检测颅脑外伤患者vWF，P-选择素，D-二聚体的意义
【摘要】 目的 检测颅脑外伤患者vWF、P-选择素、D-二聚体，反映脑外伤后凝血与止血及纤溶的情况。方法 采用ELISA法检测vWF、D-二聚体和P-选择素，全自动血凝仪检测血浆凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)。结果 颅脑外伤患者vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标术前明显增高，与术后相比差异有显著性(tvWF=2.254，P<0.05，tP-选择素=2.385，P<0.05，tD-D=2.229，P<0.05，)，但术后三项指标与对照组比较差异无显著性(P>0.05);PT、APTT术前与术后比较差异无显著性(P>0.05);GSC评分>8分的患者vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标与GCS评分≤8分时该三项指标相比差异均有显著性(tvWF=2.168，P<0.05，tp选择素=2.432，P<0.05，tD-D=2.012，P<0.05)，而PT、APTT差异无显著性(P>0.05)。结论 实验表明vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标可很好的反映脑外伤后凝血与止血及纤溶的情况，检测较快速缩短了诊治时间，对于及时抢救病人及判断伤情有重要意义。
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关键词 颅脑外伤 vWF P-选择素 D-二聚体 PT APTT
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2004)04-0301-02
The significance of vWF，P-selectin and D-dimer in
mechanical cerebral injury
Pan Yunyan，Zhang Runling，You Chongge
Department of Clinical Laboratory，The Second Affiliated Hospital of Lanzhou Medical College，Lanzhou730030.
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To evaluate the significance of vWF，P-selectin and D-dimer in patients with meˉchanical cerebral injury.Methods The content of vWF，P-selectin and D-dimer were assayed by ELISA.The p
roˉthrombin time(PT)and activated partial thromboplastin time(APTT)were measured with automatic coagulation analˉysis.Results The content of vWF，P-select in and D-dimer increased significantly in peoperative patients compared with post operative patients(tvWF=2.254，Ρ<0.05，tp-selectin=2.385，Ρ<0.05，tD-D=2.229，Ρ<0.05)，but there were no difference between post operative patients and control group(Ρ>0.05);The content of vWF，P-seˉlectin and D-dimer decreased marks in the group GCS≤8(tvWF=2.168，Ρ<0.05，tp-selectin=2.432，Ρ<0.05，tD-D=2.012，Ρ<0.05)，but the PT and APTT had no difference(Ρ>0.05)compared with the group of GCS>8.Conclusion The VWF，P-selectin and D-Dimer are excellent indices for the clot hemostasis and fibrinolysis in patients with mechanical cerebral injury.Because the three indexes can be detected in a short time，that’s very imˉportant to diagnose and cure the patients immediately.
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Key words cerebral injury vWF P-selectin D-dimer PT APTT
临床和实验研究表明，颅脑外伤可造成机体多器官和多系统变化。早在20年前就有人提出颅脑外伤可能激活凝血系统，形成所谓的“高凝状态”学说 [1] 。近年已发现颅脑外伤的高凝状态易引起血栓形成，造成失语、偏瘫等，严重影响患者的生活质量。血栓的形成与血管内皮、凝血、血小板及纤溶系统等密切相关，本文观察颅脑损伤前后血栓形成的患者vWF、P-选择素、D-二聚体的变化规律，寻找血栓形成前即血栓前状态的检测指标，为预防颅脑损伤继发的血栓形成奠定基础。
1 资料与方法
1.1 病例选择 选择急性颅脑外伤患者61例，病人符合下列入选标准:(1)无心肺复苏及休克;(2)无急诊手术史;(3)继往无肝脏、血液系统疾病;(4)无糖尿病;(5)病人均在24h内进行头颅CT检查及X线检查明确为单纯性颅脑损伤。病情危重度用Glasgow昏迷评分(GCS，Glasgow Coma Score)表示。这61例患者中男41例，女20例，平均年龄28.1(2.5～67)岁;GCS评分>8分组16例，GCS评分≤8分组45例。对照组为体检健康，无心脑血管疾病、糖尿病及肝、肾、血液病者20例。
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1.2 方法 采静脉血，分别置于含有1/10体积109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂和EDTA-K2抗凝的硅化管中，3000r/min离心10min，收集上层血浆置于-30℃冰箱保存。采用ELISA法检测vWF、D-二聚体和P-选择素，严格按试剂盒说明书操作。全自动血凝仪检测血浆凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)。
1.3 试剂和仪器 库尔特原装进口试剂和上海太阳生物有限公司提供的进口分装试剂;ACL-200全自动血凝仪、EXL800全自动酶标仪。
1.4 统计学方法 采用t检验。
2 结果
颅脑外伤术前、术后五项指标的变化vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标术前明显增高，与术后相比差异有显著性(tvWF=2.254，Ρ<0.05，tp选择素=2.385，Ρ<0.05，tD-D=2.229，Ρ<0.05，)，但术后三项指标与对照组比较差异无显著性(Ρ>0.05);PT、APTT术前与术后比较差异无显著性(Ρ>0.05)，但颅脑外伤术前、术后S值明显增大， 结果见表1。GSC评分与各指标之间的关系，GSC评分>8分vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标与GCS评分≤8分时该三项指标相比差异均有显著性(tvWF=2.168，Ρ<0.05，tp-选择素=2.432，Ρ<0.05，tD-D=2.012，Ρ<0.05)，而PT、APTT差异无显著性(Ρ>0.05)，结果见表2。
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表1 颅脑外伤术前、术后五项指标的变化 略
表2 GSC评分与各指标之 间的关系 略
3 讨论
vWF是主要由内层细胞合成的一种多聚糖蛋白，它在调节血小板粘附受损的血管内层过程中起关键作用，促进血小板粘附，血栓形成。P-选择素是存在于血小板α颗粒膜上的膜糖蛋白，研究发现它亦存在于巨核细胞和血管内层细胞Weilel-Palade小体膜上 [2] ，具有介导活化血小板或内皮细胞与中性粒细胞及单核细胞粘附的功能，在早期出血和血栓形成中起重要作用 [3] 。D-二聚体是反映纤溶活性的指标，由于脑外伤后凝血与止血的作用，造成纤溶活性代偿性升高，从而使D-二聚体升高。研究表明，D-二聚体是脑损伤病人判断伤情及预后的新指标 [4] 。PT、APTT是凝血功能检测的指标，PT反映外源性凝血活性，APTT反映内源性凝血活性。脑皮层富含组织因子，当发生脑损伤时受损的脑组织释放大量组织因子进入血液循环，组织因子激活Ⅶ因子，从而触发外源性凝血途径;由于颅脑外伤后血管内皮的受损触发内源性凝血途径和血小板的聚集，同时伴纤溶亢进，在这一系列的作用下，就形成了脑血栓的前驱状态，甚至脑血栓的形成。
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本次试验结果表明，颅脑外伤在手术前vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标明显升高，术后三项指标均趋于正常，其意义在于三者的升高预示着激活了凝血系统，形成了高凝状态，术后去除了激活凝血系统的物质，防止继发血栓的形成，阻断了病人的病情因高凝状态的存在而进一步恶化。在临床，颅脑外伤的及时抢救是至关重要的。文献报道，颅脑损伤后凝血系统的异常程度是衡量中枢神经系统损伤程度的可靠指标 [5] 。Tikk等 [6] 发现伤后神志清醒的患者，仅表现为一过性的凝血异常，而昏迷患者凝血异常严重，持续时间长。我们的研究结果与文献报道一致。GCS评分>8分组与GCS评分≤8分组的vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标差异有显著性，GCS评分越低，差异越大。提示凝血、止血及纤溶相关指标的检测是判断颅脑损伤严重程度的可靠依据，同时为临床制定诊疗方案提供理 论依据。
PT、APTT是检测凝血因子的常规指标，在颅脑外伤术前与术后及GCS评分>8分组与GCS评分≤8分组分别比较后发现，这两项指标无显著性变化。这可能与PT、APTT出现异常必须有凝血因子的足够消耗，至少20%～30%以上有关 [7] 。但颅脑损伤后离散度增大，表明该类指标因个体的差异而变化极大，只能在血栓前状态的诊断中作为参考指标。
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颅脑外伤后，可通过监测脑灌注压、脑静脉血氧含量、脑血流量及颅内压监测来判断伤情，但这些检测手段需很长时间才能得出结果，有可能贻误救治病人的最佳时机。本次实验检测的vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标很好的反映了脑外伤后凝血与止血及纤溶的情况，而且这三项指标可在较短的时间内得到结果，缩短了诊治时间，对于及时抢救病人及判断伤情有重要意义。这些指标的及时获得将有助于治疗方案的进一步优化，使患者避免颅脑损伤后继发血栓的形成，保证患者痊愈后的生活质量。
参考文献
1 Van der Sande JJ，Veltkamp JJ，Boekhout-Mussert RJ.Head injury and coagulantion disorders.J Neurosurg，1978，49:357-365.
2 宋玉强，李继锋，韩仲岩.颗粒膜蛋白-140与脑缺血.国外医学·脑血管疾病分册，1997，5(2):78-79.
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3 Geng JG，Bevilacqua MP，Mcore KL，et al.Rapid neutrophil adhesion to activated endothelium mediated by GMP-140.Nature，1990，343:757.
4 王社军，叶伟，赵炎等.D-二聚体—颅脑损伤病人判断伤情及预后的新指标.中国急救医学，2002，22(1):37-38.
5 Ponddag.Disseminated intravascular coagulation relatedto outcome in head injury.Acta Neurochir(Suppl)(Wren)，1979，28:96.
6 Tikk A，Norrmaa LL.Signification of cerebral and systemic disseminated intravascular coagulation in early prognosis of brain Injury.Acta Neuˉrochir(Suppl)(Wren)，1979，28:96.
7 夏志洁.114例急性颅脑损伤病人凝血与抗凝血功能监测及其预后的研究.中国临床神经科学，2001，9(1):70-71.
作者单位: 730030 兰州医学院第二附属医院检验科
(编辑 守中), 百拇医药
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关键词 颅脑外伤 vWF P-选择素 D-二聚体 PT APTT
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2004)04-0301-02
The significance of vWF，P-selectin and D-dimer in
mechanical cerebral injury
Pan Yunyan，Zhang Runling，You Chongge
Department of Clinical Laboratory，The Second Affiliated Hospital of Lanzhou Medical College，Lanzhou730030.
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【Abstract】 Objective To evaluate the significance of vWF，P-selectin and D-dimer in patients with meˉchanical cerebral injury.Methods The content of vWF，P-selectin and D-dimer were assayed by ELISA.The p
roˉthrombin time(PT)and activated partial thromboplastin time(APTT)were measured with automatic coagulation analˉysis.Results The content of vWF，P-select in and D-dimer increased significantly in peoperative patients compared with post operative patients(tvWF=2.254，Ρ<0.05，tp-selectin=2.385，Ρ<0.05，tD-D=2.229，Ρ<0.05)，but there were no difference between post operative patients and control group(Ρ>0.05);The content of vWF，P-seˉlectin and D-dimer decreased marks in the group GCS≤8(tvWF=2.168，Ρ<0.05，tp-selectin=2.432，Ρ<0.05，tD-D=2.012，Ρ<0.05)，but the PT and APTT had no difference(Ρ>0.05)compared with the group of GCS>8.Conclusion The VWF，P-selectin and D-Dimer are excellent indices for the clot hemostasis and fibrinolysis in patients with mechanical cerebral injury.Because the three indexes can be detected in a short time，that’s very imˉportant to diagnose and cure the patients immediately.
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Key words cerebral injury vWF P-selectin D-dimer PT APTT
临床和实验研究表明，颅脑外伤可造成机体多器官和多系统变化。早在20年前就有人提出颅脑外伤可能激活凝血系统，形成所谓的“高凝状态”学说 [1] 。近年已发现颅脑外伤的高凝状态易引起血栓形成，造成失语、偏瘫等，严重影响患者的生活质量。血栓的形成与血管内皮、凝血、血小板及纤溶系统等密切相关，本文观察颅脑损伤前后血栓形成的患者vWF、P-选择素、D-二聚体的变化规律，寻找血栓形成前即血栓前状态的检测指标，为预防颅脑损伤继发的血栓形成奠定基础。
1 资料与方法
1.1 病例选择 选择急性颅脑外伤患者61例，病人符合下列入选标准:(1)无心肺复苏及休克;(2)无急诊手术史;(3)继往无肝脏、血液系统疾病;(4)无糖尿病;(5)病人均在24h内进行头颅CT检查及X线检查明确为单纯性颅脑损伤。病情危重度用Glasgow昏迷评分(GCS，Glasgow Coma Score)表示。这61例患者中男41例，女20例，平均年龄28.1(2.5～67)岁;GCS评分>8分组16例，GCS评分≤8分组45例。对照组为体检健康，无心脑血管疾病、糖尿病及肝、肾、血液病者20例。
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1.2 方法 采静脉血，分别置于含有1/10体积109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂和EDTA-K2抗凝的硅化管中，3000r/min离心10min，收集上层血浆置于-30℃冰箱保存。采用ELISA法检测vWF、D-二聚体和P-选择素，严格按试剂盒说明书操作。全自动血凝仪检测血浆凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)。
1.3 试剂和仪器 库尔特原装进口试剂和上海太阳生物有限公司提供的进口分装试剂;ACL-200全自动血凝仪、EXL800全自动酶标仪。
1.4 统计学方法 采用t检验。
2 结果
颅脑外伤术前、术后五项指标的变化vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标术前明显增高，与术后相比差异有显著性(tvWF=2.254，Ρ<0.05，tp选择素=2.385，Ρ<0.05，tD-D=2.229，Ρ<0.05，)，但术后三项指标与对照组比较差异无显著性(Ρ>0.05);PT、APTT术前与术后比较差异无显著性(Ρ>0.05)，但颅脑外伤术前、术后S值明显增大， 结果见表1。GSC评分与各指标之间的关系，GSC评分>8分vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标与GCS评分≤8分时该三项指标相比差异均有显著性(tvWF=2.168，Ρ<0.05，tp-选择素=2.432，Ρ<0.05，tD-D=2.012，Ρ<0.05)，而PT、APTT差异无显著性(Ρ>0.05)，结果见表2。
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表1 颅脑外伤术前、术后五项指标的变化 略
表2 GSC评分与各指标之 间的关系 略
3 讨论
vWF是主要由内层细胞合成的一种多聚糖蛋白，它在调节血小板粘附受损的血管内层过程中起关键作用，促进血小板粘附，血栓形成。P-选择素是存在于血小板α颗粒膜上的膜糖蛋白，研究发现它亦存在于巨核细胞和血管内层细胞Weilel-Palade小体膜上 [2] ，具有介导活化血小板或内皮细胞与中性粒细胞及单核细胞粘附的功能，在早期出血和血栓形成中起重要作用 [3] 。D-二聚体是反映纤溶活性的指标，由于脑外伤后凝血与止血的作用，造成纤溶活性代偿性升高，从而使D-二聚体升高。研究表明，D-二聚体是脑损伤病人判断伤情及预后的新指标 [4] 。PT、APTT是凝血功能检测的指标，PT反映外源性凝血活性，APTT反映内源性凝血活性。脑皮层富含组织因子，当发生脑损伤时受损的脑组织释放大量组织因子进入血液循环，组织因子激活Ⅶ因子，从而触发外源性凝血途径;由于颅脑外伤后血管内皮的受损触发内源性凝血途径和血小板的聚集，同时伴纤溶亢进，在这一系列的作用下，就形成了脑血栓的前驱状态，甚至脑血栓的形成。
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本次试验结果表明，颅脑外伤在手术前vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标明显升高，术后三项指标均趋于正常，其意义在于三者的升高预示着激活了凝血系统，形成了高凝状态，术后去除了激活凝血系统的物质，防止继发血栓的形成，阻断了病人的病情因高凝状态的存在而进一步恶化。在临床，颅脑外伤的及时抢救是至关重要的。文献报道，颅脑损伤后凝血系统的异常程度是衡量中枢神经系统损伤程度的可靠指标 [5] 。Tikk等 [6] 发现伤后神志清醒的患者，仅表现为一过性的凝血异常，而昏迷患者凝血异常严重，持续时间长。我们的研究结果与文献报道一致。GCS评分>8分组与GCS评分≤8分组的vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标差异有显著性，GCS评分越低，差异越大。提示凝血、止血及纤溶相关指标的检测是判断颅脑损伤严重程度的可靠依据，同时为临床制定诊疗方案提供理 论依据。
PT、APTT是检测凝血因子的常规指标，在颅脑外伤术前与术后及GCS评分>8分组与GCS评分≤8分组分别比较后发现，这两项指标无显著性变化。这可能与PT、APTT出现异常必须有凝血因子的足够消耗，至少20%～30%以上有关 [7] 。但颅脑损伤后离散度增大，表明该类指标因个体的差异而变化极大，只能在血栓前状态的诊断中作为参考指标。
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颅脑外伤后，可通过监测脑灌注压、脑静脉血氧含量、脑血流量及颅内压监测来判断伤情，但这些检测手段需很长时间才能得出结果，有可能贻误救治病人的最佳时机。本次实验检测的vWF、P-选择素、D-二聚体三项指标很好的反映了脑外伤后凝血与止血及纤溶的情况，而且这三项指标可在较短的时间内得到结果，缩短了诊治时间，对于及时抢救病人及判断伤情有重要意义。这些指标的及时获得将有助于治疗方案的进一步优化，使患者避免颅脑损伤后继发血栓的形成，保证患者痊愈后的生活质量。
参考文献
1 Van der Sande JJ，Veltkamp JJ，Boekhout-Mussert RJ.Head injury and coagulantion disorders.J Neurosurg，1978，49:357-365.
2 宋玉强，李继锋，韩仲岩.颗粒膜蛋白-140与脑缺血.国外医学·脑血管疾病分册，1997，5(2):78-79.
, http://www.100md.com
3 Geng JG，Bevilacqua MP，Mcore KL，et al.Rapid neutrophil adhesion to activated endothelium mediated by GMP-140.Nature，1990，343:757.
4 王社军，叶伟，赵炎等.D-二聚体—颅脑损伤病人判断伤情及预后的新指标.中国急救医学，2002，22(1):37-38.
5 Ponddag.Disseminated intravascular coagulation relatedto outcome in head injury.Acta Neurochir(Suppl)(Wren)，1979，28:96.
6 Tikk A，Norrmaa LL.Signification of cerebral and systemic disseminated intravascular coagulation in early prognosis of brain Injury.Acta Neuˉrochir(Suppl)(Wren)，1979，28:96.
7 夏志洁.114例急性颅脑损伤病人凝血与抗凝血功能监测及其预后的研究.中国临床神经科学，2001，9(1):70-71.
作者单位: 730030 兰州医学院第二附属医院检验科
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