鸭乙型肝炎病毒性肝炎模型的研究
上海医科大学肿瘤医院 上海市 200032
项目负责人 吴万垠, 200032, 上海市, 上海医科大学肿瘤医院
收搞日期 1994-11-17 接收日期 1994-12-22
关键词 鸭肝炎病毒
吴万垠, 于尔辛.鸭乙型肝炎病毒性肝炎模型的研究.新消化病学杂志，1996；4(1)：34-35
由于受HBV宿主范围(人和黑猩猩)的限制及缺乏HBV体外培养系统，乙型病毒性肝炎的研究受到了障碍[1].因此，人们开始寻找类似于HBV的其它动物肝炎病毒以用于研究.迄今，已发现该类家族的病毒有：土拔鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)、用鸭乙型肝炎病毒(DHBV).昆类病毒均能引起慢性感染，属于嗜肝DNA病毒(hepadnavirus)科[2].由于宿主动物易于获得，特别是感染DHBV鸭的动物模型，近年来已越来越多地被用于探讨HBV发病机理及筛选抗肝炎病毒药物的研究.作者根据可能影响建立DHBV鸭肝炎模型的各种因素作一综述.
1 DHBV接种时机
以DHBV的感染血清接种的时机一般分为：鸭胚孵化过程中、1.5d内的雏鸭及5d后小鸡或成年鸭.Mason等[3]对已经孵化15d的DHBV()鸭胚经静脉接种DHBV，雏鸭孵出后1d，血清病毒血症阳性率达75%(26/35)，14d达100%(70/70)，随访6-10周，为80%(30/35)；1月后，肝内病毒抗原出现阳性.该模型的接种技术要求较高，很难掌握，国内钱耕荪等[4]改为尿囊腔内接种，雏鸭血清HBV DNA阳性率为81%.在鸭胚时期接种病毒，感染率高并保持了DHBV先天感染的特点，但由于需要掌握较复杂的操作技术，加之雏鸭的孵出率难以控制，该模型的建立受到了一定的限制.Fukuda等[5]对孵出后1，3，5，7，14d的雏鸭分别经足静脉接种25ul的DHBV+血清 (含病毒颗粒4×109/ml)，1周后除于14d组(20%)外，血清DHBV DNA阳性均为100%(5/5)，4周后，仅1，3d接种鸭100%阳性，并维持至24周.肝组织学表现亦有差异：1日龄接种鸭肝脏始终无炎症表现；而3日龄组鸭肝脏炎症反应明显，且一直维持到6月后；其它几组肝脏虽有一定的炎症，但于3周后便逐渐减弱.对1、3周及3月龄雏鸭腹腔接种5μl，DHBV+血清，1日龄组鸭100%(20/20)发生病毒血症，85%(17/20)维持达6月以上，其中3只血清中病毒消除的雏鸭在肝脏中尚可见到DHBV DNA；于3周及3月龄接种的7只鸭，仅有1只发展为持续感染.因此，比较一致的结论为 [6]，孵出后1.3d内(多选择24h内)接种病毒时机最佳，感染率多达100%，且能维持较长时期病毒血症，肝脏中亦多可检出DHBV DNA.据此，Fukuda等[5]认为对雏鸭接种DHBV，感染的持续与否，在接种时机上有一临界点即孵出后35d;5d后接种者，DHBV DNA及内源性DNA多聚酶(DNAP)活性均有所下降；而14d后接种似乎不产生病毒血症.总的趋势为接种时鸭龄越大，感染维持的时间即越短.这些结果类似于人类HBV感染，如先天或婴儿感染HBV，往往存在持续的病毒血症，而成人感染HBV通常仅诱发短暂的病毒血症.原因在于宿主的免疫系统在清除病毒方面起重要作用.婴儿的免疫系统尚未发育成熟，对HBV有一定的耐受性.而DHBV感染类型似乎亦同鸭的免疫系统发育密切相关，因为鸟类的免疫反应起始于孵出后3.5d，多在14d后逐渐增强.
2 DHBV接种途径
DHBV接种途径包括：静脉注射iv，腹腔注射ip，肌肉注射im，肝内注射il，胚内注射ie，经垂直感染及经胃接种ig.除ig给病毒不能使雏鸭感染
外[7]，其它几种途径给DHBV均能获得一定的感染率.其中iv接种雏鸭的感染率几乎都能达100% [5，8].Freiman 等[1]给1日龄鸭ipDHBV,大部分于接种后6d，血清中可测得DHBV DNA，至第2周感染率为100%(70/70)，且一直维持到近4月；肝脏于接种后3d即有DHBV DNA出现.另有多次实验结果[6，8]亦基本同其一致.Marion等[9]给2.5日龄北京雏鸭im接种DHBV病毒血清，7d时病毒血症发生率为91%(71/79)，于7周内达到100%；至第6周时77%(10/13)的鸭肝内有明显的炎症.焦成松等[7]用含不同滴度的DHBV血清予1-3日龄鸭腿部肌肉内注射，结果总感染率为80%，且病毒血症维持3月以上.Sprerge等以200ul(含DHBV颗粒1×109)血清直接注入1日龄鸭肝内个位点，25%(7/8)鸭血清中可测到高滴度的病毒血症.Hosoda等[11]以20μg的二聚体DHBV DNA分别直接注入1d、1周及2周龄雏鸭肝内，1日龄于1周时血清均可测见DHBV DNA(3/3)，肝内亦可见完整的病毒复制.1周(3/3)及2周(3/3)龄雏鸭血清中均未见DHBV DNA，仅前者中有1只(1/3)鸭肝内有小量的DHBV DNA副体.另外，尚有DHBV经垂直传播感染的模型.李秋香等[12]以亲代母方或双方DHBV均阳性的鸭杂交所产之卵进行孵化，孵出的雏鸭DHBV DNA+ 阳性率均为100%；而席玉萍等[13]报道亲代双方均DHBV+，经垂直传播子代的自然感染率为45.5%，两者结果相差甚远，有待进一步核实.一般认为，有其它条件相同的情况下，ip,iv,ie接种感染率最高，im接种次之；最简单可靠的方法为ip；il接种尚需扩大试验后方能作出评价；ig接种法应予废弃.
3 DHBV的接种量
接种病毒量除了对病毒血症出现的时间有影响外，一般不影响总感染率和结果.Tagawa等[14]对1日龄北京白鸭分别ip含0.5×108和2.5×108 DHBV的等位基因组血清，接种后6d,前者无1(0/3)产生病毒血症，后者却有2只(2/3)鸭血DHBV DNA(+)，至54d时，两组白鸭病毒血症率均达到100%(10/10).肝内DHBV DNA出现同血清内所测结果基本一致：前者第6天时1只阳性(1/3)；后者3只阳性(3/3)；两组在接种后54d内，肝内DHBV DNA阳性率均达到100%(10/10).焦成松等[7]分别以含1.5×108和7.5×107的DHBV颗粒肌注1-3日龄鸭，接种后1周末DHBV感染率分别为91.9%(34/37)和83.3%(25/30)，两组相比无显著性差异(P>0.05).由此可见，病毒量对感染结果影响甚小， 因此，各自学者在采用的DHBV量之间差异较大[9，13].但多数学者采用的接种病毒量在7.5×107 5×109之间 [1，3，7，8，14].
4 鸭种来源
Cova等[15]将野生鸭的DHBV分别接种于麻鸭与北京雏鸭，两种鸭对野生DHBV的易感性却不尽相同：麻鸭于5d内出现急性病毒血症，仅在10-20日龄内对DHBV易感，至4月龄时对DHBV即有抵耐性；而北京鸭则一直对DHBV易感.Marion等[9]用含相同量DHBV血清分别肌注至5日龄的北京雏鸭和澳大利亚麝香鸭(Muscowy),前者接种后7周内病毒血症感染率达100%，而麝香鸭在6月内毫无1只感染(0/12)，肝内亦无明显变化.此结果提示，不同鸭种对DHBV的易感程度可能有所差异.瞿涤等[16]来源于同一养殖场的7个鸭种的血清DHBV DNA阳性率进行了检测，之间有显著性差异(0.55%).但Omata等[17]将50ul DHBV+的中国鸭血清接种至血清DHBV()的日本雏鸭，获得到100%的病毒血症感染率：其中97%出现于接种后1周内，86%(6/7)病毒血症持续达10月以上.其另将HBV和WHV接种于雏鸭体内，均未致雏鸭感染.这说明不同鸭种之间完全存在DHBV互染的可能性.这一点在其它研究中[1，18]亦得到了证实.如瞿涤等[18]用DHBV+麻鸭血清分别感染1日龄樱桃谷和北京鸭，感染率分别为68.4%和71.4%(P>0.05).因此，建立DHBV鸭肝炎模型时，选择鸭种应被考虑到，但不应绝对化，较难做到的是把HBV或WHV接种至鸭体内引起感染.
5 感染DHBV鸭肝炎的评价
理想的感染DHBV鸭肝炎模型应具备：血清中有持续稳定的病毒血症即DHBV DNA(+)，鸭肝内应有DHBV DNA或/和DNAP.但在实际评价时，由于对建立DHBV感染模型的检测方法和测定标准不同，得出的结果往往有所差异.鉴于此，多数研究者[8，9，13]，对血清或肝脏病毒抗原、DHBV DNA及DNAP的检测多同时采用两种以上分析方法，以定性与定量相结合，对实验结果进行客观评价，以增加可信度.在报告实验结果时，应详细叙述检测方法及实验条件，尽可能做到使各自结果之间有可比性.
以上是影响建立感染DHBV鸭肝炎模型的几个主要因素，这些因素都有一定的相对性.当有其它因素介入时，接种感染结果往往亦会受到影响.福田等以考的松、环磷酰受预先处理日本产鸭后，再分别于7、14日龄时接种25 ulDHBV+血清，结果使7日龄接种鸭100%(40/40) DHBV DNA(+)；14日龄接种鸭，考的松处理组50%DHBV DNA(+)； go doqhsgtqepv xeg mj 100% bm gm DHBV DNA (+).考的松延长产生病毒血症的机理在于其促进DHBV的复制，而环磷酰胺则主要系通过抑制DHBV的排除.瞿氏等去法氏囊的2周龄鸭静脉接种2.9×106DHBV颗粒，接种后将14周时肝内及血清DHBV DNA阳性率分别为40%(6/15)和20%(3/15)，而对照组则无1阳性.其机理可能在于法氏囊的去除，降低了成年鸭体现人体液免疫系统对DHBV的抵抗作用.可见宿主的免疫状态对DHBV感染的结果影响非常重要.除此之外，可能还有其它很多重要因素，在此不一一赘述.
总之，建立DHBV鸭肝炎模型的影响因素甚多，应选择适当的时机，易于掌握的操作技术，给予适当的病毒颗粒，同时应考虑到鸭种、检测方法及宿主免疫状态等因素的作用.
6 参考文献
1 Freiman JS,Jilbert AR,Dixon RJ, et al.Experimental duck hepatitis B virus infection:pathology and evolution of hepatic
and extrahepatic infection.Hepatology,1988;8(3):507-573
2 Gust ID,Burrel CJ,Couepis AG, et al.Taxonomic classification of human hepatitis B virus.Intervirol,1986;25(1):14-29
3 Mason WS,Halpern MS,England JM,et al.Experimental transmission of duck hepatitis B virus.
Vivology,1983;131(2):375-384
4 钱耕荪，陈渊卿，瞿永华，等.鸭肝癌实验模型研究鸭乙型肝炎病毒对鸭胚的感染.肿瘤，1986；6(4)：163-165
5 Fukuda R,Fukumoto S,Shimada Y.A squential study of viral DNA in serum in experimental transmission of duck hepatitis B virus.
J Med Virol,1987;21(4):311-320
6 Chung WL,Omata M,Ehata T, et al. Coninfection study of preeore mutant and wild-type hepatitis B-like virus in duckings.
Hepatology,1994;19(3):569-576
7 焦成松，楼方岑，瞿瑶，等.鸭乙肝病毒经不同途径感染雏鸭的造模研究.中西医结合肝病杂志，1991；1(2)：24-26
8 Jilbert AR,Freiman JS,Burrell CJ, et al. Vitus-liver cell interactions in duck hepatitis B virus infection:A study of virus
dissemination within the liver.Gastroenterology,1988;95(5):1375-1382
9 Marion PL,Cullen JM,Azcarraga RR, et al.Experimental transmission of duck hepatitis B virus to Pekin ducks and to domestic
geese.Hepatology,1987;7(4):724-731
10 Walter E,Teubner K,Bium HE,et al. Duck hepatitis B virus infection of non-hepatocytes,Liver,1991;11(1):53-62
11 Hosoda K,Omata M,Uchiumi K, et al. Extrahepatic replication of duck hepatitis B virus:more than expected.
Hepatology,1990;11(1):44-48
12 李秋香，郑玉延，李冬田，等.鸭肝炎病毒感染和垂直传播的研究.病毒学杂志，1991；6(1)：15-19
13 席玉萍，刘荻，邢翟芝，等.经垂直传播自然感染DHBV幼鸭的肝组织病理学研究.北京医科大学学报，1989；21(4)：301-302
14 Tagawa M,Omata M,Yokosuka O,et al. Early events in duck hepatitis B virus infection:sequential appearance of
viral deoxyribonucleic acid in the liver,pancrease,kidney,and spleen.Gastroentrtology,1985;89(6):1224-1229
15 Cova L,Lambert V,Chevallier A, et al. Evidence for the pressence of duck hepatitis B virus in wild migrating duck.
J G Vitol,1986;67(Pt3):537-547
16 瞿涤，闻玉梅，林飞卿，等.七个鸭种携带鸭乙型肝炎病毒的研究.中华传染病杂志，1986；4(3)：133-135
17 Omata M,Uchiumi K,Yokosuka O, et al. Transmission of duck hepatitis B virus from Chinese carrier ducks to Japanese ducks for
the study hepatitis virus related liver disease.Gastroenterology, 1983;84(5):1264
18 瞿涤，袁铮薇，林飞卿，等.鸭乙型肝炎病毒(DHBV)实验感染及去法氏囊对感染过程的影响.中华微生物物学和免疫学杂志，1988；8(1)：17-20, http://www.100md.com
项目负责人 吴万垠, 200032, 上海市, 上海医科大学肿瘤医院
收搞日期 1994-11-17 接收日期 1994-12-22
关键词 鸭肝炎病毒
吴万垠, 于尔辛.鸭乙型肝炎病毒性肝炎模型的研究.新消化病学杂志，1996；4(1)：34-35
由于受HBV宿主范围(人和黑猩猩)的限制及缺乏HBV体外培养系统，乙型病毒性肝炎的研究受到了障碍[1].因此，人们开始寻找类似于HBV的其它动物肝炎病毒以用于研究.迄今，已发现该类家族的病毒有：土拔鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)、用鸭乙型肝炎病毒(DHBV).昆类病毒均能引起慢性感染，属于嗜肝DNA病毒(hepadnavirus)科[2].由于宿主动物易于获得，特别是感染DHBV鸭的动物模型，近年来已越来越多地被用于探讨HBV发病机理及筛选抗肝炎病毒药物的研究.作者根据可能影响建立DHBV鸭肝炎模型的各种因素作一综述.
1 DHBV接种时机
以DHBV的感染血清接种的时机一般分为：鸭胚孵化过程中、1.5d内的雏鸭及5d后小鸡或成年鸭.Mason等[3]对已经孵化15d的DHBV()鸭胚经静脉接种DHBV，雏鸭孵出后1d，血清病毒血症阳性率达75%(26/35)，14d达100%(70/70)，随访6-10周，为80%(30/35)；1月后，肝内病毒抗原出现阳性.该模型的接种技术要求较高，很难掌握，国内钱耕荪等[4]改为尿囊腔内接种，雏鸭血清HBV DNA阳性率为81%.在鸭胚时期接种病毒，感染率高并保持了DHBV先天感染的特点，但由于需要掌握较复杂的操作技术，加之雏鸭的孵出率难以控制，该模型的建立受到了一定的限制.Fukuda等[5]对孵出后1，3，5，7，14d的雏鸭分别经足静脉接种25ul的DHBV+血清 (含病毒颗粒4×109/ml)，1周后除于14d组(20%)外，血清DHBV DNA阳性均为100%(5/5)，4周后，仅1，3d接种鸭100%阳性，并维持至24周.肝组织学表现亦有差异：1日龄接种鸭肝脏始终无炎症表现；而3日龄组鸭肝脏炎症反应明显，且一直维持到6月后；其它几组肝脏虽有一定的炎症，但于3周后便逐渐减弱.对1、3周及3月龄雏鸭腹腔接种5μl，DHBV+血清，1日龄组鸭100%(20/20)发生病毒血症，85%(17/20)维持达6月以上，其中3只血清中病毒消除的雏鸭在肝脏中尚可见到DHBV DNA；于3周及3月龄接种的7只鸭，仅有1只发展为持续感染.因此，比较一致的结论为 [6]，孵出后1.3d内(多选择24h内)接种病毒时机最佳，感染率多达100%，且能维持较长时期病毒血症，肝脏中亦多可检出DHBV DNA.据此，Fukuda等[5]认为对雏鸭接种DHBV，感染的持续与否，在接种时机上有一临界点即孵出后35d;5d后接种者，DHBV DNA及内源性DNA多聚酶(DNAP)活性均有所下降；而14d后接种似乎不产生病毒血症.总的趋势为接种时鸭龄越大，感染维持的时间即越短.这些结果类似于人类HBV感染，如先天或婴儿感染HBV，往往存在持续的病毒血症，而成人感染HBV通常仅诱发短暂的病毒血症.原因在于宿主的免疫系统在清除病毒方面起重要作用.婴儿的免疫系统尚未发育成熟，对HBV有一定的耐受性.而DHBV感染类型似乎亦同鸭的免疫系统发育密切相关，因为鸟类的免疫反应起始于孵出后3.5d，多在14d后逐渐增强.
2 DHBV接种途径
DHBV接种途径包括：静脉注射iv，腹腔注射ip，肌肉注射im，肝内注射il，胚内注射ie，经垂直感染及经胃接种ig.除ig给病毒不能使雏鸭感染
外[7]，其它几种途径给DHBV均能获得一定的感染率.其中iv接种雏鸭的感染率几乎都能达100% [5，8].Freiman 等[1]给1日龄鸭ipDHBV,大部分于接种后6d，血清中可测得DHBV DNA，至第2周感染率为100%(70/70)，且一直维持到近4月；肝脏于接种后3d即有DHBV DNA出现.另有多次实验结果[6，8]亦基本同其一致.Marion等[9]给2.5日龄北京雏鸭im接种DHBV病毒血清，7d时病毒血症发生率为91%(71/79)，于7周内达到100%；至第6周时77%(10/13)的鸭肝内有明显的炎症.焦成松等[7]用含不同滴度的DHBV血清予1-3日龄鸭腿部肌肉内注射，结果总感染率为80%，且病毒血症维持3月以上.Sprerge等以200ul(含DHBV颗粒1×109)血清直接注入1日龄鸭肝内个位点，25%(7/8)鸭血清中可测到高滴度的病毒血症.Hosoda等[11]以20μg的二聚体DHBV DNA分别直接注入1d、1周及2周龄雏鸭肝内，1日龄于1周时血清均可测见DHBV DNA(3/3)，肝内亦可见完整的病毒复制.1周(3/3)及2周(3/3)龄雏鸭血清中均未见DHBV DNA，仅前者中有1只(1/3)鸭肝内有小量的DHBV DNA副体.另外，尚有DHBV经垂直传播感染的模型.李秋香等[12]以亲代母方或双方DHBV均阳性的鸭杂交所产之卵进行孵化，孵出的雏鸭DHBV DNA+ 阳性率均为100%；而席玉萍等[13]报道亲代双方均DHBV+，经垂直传播子代的自然感染率为45.5%，两者结果相差甚远，有待进一步核实.一般认为，有其它条件相同的情况下，ip,iv,ie接种感染率最高，im接种次之；最简单可靠的方法为ip；il接种尚需扩大试验后方能作出评价；ig接种法应予废弃.
3 DHBV的接种量
接种病毒量除了对病毒血症出现的时间有影响外，一般不影响总感染率和结果.Tagawa等[14]对1日龄北京白鸭分别ip含0.5×108和2.5×108 DHBV的等位基因组血清，接种后6d,前者无1(0/3)产生病毒血症，后者却有2只(2/3)鸭血DHBV DNA(+)，至54d时，两组白鸭病毒血症率均达到100%(10/10).肝内DHBV DNA出现同血清内所测结果基本一致：前者第6天时1只阳性(1/3)；后者3只阳性(3/3)；两组在接种后54d内，肝内DHBV DNA阳性率均达到100%(10/10).焦成松等[7]分别以含1.5×108和7.5×107的DHBV颗粒肌注1-3日龄鸭，接种后1周末DHBV感染率分别为91.9%(34/37)和83.3%(25/30)，两组相比无显著性差异(P>0.05).由此可见，病毒量对感染结果影响甚小， 因此，各自学者在采用的DHBV量之间差异较大[9，13].但多数学者采用的接种病毒量在7.5×107 5×109之间 [1，3，7，8，14].
4 鸭种来源
Cova等[15]将野生鸭的DHBV分别接种于麻鸭与北京雏鸭，两种鸭对野生DHBV的易感性却不尽相同：麻鸭于5d内出现急性病毒血症，仅在10-20日龄内对DHBV易感，至4月龄时对DHBV即有抵耐性；而北京鸭则一直对DHBV易感.Marion等[9]用含相同量DHBV血清分别肌注至5日龄的北京雏鸭和澳大利亚麝香鸭(Muscowy),前者接种后7周内病毒血症感染率达100%，而麝香鸭在6月内毫无1只感染(0/12)，肝内亦无明显变化.此结果提示，不同鸭种对DHBV的易感程度可能有所差异.瞿涤等[16]来源于同一养殖场的7个鸭种的血清DHBV DNA阳性率进行了检测，之间有显著性差异(0.55%).但Omata等[17]将50ul DHBV+的中国鸭血清接种至血清DHBV()的日本雏鸭，获得到100%的病毒血症感染率：其中97%出现于接种后1周内，86%(6/7)病毒血症持续达10月以上.其另将HBV和WHV接种于雏鸭体内，均未致雏鸭感染.这说明不同鸭种之间完全存在DHBV互染的可能性.这一点在其它研究中[1，18]亦得到了证实.如瞿涤等[18]用DHBV+麻鸭血清分别感染1日龄樱桃谷和北京鸭，感染率分别为68.4%和71.4%(P>0.05).因此，建立DHBV鸭肝炎模型时，选择鸭种应被考虑到，但不应绝对化，较难做到的是把HBV或WHV接种至鸭体内引起感染.
5 感染DHBV鸭肝炎的评价
理想的感染DHBV鸭肝炎模型应具备：血清中有持续稳定的病毒血症即DHBV DNA(+)，鸭肝内应有DHBV DNA或/和DNAP.但在实际评价时，由于对建立DHBV感染模型的检测方法和测定标准不同，得出的结果往往有所差异.鉴于此，多数研究者[8，9，13]，对血清或肝脏病毒抗原、DHBV DNA及DNAP的检测多同时采用两种以上分析方法，以定性与定量相结合，对实验结果进行客观评价，以增加可信度.在报告实验结果时，应详细叙述检测方法及实验条件，尽可能做到使各自结果之间有可比性.
以上是影响建立感染DHBV鸭肝炎模型的几个主要因素，这些因素都有一定的相对性.当有其它因素介入时，接种感染结果往往亦会受到影响.福田等以考的松、环磷酰受预先处理日本产鸭后，再分别于7、14日龄时接种25 ulDHBV+血清，结果使7日龄接种鸭100%(40/40) DHBV DNA(+)；14日龄接种鸭，考的松处理组50%DHBV DNA(+)； go doqhsgtqepv xeg mj 100% bm gm DHBV DNA (+).考的松延长产生病毒血症的机理在于其促进DHBV的复制，而环磷酰胺则主要系通过抑制DHBV的排除.瞿氏等去法氏囊的2周龄鸭静脉接种2.9×106DHBV颗粒，接种后将14周时肝内及血清DHBV DNA阳性率分别为40%(6/15)和20%(3/15)，而对照组则无1阳性.其机理可能在于法氏囊的去除，降低了成年鸭体现人体液免疫系统对DHBV的抵抗作用.可见宿主的免疫状态对DHBV感染的结果影响非常重要.除此之外，可能还有其它很多重要因素，在此不一一赘述.
总之，建立DHBV鸭肝炎模型的影响因素甚多，应选择适当的时机，易于掌握的操作技术，给予适当的病毒颗粒，同时应考虑到鸭种、检测方法及宿主免疫状态等因素的作用.
6 参考文献
1 Freiman JS,Jilbert AR,Dixon RJ, et al.Experimental duck hepatitis B virus infection:pathology and evolution of hepatic
and extrahepatic infection.Hepatology,1988;8(3):507-573
2 Gust ID,Burrel CJ,Couepis AG, et al.Taxonomic classification of human hepatitis B virus.Intervirol,1986;25(1):14-29
3 Mason WS,Halpern MS,England JM,et al.Experimental transmission of duck hepatitis B virus.
Vivology,1983;131(2):375-384
4 钱耕荪，陈渊卿，瞿永华，等.鸭肝癌实验模型研究鸭乙型肝炎病毒对鸭胚的感染.肿瘤，1986；6(4)：163-165
5 Fukuda R,Fukumoto S,Shimada Y.A squential study of viral DNA in serum in experimental transmission of duck hepatitis B virus.
J Med Virol,1987;21(4):311-320
6 Chung WL,Omata M,Ehata T, et al. Coninfection study of preeore mutant and wild-type hepatitis B-like virus in duckings.
Hepatology,1994;19(3):569-576
7 焦成松，楼方岑，瞿瑶，等.鸭乙肝病毒经不同途径感染雏鸭的造模研究.中西医结合肝病杂志，1991；1(2)：24-26
8 Jilbert AR,Freiman JS,Burrell CJ, et al. Vitus-liver cell interactions in duck hepatitis B virus infection:A study of virus
dissemination within the liver.Gastroenterology,1988;95(5):1375-1382
9 Marion PL,Cullen JM,Azcarraga RR, et al.Experimental transmission of duck hepatitis B virus to Pekin ducks and to domestic
geese.Hepatology,1987;7(4):724-731
10 Walter E,Teubner K,Bium HE,et al. Duck hepatitis B virus infection of non-hepatocytes,Liver,1991;11(1):53-62
11 Hosoda K,Omata M,Uchiumi K, et al. Extrahepatic replication of duck hepatitis B virus:more than expected.
Hepatology,1990;11(1):44-48
12 李秋香，郑玉延，李冬田，等.鸭肝炎病毒感染和垂直传播的研究.病毒学杂志，1991；6(1)：15-19
13 席玉萍，刘荻，邢翟芝，等.经垂直传播自然感染DHBV幼鸭的肝组织病理学研究.北京医科大学学报，1989；21(4)：301-302
14 Tagawa M,Omata M,Yokosuka O,et al. Early events in duck hepatitis B virus infection:sequential appearance of
viral deoxyribonucleic acid in the liver,pancrease,kidney,and spleen.Gastroentrtology,1985;89(6):1224-1229
15 Cova L,Lambert V,Chevallier A, et al. Evidence for the pressence of duck hepatitis B virus in wild migrating duck.
J G Vitol,1986;67(Pt3):537-547
16 瞿涤，闻玉梅，林飞卿，等.七个鸭种携带鸭乙型肝炎病毒的研究.中华传染病杂志，1986；4(3)：133-135
17 Omata M,Uchiumi K,Yokosuka O, et al. Transmission of duck hepatitis B virus from Chinese carrier ducks to Japanese ducks for
the study hepatitis virus related liver disease.Gastroenterology, 1983;84(5):1264
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