84-85消化道癌患者检测血清MG-3c7抗原的意义
南京军区81医院 江苏省南京市 210002
陈惠英，女，1944-08-02生，副主任技师.主要从事细胞培养，单克隆抗体制备及肿瘤分子生物学研究.先后发表论著20篇，获得军内科技进步成果奖二等奖1项，三等奖1项，四等奖5项.
项目负责人 陈惠英, 210002, 江苏省南京市, 南京市太平南路杨公井34标34号，中国人民解放军南京军区81医院. Tel: 025- 6648090收搞日期 1995-03-25 接收日期 1995-06-18
Survey of serum MG-3c7 antigen in patients with alimentary canal carcinoma
, 百拇医药 Hui-Ying Chen, Su-Ling Zhang , Wen-Hu Liu and Tin-Yu Xia
Chinese PLA 81 Hospital, Nanjing 210002 China
Abstract
AIM To study the significance of a new tumor marker MG-3c7 in serum in patients with alimentary canal carcinoma.
METHODS Mice anti-human gastric carcinoma monoclonal antibody (MG-3c7) in determination of serum MG-3c7 related antigen with specific hybridoma-enzyme linked immunosorbent assay (SH-ELISA) method was performed in 69 patients with gastric carcinoma, 35 with esophagus carcinoma and 28 with colon carcinoma, 35 with benign diseases and 84 normal subjects.
, http://www.100md.com
RESULTS The positive rates in groups of gastric carcinoma, colon carcinoma, esophagus carcinoma, benign diseases and normal individual were 66.6% (46/69), 42%(12/28), 40%(14/35), 5.7%(2/35) and 2%(2/84) respectively. The positive rate in gastric, cancer group was significantly higher than those of the other five groups (P<0.01).
CONCLUSIONS In the serological diagnosis of alimentary canal carcinoma MG-3c7 is a valuable tumor marker.
, http://www.100md.com
Keywords stomach neoplasms antibodies, monoclonal neoplasm antigens
Chen HY, Zhang SL, Liu WH, Xia TY. Survey of serum MG-3c7 antigen in patients with alimentary canal carcinoma.
Xin Xiaohuabingxue Zazhi, 1996；4(2)：84-85
摘要
目的 研究消化道癌患者血清中MG-3c7相关抗原的表达率.
方法 应用自制的一株分泌抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7杂交瘤细胞，建立了一种特异性杂交瘤细胞酶联免疫测定法(SH-ELISA). 对69例胃癌，35例食管癌，28例结肠癌，35例良性疾病和84例正常人，血清中MG-3c7相关抗原测定.
, 百拇医药
结果 胃癌阳性率66.6%(46/69)，食管癌阳性率40.0%(14/35)，结肠癌阳性率42.0%(12/28)，良性疾病阳性率5.7%(2/35)，正常人阳性率为2.0%(2/84). 胃癌与其它各组阳性率比较有非常显著性差异(P<0.01).
结论 MG-3c7用于胃癌血清学诊断是一项有价值的肿瘤标志物.
关键词 胃肿瘤; 抗体，单克隆; 肿瘤抗原
陈惠英, 张苏玲, 刘文虎, 夏庭玉.消化道癌患者检测血清MG-3c7抗原的意义.新消化病学杂志，1996；4(2)：84-85
为了提高消化系统肿瘤的诊断率，多年来不少医务工作者努力寻求具有诊断价值的肿瘤相关抗原和抗体，取得了一定的进展.我们制备了一株分泌抗人胃管状腺癌单克 隆抗体MG-3c7杂交瘤细胞，建立了一种特异性杂交瘤细胞酶联免疫测定法(SH-ELISA)，对69例胃癌患者进行血清学检测，旨在探讨血清MG-3c7抗原的阳性表达意义.
, 百拇医药
1 对象和方法
1.1 对象 收集我院住院和门诊患者及新兵体检血清共251例，其中胃癌69例，食管癌35例，结肠癌28例，良性疾病35例，均经临床病理证实.正常人84例.
1.2 材料 本室用传代培养人胃管状腺癌细胞系NGcc-8310免疫小鼠，经融合，筛选而获得了一株分泌抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7杂交瘤细胞，将表面已携带MG-3c7抗体的杂交瘤细胞作为天然抗体载体，用于SH-ELISA试验.杂交瘤细胞分泌的抗体经纯化后，标记辣根过氧化物酶(效价1∶1000).
1.3 方法 杂交瘤细胞酶联免疫板的制备，取生长良好的MG-3c7杂交瘤细胞，用0.02mol/L PBS 洗1次，用RPMI 1640培养配成细胞悬液，计数细胞为2×105/ml， 100μl/孔，加入40孔酶联反应板中，5% CO2 37℃孵箱培养24h， 轻轻吸弃上清，加入0.025% 戊二醛100μl/孔固定，4℃ 2h弃上清，4℃保存备用.使用前1∶100正常小鼠血清100μl/孔封闭37℃ 30min， 取出后用PBS洗涤，加入待检血清50μl/孔，37℃ 1h取出弃上清，PBS洗涤，加入MG-3c7-IgG-HRP(效价 1∶1000)50μl/孔，37℃ 30min，PBS 洗涤，邻苯二胺底物溶液显色，参照阳性对照，用2mol/L H2SO4 中止反应. 实验为双复孔，并设阴性、阳性和空白对照孔.40孔酶标板置酶联仪490nm处读取A值，测定值经统计学处理，用t检验比较各组均数间差异.
, http://www.100md.com
2 结果
正常新兵体检84例，SH-ELISA方法吸光度A为0.076±0.076 (x-±2S)，根据对正常人检测结果分界值A以0.15为宜.批内重复性，取3份标本，分别为10孔测定CV值为8.6%；批间重复性，取同样标本重复6次，CV值为11.7%.各组血清MG-3c7相关抗原阳性表达率见表1.
表1 消化道癌患者血清中MG-3c7抗原阳性率 (x-±s)
, 百拇医药
bP<0.01，与其它各组比较.
以SH-ELISA法吸光度a>0.15为阳性时，胃癌患者吸光度值均数为0.19±0.06，阳性率为66.6%，与其它各组相比，增高(P<0.01)，非常显著.
3 讨论
鼠抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7经免疫组化鉴定证实，用MG-3c7检测胃癌组织中对应的相关抗原，具有一定的敏感性与特异性，对胃印戒细胞癌、粘液细胞癌则未见阳性反应[1].血清学检测结果提示对胃癌、食管癌、结肠癌诊断的阳性率可达54.5%(72/132)，其中对胃癌的阳性诊断率为66.6%，优于CEA和CA19-9.一般认为肿瘤标志物诊断率在40%-70%即有一定的应用价值[2].我们认为MG-3c7抗原在胃癌血清学诊断中呈现较高的阳性率，具有良好的应用前景.在良性疾病中MG-3c7抗原阳性率5.7%，2例阳性病例中，1例为萎缩性胃炎，另1例为肝硬变，此结果国内文献亦有类似报道[3].正常人组97%左右的人MG-3c7相关抗原为阴性，仅2例阳性，其吸光度A值仅在临界范围，有待继续随访观察.单抗MG-3c7具有对胃管状腺癌相关抗原的高亲和性及特异性.本文以表面携带抗体的杂交瘤细胞作为天然抗体载体[4]，利用双抗体夹心法对一组消化道肿瘤患者血清进行了检测.实验结果表明，该方法为单克隆抗体血清学检测提供了新的手段，且方法简单，结果可靠，为胃癌的联合鉴别及导向治疗提供了方便.
, 百拇医药
4 参考文献
1 张苏玲，陈惠英，张佃乾，等.癌基因cerb B-2与MG-3c7抗原在胃癌中的表达.新消化病学杂志，1995；3(4)：195-196
2 古文森，余宁，邱玉玲，等.胃癌患者血清中MG-Ags的检测及其临床意义.中国肿瘤临床，1993；20(8)：591-593
3 英军，包林平，刘明唯，等.消化道癌患者血清中的CCA检测.肿瘤，1995；5(2)：91-93
4 王建一，阎所文，张苏玲，等.用HClEA法检测乳腺癌患者血清BG6抗原的初步研究.实用癌症杂志，1989；4(4)：251-253, 百拇医药(陈惠英, 张苏玲,刘文虎, 夏庭玉)
陈惠英，女，1944-08-02生，副主任技师.主要从事细胞培养，单克隆抗体制备及肿瘤分子生物学研究.先后发表论著20篇，获得军内科技进步成果奖二等奖1项，三等奖1项，四等奖5项.
项目负责人 陈惠英, 210002, 江苏省南京市, 南京市太平南路杨公井34标34号，中国人民解放军南京军区81医院. Tel: 025- 6648090收搞日期 1995-03-25 接收日期 1995-06-18
Survey of serum MG-3c7 antigen in patients with alimentary canal carcinoma
, 百拇医药 Hui-Ying Chen, Su-Ling Zhang , Wen-Hu Liu and Tin-Yu Xia
Chinese PLA 81 Hospital, Nanjing 210002 China
Abstract
AIM To study the significance of a new tumor marker MG-3c7 in serum in patients with alimentary canal carcinoma.
METHODS Mice anti-human gastric carcinoma monoclonal antibody (MG-3c7) in determination of serum MG-3c7 related antigen with specific hybridoma-enzyme linked immunosorbent assay (SH-ELISA) method was performed in 69 patients with gastric carcinoma, 35 with esophagus carcinoma and 28 with colon carcinoma, 35 with benign diseases and 84 normal subjects.
, http://www.100md.com
RESULTS The positive rates in groups of gastric carcinoma, colon carcinoma, esophagus carcinoma, benign diseases and normal individual were 66.6% (46/69), 42%(12/28), 40%(14/35), 5.7%(2/35) and 2%(2/84) respectively. The positive rate in gastric, cancer group was significantly higher than those of the other five groups (P<0.01).
CONCLUSIONS In the serological diagnosis of alimentary canal carcinoma MG-3c7 is a valuable tumor marker.
, http://www.100md.com
Keywords stomach neoplasms antibodies, monoclonal neoplasm antigens
Chen HY, Zhang SL, Liu WH, Xia TY. Survey of serum MG-3c7 antigen in patients with alimentary canal carcinoma.
Xin Xiaohuabingxue Zazhi, 1996；4(2)：84-85
摘要
目的 研究消化道癌患者血清中MG-3c7相关抗原的表达率.
方法 应用自制的一株分泌抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7杂交瘤细胞，建立了一种特异性杂交瘤细胞酶联免疫测定法(SH-ELISA). 对69例胃癌，35例食管癌，28例结肠癌，35例良性疾病和84例正常人，血清中MG-3c7相关抗原测定.
, 百拇医药
结果 胃癌阳性率66.6%(46/69)，食管癌阳性率40.0%(14/35)，结肠癌阳性率42.0%(12/28)，良性疾病阳性率5.7%(2/35)，正常人阳性率为2.0%(2/84). 胃癌与其它各组阳性率比较有非常显著性差异(P<0.01).
结论 MG-3c7用于胃癌血清学诊断是一项有价值的肿瘤标志物.
关键词 胃肿瘤; 抗体，单克隆; 肿瘤抗原
陈惠英, 张苏玲, 刘文虎, 夏庭玉.消化道癌患者检测血清MG-3c7抗原的意义.新消化病学杂志，1996；4(2)：84-85
为了提高消化系统肿瘤的诊断率，多年来不少医务工作者努力寻求具有诊断价值的肿瘤相关抗原和抗体，取得了一定的进展.我们制备了一株分泌抗人胃管状腺癌单克 隆抗体MG-3c7杂交瘤细胞，建立了一种特异性杂交瘤细胞酶联免疫测定法(SH-ELISA)，对69例胃癌患者进行血清学检测，旨在探讨血清MG-3c7抗原的阳性表达意义.
, 百拇医药
1 对象和方法
1.1 对象 收集我院住院和门诊患者及新兵体检血清共251例，其中胃癌69例，食管癌35例，结肠癌28例，良性疾病35例，均经临床病理证实.正常人84例.
1.2 材料 本室用传代培养人胃管状腺癌细胞系NGcc-8310免疫小鼠，经融合，筛选而获得了一株分泌抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7杂交瘤细胞，将表面已携带MG-3c7抗体的杂交瘤细胞作为天然抗体载体，用于SH-ELISA试验.杂交瘤细胞分泌的抗体经纯化后，标记辣根过氧化物酶(效价1∶1000).
1.3 方法 杂交瘤细胞酶联免疫板的制备，取生长良好的MG-3c7杂交瘤细胞，用0.02mol/L PBS 洗1次，用RPMI 1640培养配成细胞悬液，计数细胞为2×105/ml， 100μl/孔，加入40孔酶联反应板中，5% CO2 37℃孵箱培养24h， 轻轻吸弃上清，加入0.025% 戊二醛100μl/孔固定，4℃ 2h弃上清，4℃保存备用.使用前1∶100正常小鼠血清100μl/孔封闭37℃ 30min， 取出后用PBS洗涤，加入待检血清50μl/孔，37℃ 1h取出弃上清，PBS洗涤，加入MG-3c7-IgG-HRP(效价 1∶1000)50μl/孔，37℃ 30min，PBS 洗涤，邻苯二胺底物溶液显色，参照阳性对照，用2mol/L H2SO4 中止反应. 实验为双复孔，并设阴性、阳性和空白对照孔.40孔酶标板置酶联仪490nm处读取A值，测定值经统计学处理，用t检验比较各组均数间差异.
, http://www.100md.com
2 结果
正常新兵体检84例，SH-ELISA方法吸光度A为0.076±0.076 (x-±2S)，根据对正常人检测结果分界值A以0.15为宜.批内重复性，取3份标本，分别为10孔测定CV值为8.6%；批间重复性，取同样标本重复6次，CV值为11.7%.各组血清MG-3c7相关抗原阳性表达率见表1.
表1 消化道癌患者血清中MG-3c7抗原阳性率 (x-±s)
| 组别 | n | MG-3c7 | 阳性率 |
| 胃 癌 | 69 | 0.19±0.06 | 66.6%(46/69)b |
| 食 管 癌 | 35 | 0.14±0.05 | 40% (14/35) |
| 结 肠 癌 | 28 | 0.13±0.05 | 42% (12/28) |
| 良性疾病 | 35 | 0.08±0.03 | 5.7%(2/35) |
| 正 常 人 | 84 | 0.076±0.038 | 2% (2/84) |
, 百拇医药
bP<0.01，与其它各组比较.
以SH-ELISA法吸光度a>0.15为阳性时，胃癌患者吸光度值均数为0.19±0.06，阳性率为66.6%，与其它各组相比，增高(P<0.01)，非常显著.
3 讨论
鼠抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7经免疫组化鉴定证实，用MG-3c7检测胃癌组织中对应的相关抗原，具有一定的敏感性与特异性，对胃印戒细胞癌、粘液细胞癌则未见阳性反应[1].血清学检测结果提示对胃癌、食管癌、结肠癌诊断的阳性率可达54.5%(72/132)，其中对胃癌的阳性诊断率为66.6%，优于CEA和CA19-9.一般认为肿瘤标志物诊断率在40%-70%即有一定的应用价值[2].我们认为MG-3c7抗原在胃癌血清学诊断中呈现较高的阳性率，具有良好的应用前景.在良性疾病中MG-3c7抗原阳性率5.7%，2例阳性病例中，1例为萎缩性胃炎，另1例为肝硬变，此结果国内文献亦有类似报道[3].正常人组97%左右的人MG-3c7相关抗原为阴性，仅2例阳性，其吸光度A值仅在临界范围，有待继续随访观察.单抗MG-3c7具有对胃管状腺癌相关抗原的高亲和性及特异性.本文以表面携带抗体的杂交瘤细胞作为天然抗体载体[4]，利用双抗体夹心法对一组消化道肿瘤患者血清进行了检测.实验结果表明，该方法为单克隆抗体血清学检测提供了新的手段，且方法简单，结果可靠，为胃癌的联合鉴别及导向治疗提供了方便.
, 百拇医药
4 参考文献
1 张苏玲，陈惠英，张佃乾，等.癌基因cerb B-2与MG-3c7抗原在胃癌中的表达.新消化病学杂志，1995；3(4)：195-196
2 古文森，余宁，邱玉玲，等.胃癌患者血清中MG-Ags的检测及其临床意义.中国肿瘤临床，1993；20(8)：591-593
3 英军，包林平，刘明唯，等.消化道癌患者血清中的CCA检测.肿瘤，1995；5(2)：91-93
4 王建一，阎所文，张苏玲，等.用HClEA法检测乳腺癌患者血清BG6抗原的初步研究.实用癌症杂志，1989；4(4)：251-253, 百拇医药(陈惠英, 张苏玲,刘文虎, 夏庭玉)