四种尿酸酶试剂的实验研究
【摘要】 目的 了解不同厂家四种尿酸酶试剂即长征公司尿酸干粉单试剂、上海科华公司尿酸液体双试剂、上海申能公司尿酸液体双试剂、北京利德曼公司液体尿酸双试剂的临床应用质量。方法 对不同厂家尿酸试剂的精密度、线性、回收试验、干扰试验的比较以及试剂稳定性的观察。结果 表明液体双试剂优于干粉单试剂。对含抗坏血酸氧化酶的试剂，当血清中维生素C浓度小于17mg/L时测尿酸值不受干扰。结论 液体抗坏血酸氧化酶试剂质量及稳定性更好能保证检验质量。
关键词 尿酸 液体双试剂 酶比色法 抗坏血酸氧化酶。
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2004)07-0597-02
Experimental research on four kinds of uricase reagents
Qiu Lianzhuo，Wu Jiaoren
, http://www.100md.com
The Central Hospital of Chaozhou，Guangdong521000.
【Abstract】 Objective To analyse the clinical application quality of four kinds of uricase reagents:dry simple reagent of Changzheng company;liquid double reagent of Shanghai Kehua;liquid double reagent of Shanhai Shennergy-Diasys;liquid double reagent of Beijin Leadman.Methods By the contrast for precision，line scope，recovery exˉperiment，the interference experiments of four kinds of uricase reagents of different factory houses and observation for the stability of the uricase reagents，finally，we can conclude that the liquid double reagent is better than dry single reagent.Results When the concentration of vitC in blood serum is smaller than17mg/L and the reagents contain the value of uric acid didn’tsuffer the interference.Conclusion Only choose good reagent to guarantee the quantity of test.
, 百拇医药
Key words uric acid liquid double reagent chromatometry of enzymeoxidase of ascorbic acid
尿酸是核酸中的嘌呤分解代谢的最终产物，由肾脏排泄，随尿液排出体外。肾脏疾患引起肾功能衰竭、代谢异常，如痛风致体内核酸分解代谢过盛时引起血尿酸增高。此外导致血液中尿酸升高的原因还有:排泄功能下降的肾脏疾病等优点。饥饿、药物滥用、过度饮酒和某些药物的使用，高尿酸水平也是冠心病的间接危险原因之一。
目前，血清尿酸测定各临床实验室普遍采用了酶比色法。用自动生化分析仪作酶学方法的分析 [1] ，具有微量、快捷、准确。近些年来适应酶学方法的试剂也渐增，为了保证检验质量，我们对上海长征科学有限公司的尿酸酶法(干粉)单一试剂和上海实业科华生物技术有限公司尿酸酶法液体双试剂上海申能———德赛诊断技术有限公司尿酸酶法 液体双试剂(含抗坏血酸氧化酶)以及北京利德曼生物技术有限公司尿酸酶比色法液体双试剂(含抗坏血酸氧化酶)作了实验比较 [2] ，报告如下。
, http://www.100md.com
1 材料与方法
1.1 酶试剂 上海长征医学科学有限公司尿酸干粉单一试剂，用前加水溶解。上海实业科华生物技术有限公司生产的尿酸液体双试剂。上海申能———德赛诊断有限公司尿酸液体双试剂。北京利德曼生物技术有限公司尿酸液体双试剂。
1.2 标准液 含尿酸357μmol/L。
1.3 仪器 日立7060自动生化分析仪。
1.4 方法 按下面参数设置上机见表1。
表1 四种尿酸试剂上机参数略
同等反应条件，利德曼样品量、试剂量最少。
2 实验结果
, 百拇医药 2.1 线性测定 用测得值为1320μmol/L的血尿酸样本稀释液成1/2、1/3、1/4、1/5;用四种试剂测定结果见表2。可见用液体双试剂测得的线性结果很好。
表2 同一样品线性测定结果 (略)
2.2 精密度测定 取同一血清，用同一标准液定标后，各平行测定20次，长征公司试剂测定结果ˉx369μmol/L，s6.8μmol/L，CV1.84%;科华公司X372μmol/L，s3.1μmol/L，CV8.3%;申能公司试剂测定结果ˉx375.2μmol/L，s2.9μmol/L，CV0.77%;利德曼公司试剂测定结果ˉx378.6，s1.788μmol/L，CV0.47%，利德曼公司试剂所测得的精密度优于其他。
2.3 回收试验 用定值为458μmol/L的贝克曼质控血清等量与不同浓度的血清混合，混匀后测得结果:长征试剂测得的回收率为104.6%、科华试剂测得的回收率为103.4%、申能试剂的回收率为102%、利德曼试剂的回收率为99.8%。
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2.4 干扰试验 以上四种尿酸酶试剂，经实验可知，血红蛋白3g/L以内无干扰，超过了3g/L，所测结果偏低，血清总胆红素171μmol/L以内不出现干扰，乳糜血清甘油三酯5mmol/L以内无干扰，超过5mmol/L以上使测定结果偏高。而对维生素C的干扰，长征、科华试剂当血清含量10mg/L以上情况下有干扰，使测定值降低。申能试剂当血清维生素C浓度>17mg/L有干扰，使测得值降低，>120mg/L时出现负干扰。利德曼试剂当血清中维生素C>20mg/L时有干扰，使测得值降低，>120mg/L时出现负干扰。
2.5 试剂稳定性的观察 每天用上海长征公司含量357μmol/L的尿酸标准定标，共测19次(每天1次)，用长征试剂测得的吸光度自0.08～0.28不等。科华试剂自0.08～0.12不等。而申能及利德曼试剂，每天用DADE EX1-0312-R质控血清监测(质控值为264μmol/L)连续4个月，测定结果稳定。申能试剂测定结果ˉx263.5μmol/L，s4.78μmol/L，CV1.81%，利德曼试剂测定结果ˉx262.2μmol/L，s4.7μmol/L，CV1.79%。
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2.6 正常参考值的探讨 (1)长征公司试剂报告期望值:男性:210～430μmol/L，女性:150～370μmol/L;(2)科华公司试剂报告期望值:男性:202～416μmol/L，女性:142～339μmol/L;(3)上海申能公司试剂报告期望值:男性:214～488μmol/L，女性:137～163μmol/L;(4)利德曼公司试剂报告期望值:男性:202～416μmol/L，女性:142～339μmol/L。根据最近正常人群(年龄25～55岁)的体检资料统计200例，血尿酸测定结果超过430μmol/L，占34%。另据本室对78例痛风病人测得的尿酸含量平均为496μmol/L，因此，我们认为男性尿酸430μmol/L以下可视为95%的正常可信限度，大于480μmol/L可作为临床诊治痛风的界限。
3 讨论
随着自动生化分析仪的应用和发展，各个厂家都推出了测定血清尿酸的试剂，我们通过线性、精密度、回收试验、干扰试验、试剂稳定性的观察。认为:液体双试剂优于干粉单试剂，含抗坏血酸氧化酶的试剂在某种意见上优于不含抗坏血酸氧化酶的试剂。另外，因尿酸受食物影响较大，特别是嘌呤类食物，南方饮食习惯不同于其他地方，随着生活水平和饮食质量的提高，不同地区的正常参考范围可略有不同。
参考文献
1 韩志钧，郭兑山，梁春兰.临床化学常用项目自动分析法.第二版.沈阳:辽宁科学技术出版社，1995，243-248.
2 蔡贵民，李义龙，韩冰，等.几种血清尿酸测定方法的评价.中华医学检验杂志，1986，9:71.
作者单位:521000广东省潮州市中心医院
(编辑 海涛), http://www.100md.com
关键词 尿酸 液体双试剂 酶比色法 抗坏血酸氧化酶。
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2004)07-0597-02
Experimental research on four kinds of uricase reagents
Qiu Lianzhuo，Wu Jiaoren
, http://www.100md.com
The Central Hospital of Chaozhou，Guangdong521000.
【Abstract】 Objective To analyse the clinical application quality of four kinds of uricase reagents:dry simple reagent of Changzheng company;liquid double reagent of Shanghai Kehua;liquid double reagent of Shanhai Shennergy-Diasys;liquid double reagent of Beijin Leadman.Methods By the contrast for precision，line scope，recovery exˉperiment，the interference experiments of four kinds of uricase reagents of different factory houses and observation for the stability of the uricase reagents，finally，we can conclude that the liquid double reagent is better than dry single reagent.Results When the concentration of vitC in blood serum is smaller than17mg/L and the reagents contain the value of uric acid didn’tsuffer the interference.Conclusion Only choose good reagent to guarantee the quantity of test.
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Key words uric acid liquid double reagent chromatometry of enzymeoxidase of ascorbic acid
尿酸是核酸中的嘌呤分解代谢的最终产物，由肾脏排泄，随尿液排出体外。肾脏疾患引起肾功能衰竭、代谢异常，如痛风致体内核酸分解代谢过盛时引起血尿酸增高。此外导致血液中尿酸升高的原因还有:排泄功能下降的肾脏疾病等优点。饥饿、药物滥用、过度饮酒和某些药物的使用，高尿酸水平也是冠心病的间接危险原因之一。
目前，血清尿酸测定各临床实验室普遍采用了酶比色法。用自动生化分析仪作酶学方法的分析 [1] ，具有微量、快捷、准确。近些年来适应酶学方法的试剂也渐增，为了保证检验质量，我们对上海长征科学有限公司的尿酸酶法(干粉)单一试剂和上海实业科华生物技术有限公司尿酸酶法液体双试剂上海申能———德赛诊断技术有限公司尿酸酶法 液体双试剂(含抗坏血酸氧化酶)以及北京利德曼生物技术有限公司尿酸酶比色法液体双试剂(含抗坏血酸氧化酶)作了实验比较 [2] ，报告如下。
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1 材料与方法
1.1 酶试剂 上海长征医学科学有限公司尿酸干粉单一试剂，用前加水溶解。上海实业科华生物技术有限公司生产的尿酸液体双试剂。上海申能———德赛诊断有限公司尿酸液体双试剂。北京利德曼生物技术有限公司尿酸液体双试剂。
1.2 标准液 含尿酸357μmol/L。
1.3 仪器 日立7060自动生化分析仪。
1.4 方法 按下面参数设置上机见表1。
表1 四种尿酸试剂上机参数略
同等反应条件，利德曼样品量、试剂量最少。
2 实验结果
, 百拇医药 2.1 线性测定 用测得值为1320μmol/L的血尿酸样本稀释液成1/2、1/3、1/4、1/5;用四种试剂测定结果见表2。可见用液体双试剂测得的线性结果很好。
表2 同一样品线性测定结果 (略)
2.2 精密度测定 取同一血清，用同一标准液定标后，各平行测定20次，长征公司试剂测定结果ˉx369μmol/L，s6.8μmol/L，CV1.84%;科华公司X372μmol/L，s3.1μmol/L，CV8.3%;申能公司试剂测定结果ˉx375.2μmol/L，s2.9μmol/L，CV0.77%;利德曼公司试剂测定结果ˉx378.6，s1.788μmol/L，CV0.47%，利德曼公司试剂所测得的精密度优于其他。
2.3 回收试验 用定值为458μmol/L的贝克曼质控血清等量与不同浓度的血清混合，混匀后测得结果:长征试剂测得的回收率为104.6%、科华试剂测得的回收率为103.4%、申能试剂的回收率为102%、利德曼试剂的回收率为99.8%。
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2.4 干扰试验 以上四种尿酸酶试剂，经实验可知，血红蛋白3g/L以内无干扰，超过了3g/L，所测结果偏低，血清总胆红素171μmol/L以内不出现干扰，乳糜血清甘油三酯5mmol/L以内无干扰，超过5mmol/L以上使测定结果偏高。而对维生素C的干扰，长征、科华试剂当血清含量10mg/L以上情况下有干扰，使测定值降低。申能试剂当血清维生素C浓度>17mg/L有干扰，使测得值降低，>120mg/L时出现负干扰。利德曼试剂当血清中维生素C>20mg/L时有干扰，使测得值降低，>120mg/L时出现负干扰。
2.5 试剂稳定性的观察 每天用上海长征公司含量357μmol/L的尿酸标准定标，共测19次(每天1次)，用长征试剂测得的吸光度自0.08～0.28不等。科华试剂自0.08～0.12不等。而申能及利德曼试剂，每天用DADE EX1-0312-R质控血清监测(质控值为264μmol/L)连续4个月，测定结果稳定。申能试剂测定结果ˉx263.5μmol/L，s4.78μmol/L，CV1.81%，利德曼试剂测定结果ˉx262.2μmol/L，s4.7μmol/L，CV1.79%。
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2.6 正常参考值的探讨 (1)长征公司试剂报告期望值:男性:210～430μmol/L，女性:150～370μmol/L;(2)科华公司试剂报告期望值:男性:202～416μmol/L，女性:142～339μmol/L;(3)上海申能公司试剂报告期望值:男性:214～488μmol/L，女性:137～163μmol/L;(4)利德曼公司试剂报告期望值:男性:202～416μmol/L，女性:142～339μmol/L。根据最近正常人群(年龄25～55岁)的体检资料统计200例，血尿酸测定结果超过430μmol/L，占34%。另据本室对78例痛风病人测得的尿酸含量平均为496μmol/L，因此，我们认为男性尿酸430μmol/L以下可视为95%的正常可信限度，大于480μmol/L可作为临床诊治痛风的界限。
3 讨论
随着自动生化分析仪的应用和发展，各个厂家都推出了测定血清尿酸的试剂，我们通过线性、精密度、回收试验、干扰试验、试剂稳定性的观察。认为:液体双试剂优于干粉单试剂，含抗坏血酸氧化酶的试剂在某种意见上优于不含抗坏血酸氧化酶的试剂。另外，因尿酸受食物影响较大，特别是嘌呤类食物，南方饮食习惯不同于其他地方，随着生活水平和饮食质量的提高，不同地区的正常参考范围可略有不同。
参考文献
1 韩志钧，郭兑山，梁春兰.临床化学常用项目自动分析法.第二版.沈阳:辽宁科学技术出版社，1995，243-248.
2 蔡贵民，李义龙，韩冰，等.几种血清尿酸测定方法的评价.中华医学检验杂志，1986，9:71.
作者单位:521000广东省潮州市中心医院
(编辑 海涛), http://www.100md.com