几种检测粪便隐血方法的比较
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2004)08-0740-01
隐血试验(Occult blood test OB-T)是临床诊断消化道出血检查中一项重要项目,也是普查筛选上消化道肿瘤的一个有效手段。本文分别用胶体金隐血试纸 [1] 、邻联甲苯胺法、隐血试纸3种方法检测不同的样本,结果为胶体金免疫方法简便、快速,敏感度和特异性强,但受到高浓度Hb及标本pH值的影响;邻联甲苯胺法、隐血试纸法存在假阳性且易受各种因素影响,但不受到高浓度Hb及标本pH值的影响。现详细比较如下。
1 材料与方法
1.1 材料 胶体金隐血试纸条,美国万华牌(W.H.);一步法便隐血试纸条(简称WH试纸,每盒皆有国家抽检合格证书);尿便隐血试纸优利特10A(四甲基联苯胺法,桂林医疗仪器厂,批号20031103)及邻联甲苯胺法隐血试剂,均严格按说明书操作 [2] 。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 灵敏度的测试 用蒸馏水将正常人粪便稀释,加入纯化的血红蛋白质控品(自制),制成不同系列浓度,然后用胶体金隐血试纸条,隐血试纸,邻联甲苯胺法分别测定含不同浓度Hb的粪便稀释液。
1.2.2 特异性的测定 收集鸡、牛、羊、猪、兔、狗的血制成500μg/ml的Hb溶液,分别用3种方法测定。
1.2.3 pH值对实验的影响 以0.1mmol/L HCL,0.1mmol/L NaOH配成pH值0~14系列空白及加入适量Hb(120)μg/ml的溶液分别以3种方法测定。
1.2.4 干扰实验
1.2.4.1 Vit C的干扰 在含200μg/ml Hb的粪便悬液中加入不同浓度Vit C,分别以3种方法测定。
, 百拇医药
1.2.4.2 辣根过氧化物酶(POD)的干扰 正常粪便加入200μg/ml的POD,分别以三种方法测定。
1.2.4.3 三种方法测定 选择食用动物肉类、血、肝脏、叶绿素、铁剂、服中药者的大便,分别以3种方法测定。
2 结果
2.1 灵敏度 3种方法适宜检测Hb的浓度范围:胶体金试纸为0.15μg/ml~2000μg/ml,当出现柏油便Hb>2000μg/ml时须充分稀释(50~100)便样后再测;隐血试纸为>0.25μg/ml,邻联甲苯胺法为>2μg/ml,以胶体金方法检测灵敏度较高。
2.2 特异性 隐血试纸、邻联甲苯胺法检测各种动物血液隐血均为阳性;胶体金法结果为阴性,此法不受异种动物Hb的影响,特异性较高。
2.3 pH值影响 胶体金方法测隐血最适pH值约为绝大多人粪便的pH值为3~10,当pH值>10或<3时测定结果受影响;隐血试纸,邻联甲苯胺法不受其影响。
, http://www.100md.com
2.3.1 维生素C干扰 当维生素C浓度达到5mg/ml时,隐血试纸,邻联甲苯胺法测试呈现不同程度的假阴性结果;胶体金方法在维生素C浓度达到60mg/ml时,不受其影响。
2.3.2 POD的干扰 隐血试纸、邻联甲苯胺法呈阳性反应;胶体金方法阴性,不受POD的干扰。
2.3.3 饮食影响 隐血试纸,邻联甲苯胺法不同程度受到饮食的影响;而胶体金法不受其影响。
3 讨论
便隐血实验常用的几种方法中,以胶体金免疫方法测定隐血简单、迅速,且有较高的灵敏性和特异性,不受饮食和药物的干扰,但象其它检测方法一样,这种方法也有它的不足,比如对高Hb的柏油便,必须充分稀释后再测;正常人可能由于某些药物(阿司匹林等)刺激胃肠道引起隐血假阳性之类。我们要充分了解各种实验的特点,避其弱项,联合应用,不能武断的肯定或否定某种临床诊断试验。
参考文献
1 寇丽筠,陈宏础,丛玉隆,等.临床基础检验学.第二版.北京:人民卫生出版社,1999,144.
2 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997,142-143.
作者单位:102413北京核工业北京401医院检验科
(编辑维 兰), 百拇医药
隐血试验(Occult blood test OB-T)是临床诊断消化道出血检查中一项重要项目,也是普查筛选上消化道肿瘤的一个有效手段。本文分别用胶体金隐血试纸 [1] 、邻联甲苯胺法、隐血试纸3种方法检测不同的样本,结果为胶体金免疫方法简便、快速,敏感度和特异性强,但受到高浓度Hb及标本pH值的影响;邻联甲苯胺法、隐血试纸法存在假阳性且易受各种因素影响,但不受到高浓度Hb及标本pH值的影响。现详细比较如下。
1 材料与方法
1.1 材料 胶体金隐血试纸条,美国万华牌(W.H.);一步法便隐血试纸条(简称WH试纸,每盒皆有国家抽检合格证书);尿便隐血试纸优利特10A(四甲基联苯胺法,桂林医疗仪器厂,批号20031103)及邻联甲苯胺法隐血试剂,均严格按说明书操作 [2] 。
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1.2 方法
1.2.1 灵敏度的测试 用蒸馏水将正常人粪便稀释,加入纯化的血红蛋白质控品(自制),制成不同系列浓度,然后用胶体金隐血试纸条,隐血试纸,邻联甲苯胺法分别测定含不同浓度Hb的粪便稀释液。
1.2.2 特异性的测定 收集鸡、牛、羊、猪、兔、狗的血制成500μg/ml的Hb溶液,分别用3种方法测定。
1.2.3 pH值对实验的影响 以0.1mmol/L HCL,0.1mmol/L NaOH配成pH值0~14系列空白及加入适量Hb(120)μg/ml的溶液分别以3种方法测定。
1.2.4 干扰实验
1.2.4.1 Vit C的干扰 在含200μg/ml Hb的粪便悬液中加入不同浓度Vit C,分别以3种方法测定。
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1.2.4.2 辣根过氧化物酶(POD)的干扰 正常粪便加入200μg/ml的POD,分别以三种方法测定。
1.2.4.3 三种方法测定 选择食用动物肉类、血、肝脏、叶绿素、铁剂、服中药者的大便,分别以3种方法测定。
2 结果
2.1 灵敏度 3种方法适宜检测Hb的浓度范围:胶体金试纸为0.15μg/ml~2000μg/ml,当出现柏油便Hb>2000μg/ml时须充分稀释(50~100)便样后再测;隐血试纸为>0.25μg/ml,邻联甲苯胺法为>2μg/ml,以胶体金方法检测灵敏度较高。
2.2 特异性 隐血试纸、邻联甲苯胺法检测各种动物血液隐血均为阳性;胶体金法结果为阴性,此法不受异种动物Hb的影响,特异性较高。
2.3 pH值影响 胶体金方法测隐血最适pH值约为绝大多人粪便的pH值为3~10,当pH值>10或<3时测定结果受影响;隐血试纸,邻联甲苯胺法不受其影响。
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2.3.1 维生素C干扰 当维生素C浓度达到5mg/ml时,隐血试纸,邻联甲苯胺法测试呈现不同程度的假阴性结果;胶体金方法在维生素C浓度达到60mg/ml时,不受其影响。
2.3.2 POD的干扰 隐血试纸、邻联甲苯胺法呈阳性反应;胶体金方法阴性,不受POD的干扰。
2.3.3 饮食影响 隐血试纸,邻联甲苯胺法不同程度受到饮食的影响;而胶体金法不受其影响。
3 讨论
便隐血实验常用的几种方法中,以胶体金免疫方法测定隐血简单、迅速,且有较高的灵敏性和特异性,不受饮食和药物的干扰,但象其它检测方法一样,这种方法也有它的不足,比如对高Hb的柏油便,必须充分稀释后再测;正常人可能由于某些药物(阿司匹林等)刺激胃肠道引起隐血假阳性之类。我们要充分了解各种实验的特点,避其弱项,联合应用,不能武断的肯定或否定某种临床诊断试验。
参考文献
1 寇丽筠,陈宏础,丛玉隆,等.临床基础检验学.第二版.北京:人民卫生出版社,1999,144.
2 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997,142-143.
作者单位:102413北京核工业北京401医院检验科
(编辑维 兰), 百拇医药