PCR法检测幽门螺杆菌感染的临床应用进展
项目负责人,关键词,1,从克隆的Hp染色体DNA特异性片段中构建引物,2,从互补于Hp的16S-rRNA基因片段中构建引物,3,从互补于Hp尿素酶基因中构建引物,3.1,从互补于尿素酶A基因中构建引物,3.2,从互补于尿素酶结构亚单位基因序列中构建引物,3.3
1解放军271医院消化内科 天津市 300191 2河北医科大学院二附院消化内科 河北省 石家庄市 050000
项目负责人 李若平,300191,天津市,解放军271医院消化内科 收搞日期 1995-01-02 接收日期 1995-05-03
关键词 聚合酶链反应;幽门螺杆菌;基因
李若平,张振科.PCR法检测幽门螺杆菌感染的临床应用进展.新消化病学杂志，1996；4(4)：226-247
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是一种微需氧、革兰氏阴性螺旋形细菌，1983年澳大利亚学者Warren和Marshall首先从人胃粘膜活组织中检出并首次报告[1].迄今为止，临床上诊断Hp感染多采用常规实验方法，这些方法需有活菌存在；但经内镜所取之活组织所含Hp变为球形，菌量过少时常难检出，加之培养所需时间太长，故其敏感性及特异性不够理想；故目前多数实验检测方法中，无一种单项实验方法属最佳方法.而聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)能选择性大量扩增目的基因106倍，是一种快速、简便、精确、特异性及敏感性均高的方法.1990年Hoshina等[2]首先应用PCR技术快速扩增胃粘膜活检组织中Hp的16S-rRNA基因检测Hp感染获得成功，至今已有大量应用PCR技术检测Hp的报道.由于PCR技术所选用引物不同，各家报道不尽一致，现综述如下.
1 从克隆的Hp染色体DNA特异性片段中构建引物
Valentine等[3]从Hp克隆文库中随机克隆取一段长度为1.9kb的染色体DNA，从中构建一对20mer引物CAM-2(5＇CATCTTGTTAGAGGGATTGG-3＇)和CAM-4(5＇TAACAAACCGATAATGGCGC-3′)，再用PCR扩增后所得产物，经琼脂糖凝胶电泳和同一个与PCR扩增产物序列同源的32P标记的20mer寡核苷酸探针CAM-3(5＇CGCTCTTTAGTTTTGGAGCG-3′)作Southern杂交后，确认其是一段203bp特异产物.用此法检测35份Hp临床标本的阳性率达100% ......
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