血浆ADAMTS13活性及抑制物检测有助于诊断TTP
苏州大学附属第一医院江苏省血液病研究所阮长耿等采用该所改良的残留胶原结合实验 (R-CBA)法，检测近年诊断的血栓性血小板减少性紫癜(TTP)患者(13例)，血浆中血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)的活性及抑制物水平，为临床诊断分型及治疗、判断预后提供了参考指标。
遗传性或获得性因素导致血浆中ADAMTS13活性缺乏是TTP的发病原因之一。
研究者使用Ⅲ型胶原(5 μg/mk)包被聚氯乙烯反应板，每孔200 μk，4℃湿盒过夜；用2% BSA-TBS封闭，37℃孵育2小时；分别取50 μk患者血浆和正常对照血浆放入透析管内，在含15 M尿素、pH8.3的反应液中，37℃孵育3小时，同时另取50 μk上述血浆放置于室温；待孵育结束后，将待测血浆按一定比例稀释，取100 μk，加入96孔板，37℃孵育2小时；加1∶20000稀释的RAHvWF，再孵育1小时；加酶标二抗，孵育1小时。OPD显色，酶标仪读数。抑制物实验是将等量的患者血浆和正常人血浆一起孵育，其他步骤同上。根据正常人血浆的R-CBA范围，计算混合血浆的R-CBA相对数值。以100%减去孵育与否的两组R-CBA相对值的比值来评价ADAMTS13的活性和抑制物。
结果显示，正常对照的R-CBA比值小于33%，13例患者的ADAMTS13活性检测中，重度减低<5%4例，5例在10%～50%之间，5例高于50%；选ADAMTS13活性低于50%的患者作抑制物实验，8/9例患者抑制物实验阳性。抑制物阴性患者血浆置换前后，ADAMTS13活性无明显变化，均低于20%。
研究者认为，大部分TTP患者ADAMTS13活性存在不同程度降低，其中30.7%的患者ADAMTS13活性严重缺乏；不论ADAMTS13是否严重缺乏，获得性TTP患者都可检测到体内抑制物；1例抑制物阴性的TTP患者诊断遗传性TTP可能性大。, 百拇医药
遗传性或获得性因素导致血浆中ADAMTS13活性缺乏是TTP的发病原因之一。
研究者使用Ⅲ型胶原(5 μg/mk)包被聚氯乙烯反应板，每孔200 μk，4℃湿盒过夜；用2% BSA-TBS封闭，37℃孵育2小时；分别取50 μk患者血浆和正常对照血浆放入透析管内，在含15 M尿素、pH8.3的反应液中，37℃孵育3小时，同时另取50 μk上述血浆放置于室温；待孵育结束后，将待测血浆按一定比例稀释，取100 μk，加入96孔板，37℃孵育2小时；加1∶20000稀释的RAHvWF，再孵育1小时；加酶标二抗，孵育1小时。OPD显色，酶标仪读数。抑制物实验是将等量的患者血浆和正常人血浆一起孵育，其他步骤同上。根据正常人血浆的R-CBA范围，计算混合血浆的R-CBA相对数值。以100%减去孵育与否的两组R-CBA相对值的比值来评价ADAMTS13的活性和抑制物。
结果显示，正常对照的R-CBA比值小于33%，13例患者的ADAMTS13活性检测中，重度减低<5%4例，5例在10%～50%之间，5例高于50%；选ADAMTS13活性低于50%的患者作抑制物实验，8/9例患者抑制物实验阳性。抑制物阴性患者血浆置换前后，ADAMTS13活性无明显变化，均低于20%。
研究者认为，大部分TTP患者ADAMTS13活性存在不同程度降低，其中30.7%的患者ADAMTS13活性严重缺乏；不论ADAMTS13是否严重缺乏，获得性TTP患者都可检测到体内抑制物；1例抑制物阴性的TTP患者诊断遗传性TTP可能性大。, 百拇医药