作用。
知母：知母中的化学成分主要为甾体皂苷，可分为螺甾烷醇类(如知母皂苷AⅢ和BⅠ等)、异螺甾烷醇类(如知母皂苷Ⅰ)和呋甾烷醇类(如知母皂苷BⅤ等)。其中知母皂苷AⅢ含量最高。知母皂苷可抑制血小板聚集。( 刘 斌 北京中医药大学中药学院), http://www.100md.com