鼠红细胞代替绵羊红细胞测定补体总量方法的建立(摘 要)
作者:吴砂 朱平 黄益玲 刘志权 刘朝奇 韩莉 张昌菊
单位:吴砂(湖北三峡学院医学院临床医学系96级03班 宜昌 443003);朱平(临床医学系96级01班);黄益玲(湖北三峡学院医学院临床医学系96级03班 宜昌 443003);刘志权(临床医学系96级02班);刘朝奇 韩莉 张昌菊(免疫学教研室)
关键词:
实用医学进修杂志00zj32
目的:探讨鼠红细胞代替绵羊红细胞,测定补体总量的方法。方法:①兔抗鼠抗体制备:25%鼠红细胞悬液多次注射家兔,使之产生免疫反应,取兔血清后56℃1h灭活其中补体,仅剩抗体,再以1∶1500,1∶3000稀释待用;②补体制备:豚鼠血清加以1×PBS稀释液对倍稀释为1∶2,1∶4,1∶8,1∶16,1∶32,1∶64,1∶128,1∶256;③50%标准管:3%鼠红细胞1ml高速离心后去上清,加入0.5ml蒸馏水,再加入1.7%NaCl溶液0.5ml混匀后再加入3%鼠红细胞1ml,置于4℃24h,取0.2ml加入1×PBS0.4ml;④将稀释豚鼠血清、兔血清、3%鼠红细胞各0.2ml混匀,37℃水浴1h,取出置于4℃24h后,高速离心,取200μl以酶标仪测定光吸收度(OD)值。结果:①1∶3000稀释兔血清与不同稀释度的豚鼠血清反应后,OD值测定有良好的线性关系,说明反应灵敏;②豚鼠血清在1∶4~1∶32均反应灵敏,尤以1∶8稀释为佳。结论:①以鼠红细胞代替绵羊红细胞,取材方便,灵敏度高,易在基层医院推广使用;②用于酶标仪检测时,所需标本量少,操作简单,结果客观准确。
[本文摘自卫生事业管理与临床研究(下册).北京:中国人口出版社,1999:575~577], http://www.100md.com
单位:吴砂(湖北三峡学院医学院临床医学系96级03班 宜昌 443003);朱平(临床医学系96级01班);黄益玲(湖北三峡学院医学院临床医学系96级03班 宜昌 443003);刘志权(临床医学系96级02班);刘朝奇 韩莉 张昌菊(免疫学教研室)
关键词:
实用医学进修杂志00zj32
目的:探讨鼠红细胞代替绵羊红细胞,测定补体总量的方法。方法:①兔抗鼠抗体制备:25%鼠红细胞悬液多次注射家兔,使之产生免疫反应,取兔血清后56℃1h灭活其中补体,仅剩抗体,再以1∶1500,1∶3000稀释待用;②补体制备:豚鼠血清加以1×PBS稀释液对倍稀释为1∶2,1∶4,1∶8,1∶16,1∶32,1∶64,1∶128,1∶256;③50%标准管:3%鼠红细胞1ml高速离心后去上清,加入0.5ml蒸馏水,再加入1.7%NaCl溶液0.5ml混匀后再加入3%鼠红细胞1ml,置于4℃24h,取0.2ml加入1×PBS0.4ml;④将稀释豚鼠血清、兔血清、3%鼠红细胞各0.2ml混匀,37℃水浴1h,取出置于4℃24h后,高速离心,取200μl以酶标仪测定光吸收度(OD)值。结果:①1∶3000稀释兔血清与不同稀释度的豚鼠血清反应后,OD值测定有良好的线性关系,说明反应灵敏;②豚鼠血清在1∶4~1∶32均反应灵敏,尤以1∶8稀释为佳。结论:①以鼠红细胞代替绵羊红细胞,取材方便,灵敏度高,易在基层医院推广使用;②用于酶标仪检测时,所需标本量少,操作简单,结果客观准确。
[本文摘自卫生事业管理与临床研究(下册).北京:中国人口出版社,1999:575~577], http://www.100md.com