纤维细胞生长因子治疗角膜病的疗效比较
【摘要】 目的 探讨国产碱性纤维细胞生长因子治疗角膜病的疗效。方法 用双抗体夹心ELISA法测定98例角膜病患者分组治疗前后血管内皮生长因子(VEGF)含量并比较疗效。结果 98例角膜病患者VEGF含量均高于正常人，治疗前后VEGF含量差异均无显著性;BFGF滴眼治疗各种角膜病78例(不包括对照组)，治愈55例(70.5%)，好转l6例(50.5%)，无效7例(8.9%)，总有效数71例，总有效率91.0%。结论 角膜病时应用联合治疗效果更好。
关键词角膜病 生长因子 治疗
【文献标识码】 A 【文章编号】 1609-6614(2004)07-0580-02
Prelminary observation of treatment for
keratopathy with basic fibroblast growth factor
, 百拇医药
Chen Zilin，Liu Wen
Department of Ophthalmology，the Center Hospital of Huizhou，Guangdong516001.
【Abstract】 Objictive The curative effect were treated with Basic Fibroblast Growth Factor(BFGF).Methods The Vasvalar endothelial growth factor(VEGF)were measured in98cases of keratopathy by ELISA method.Result The contents of VEGFof keratopathy higher than normal control group;The content of VEGF were no difference by before and after treatment;The curative effect of patients were treated with BFGF，55of them were Cured rate(70.5%)and16were Partial rate(20.5%)，overall effctive rate were(91.0%)Conclusion The therapeutic alliance could gotthe better treatment than the single treatment for the patients with keratopathy.
, 百拇医药
Key words keratopathy growth factor treatment
角膜病是主要的致盲眼病之一，近年来虽应用新抗生素及抗病毒剂治疗，仍感棘手。生长因子(Growth Factor)、纤维连接蛋白(Fibronectin)及胶原膜(CollagenCover)对加速角膜组织缺损的修复的研究迅速发展[1～4] 在眼科治疗领域中已呈现出广阔的应用前景。而成纤维细胞生长因子在眼科应用国内尚未见报道，现将我科应用国产碱性成纤维细胞生长因子(Basic Fikroblast Growth Factor，BFGF)治疗各类角膜病的临床初步观察报告如下。
1 资料与方法
1.1 临床病例 随机选择角膜病患者98例，其中男性58例，女性40例;年龄12～72岁，平均年龄43.5岁。在98例患者中点状角膜炎50例(单眼20例，双眼30例)，角膜损伤20例(单眼8例，双眼12例);单疱病毒性角膜炎28例(28眼)，其中树枝状角膜炎18例(18眼)，盘状角膜炎10例(10眼)。起病后至就诊时间最短1天，最长2年。按治疗方法不同将上述病人分成3组:对照组，治疗组和联合治疗组。
, http://www.100md.com
1.2 制剂 碱性成纤维细胞生长因子是暨南大学生物工程研究所和珠海东大集团生物工程公司生化制药厂联合研制的(批准文号:〈91〉国科生字100号，军药临字23号，〈93〉军卫药政字1号)，为1μg/ml的BFGF滴眼液，每支4ml，保存于4℃冰箱中备用。
1.3 VEGF含量检测 采用双抗体夹心ELISA法，浓缩生物素标记二抗，使用前以1∶800酶联稀释液稀释，浓缩辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素以1∶2000用二抗及酶联稀释液稀释。终止反应后，在450nm处测OD值。VEGF浓度与OD450之间呈正比，通过标准曲线求出标本中VEGF的浓度。VEGF试剂均由深圳晶美生物工程有限公司提供。测量仪器为美国BIO-RAD公司提供的Coda酶联分析仪。721分光光度计由北京医疗仪器厂生产。
1.4 治疗方法 50例点状角膜炎分成:治疗组(n=20)单独用BFGF滴眼，每日4～6次;联合组(n=20)用BFGF+0.1%无环鸟苷(ACV)滴眼，每日4～6次;对照组(n=10)用0.1%ACV滴眼，每日4～6次。20例角膜损伤分成:治疗组(n=8)单独用BFGF滴眼每日4～6次;联合组(n=8)BFGF+0.25%氯霉素眼水滴眼每日4～6次;对照组(n=4)用0.25%氯霉素眼水滴眼每日4～6次。18例树枝状角膜炎分成:治疗组(n=7)单独用BFGF滴眼每日4～6次;联合组(n=7)用BFGF+0.1%ACV滴眼，每日4～6次;对照组(n=4)用0.25%氯霉素眼水滴眼每日4～6次。盘状角膜炎10例分成:治疗组(n=4)单独用BFGF滴眼，每日4～6次;联合组(n=4)BFGF+0.1%ACV滴眼合并1%阿托品眼膏散瞳。
, 百拇医药
1.5 疗效评价标准 治愈:自觉症状消失，角膜病灶荧光素染色阴性;好转:经治疗后自觉症状减轻，角膜病灶部分修复，荧光素染色范围缩小;无效:经治疗后自觉症状无改善，角膜病灶范围无缩小。
1.6 统计学方法 VEG测定结果均以(X±s)表示。两组间差异性比较采用t检验，疗效分析用卡方检验。
2 结果
2.1 98例角膜病患者血管内皮生长因子(VEGF)含量均高于正常人(P<0.05)，治疗前后VEGF含量均差异无显著性，结果见表1。
表1 角膜病患者VEGF含量比较(略)
2.2 临床应用国产BFGF滴眼液治疗各种角膜病的观察 治疗组和联合治疗组的疗效明显高于对照组(P<0.05);BFGF滴眼治疗各种角膜病78例(不包括对照组)，治愈55例(70.5%)，好转l6例(20.5%)，无效7例(8.9%)，总有效数71例，总有效率91.0%。结果见表2。
, 百拇医药
表2 治疗组和联合组临床疗效观察 (略)
2.3 98例角膜病患者治疗组，联合组和对照组的治愈天数分别为12.4±3.12天，7.7±4.2天，20±5.4天，联合组治愈天数明显小于治疗组和对照组(P<0.05～0.01)。
3 讨论
成纤维细胞生长因子(FGF)广泛存在于人体和动物的多种正常组织中，是一种生物活性较强韵促分裂原(Mitoˉgen)，实验提示FGF可增强膜的流动及皱褶性，它主要使来源于中胚叶及神经外胚叶细胞的增生，如同表皮生长因子(EGF)一样可使机动蛋白的细胞支架的动力结构起着迅速变化.刺激细胞的DNA，多核糖体及蛋白合成，使细胞发生多形及有丝分裂反应。它能刺激多种细胞包括成纤维细 胞、颗粒细胞、肾上腺皮质细胞、角膜及晶体上皮细胞等分裂增生。具有促进角膜生长和修复角膜损伤的功能 [1] FGF依据其等电点不同分为酸性FGF(AFGF)和碱性FGF(BFGF)。BFGF活性比AFGF大10～100倍，根据报告实验性家兔角膜上皮损伤用BFGF15～20天可以完全修复;对实验性小鼠口腔唇部创伤应用，BFGF创面完全愈合时间为4～5天;并经动物全身应用未发现急性和慢性毒性反应 [2，3] 。根据上述原理我科应用BFGF滴眼液治疗98例角膜病，结果表明，BFGF滴眼治疗各种角膜78例(不包括对照组)，治愈55例(70.5%)，好转l6例(20.5%)，无效7例(8.9%)，总有效数71例，总有效率91.0%;联合组和对照组的治愈天数分别为12.4±3.12天，7.7±4.2天，20±5.4天，联合组治愈天数明显少于治疗组和对照组(P<0.05～0.01)。说明BFGF用药后能促进角膜上皮细胞的再生修复，提高疗效，缩短疗程。还发现在所有出现疗效的病例中，浅层病变较深层病变疗效好，急性炎症较慢性炎症好。VEGF是目前所知最强的内皮细胞选择性促有丝分裂肽和血管生成因子，它可刺激血管内皮细胞增殖及移行，进而刺激VEGF增多而导致新生血管形成 [4，5] 。本文观察角膜病患者VEGF水平，发现疾病组明显高于正常人(P<0.05)，表明角膜病测定VEGF的变化有一定的临床意义。本文结论:BFGF为治疗这些角膜病开辟了新的途径，联合治疗效果更好。
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参考文献
1 张金嵩综述.生长因子与眼科.国外医学·眼科分册，1988，17(3):167.
2 陈有信综述.表皮生长因子及其在眼科的应用.国外医学·眼科分册，1989，B(3):156.
3 周文天译.生长因子及其前景.国外医学·眼科分册.1990，114(3):142.
4 任高英综述.纤维连接蛋白在角膜创伤愈合中的作用.实用眼科杂志，1989，7(11):64.
5 Denis Gospodarowicz.Brain and Pituitary Fibroblast Growth Factors.Hormonal
Proteins and Peptides，1984，12:210.
作者单位:1 516001广东省惠州市中心医院眼科
2 510080广州中山大学眼科中心
(收稿日期:2004-03-04)
(编辑 罗彬), 百拇医药
关键词角膜病 生长因子 治疗
【文献标识码】 A 【文章编号】 1609-6614(2004)07-0580-02
Prelminary observation of treatment for
keratopathy with basic fibroblast growth factor
, 百拇医药
Chen Zilin，Liu Wen
Department of Ophthalmology，the Center Hospital of Huizhou，Guangdong516001.
【Abstract】 Objictive The curative effect were treated with Basic Fibroblast Growth Factor(BFGF).Methods The Vasvalar endothelial growth factor(VEGF)were measured in98cases of keratopathy by ELISA method.Result The contents of VEGFof keratopathy higher than normal control group;The content of VEGF were no difference by before and after treatment;The curative effect of patients were treated with BFGF，55of them were Cured rate(70.5%)and16were Partial rate(20.5%)，overall effctive rate were(91.0%)Conclusion The therapeutic alliance could gotthe better treatment than the single treatment for the patients with keratopathy.
, 百拇医药
Key words keratopathy growth factor treatment
角膜病是主要的致盲眼病之一，近年来虽应用新抗生素及抗病毒剂治疗，仍感棘手。生长因子(Growth Factor)、纤维连接蛋白(Fibronectin)及胶原膜(CollagenCover)对加速角膜组织缺损的修复的研究迅速发展[1～4] 在眼科治疗领域中已呈现出广阔的应用前景。而成纤维细胞生长因子在眼科应用国内尚未见报道，现将我科应用国产碱性成纤维细胞生长因子(Basic Fikroblast Growth Factor，BFGF)治疗各类角膜病的临床初步观察报告如下。
1 资料与方法
1.1 临床病例 随机选择角膜病患者98例，其中男性58例，女性40例;年龄12～72岁，平均年龄43.5岁。在98例患者中点状角膜炎50例(单眼20例，双眼30例)，角膜损伤20例(单眼8例，双眼12例);单疱病毒性角膜炎28例(28眼)，其中树枝状角膜炎18例(18眼)，盘状角膜炎10例(10眼)。起病后至就诊时间最短1天，最长2年。按治疗方法不同将上述病人分成3组:对照组，治疗组和联合治疗组。
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1.2 制剂 碱性成纤维细胞生长因子是暨南大学生物工程研究所和珠海东大集团生物工程公司生化制药厂联合研制的(批准文号:〈91〉国科生字100号，军药临字23号，〈93〉军卫药政字1号)，为1μg/ml的BFGF滴眼液，每支4ml，保存于4℃冰箱中备用。
1.3 VEGF含量检测 采用双抗体夹心ELISA法，浓缩生物素标记二抗，使用前以1∶800酶联稀释液稀释，浓缩辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素以1∶2000用二抗及酶联稀释液稀释。终止反应后，在450nm处测OD值。VEGF浓度与OD450之间呈正比，通过标准曲线求出标本中VEGF的浓度。VEGF试剂均由深圳晶美生物工程有限公司提供。测量仪器为美国BIO-RAD公司提供的Coda酶联分析仪。721分光光度计由北京医疗仪器厂生产。
1.4 治疗方法 50例点状角膜炎分成:治疗组(n=20)单独用BFGF滴眼，每日4～6次;联合组(n=20)用BFGF+0.1%无环鸟苷(ACV)滴眼，每日4～6次;对照组(n=10)用0.1%ACV滴眼，每日4～6次。20例角膜损伤分成:治疗组(n=8)单独用BFGF滴眼每日4～6次;联合组(n=8)BFGF+0.25%氯霉素眼水滴眼每日4～6次;对照组(n=4)用0.25%氯霉素眼水滴眼每日4～6次。18例树枝状角膜炎分成:治疗组(n=7)单独用BFGF滴眼每日4～6次;联合组(n=7)用BFGF+0.1%ACV滴眼，每日4～6次;对照组(n=4)用0.25%氯霉素眼水滴眼每日4～6次。盘状角膜炎10例分成:治疗组(n=4)单独用BFGF滴眼，每日4～6次;联合组(n=4)BFGF+0.1%ACV滴眼合并1%阿托品眼膏散瞳。
, 百拇医药
1.5 疗效评价标准 治愈:自觉症状消失，角膜病灶荧光素染色阴性;好转:经治疗后自觉症状减轻，角膜病灶部分修复，荧光素染色范围缩小;无效:经治疗后自觉症状无改善，角膜病灶范围无缩小。
1.6 统计学方法 VEG测定结果均以(X±s)表示。两组间差异性比较采用t检验，疗效分析用卡方检验。
2 结果
2.1 98例角膜病患者血管内皮生长因子(VEGF)含量均高于正常人(P<0.05)，治疗前后VEGF含量均差异无显著性，结果见表1。
表1 角膜病患者VEGF含量比较(略)
2.2 临床应用国产BFGF滴眼液治疗各种角膜病的观察 治疗组和联合治疗组的疗效明显高于对照组(P<0.05);BFGF滴眼治疗各种角膜病78例(不包括对照组)，治愈55例(70.5%)，好转l6例(20.5%)，无效7例(8.9%)，总有效数71例，总有效率91.0%。结果见表2。
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表2 治疗组和联合组临床疗效观察 (略)
2.3 98例角膜病患者治疗组，联合组和对照组的治愈天数分别为12.4±3.12天，7.7±4.2天，20±5.4天，联合组治愈天数明显小于治疗组和对照组(P<0.05～0.01)。
3 讨论
成纤维细胞生长因子(FGF)广泛存在于人体和动物的多种正常组织中，是一种生物活性较强韵促分裂原(Mitoˉgen)，实验提示FGF可增强膜的流动及皱褶性，它主要使来源于中胚叶及神经外胚叶细胞的增生，如同表皮生长因子(EGF)一样可使机动蛋白的细胞支架的动力结构起着迅速变化.刺激细胞的DNA，多核糖体及蛋白合成，使细胞发生多形及有丝分裂反应。它能刺激多种细胞包括成纤维细 胞、颗粒细胞、肾上腺皮质细胞、角膜及晶体上皮细胞等分裂增生。具有促进角膜生长和修复角膜损伤的功能 [1] FGF依据其等电点不同分为酸性FGF(AFGF)和碱性FGF(BFGF)。BFGF活性比AFGF大10～100倍，根据报告实验性家兔角膜上皮损伤用BFGF15～20天可以完全修复;对实验性小鼠口腔唇部创伤应用，BFGF创面完全愈合时间为4～5天;并经动物全身应用未发现急性和慢性毒性反应 [2，3] 。根据上述原理我科应用BFGF滴眼液治疗98例角膜病，结果表明，BFGF滴眼治疗各种角膜78例(不包括对照组)，治愈55例(70.5%)，好转l6例(20.5%)，无效7例(8.9%)，总有效数71例，总有效率91.0%;联合组和对照组的治愈天数分别为12.4±3.12天，7.7±4.2天，20±5.4天，联合组治愈天数明显少于治疗组和对照组(P<0.05～0.01)。说明BFGF用药后能促进角膜上皮细胞的再生修复，提高疗效，缩短疗程。还发现在所有出现疗效的病例中，浅层病变较深层病变疗效好，急性炎症较慢性炎症好。VEGF是目前所知最强的内皮细胞选择性促有丝分裂肽和血管生成因子，它可刺激血管内皮细胞增殖及移行，进而刺激VEGF增多而导致新生血管形成 [4，5] 。本文观察角膜病患者VEGF水平，发现疾病组明显高于正常人(P<0.05)，表明角膜病测定VEGF的变化有一定的临床意义。本文结论:BFGF为治疗这些角膜病开辟了新的途径，联合治疗效果更好。
, http://www.100md.com
参考文献
1 张金嵩综述.生长因子与眼科.国外医学·眼科分册，1988，17(3):167.
2 陈有信综述.表皮生长因子及其在眼科的应用.国外医学·眼科分册，1989，B(3):156.
3 周文天译.生长因子及其前景.国外医学·眼科分册.1990，114(3):142.
4 任高英综述.纤维连接蛋白在角膜创伤愈合中的作用.实用眼科杂志，1989，7(11):64.
5 Denis Gospodarowicz.Brain and Pituitary Fibroblast Growth Factors.Hormonal
Proteins and Peptides，1984，12:210.
作者单位:1 516001广东省惠州市中心医院眼科
2 510080广州中山大学眼科中心
(收稿日期:2004-03-04)
(编辑 罗彬), 百拇医药