PCR检测消化管癌组织中HBV DNA
解放军81医院病理科 江苏省南京市 210002
项目负责人 石凤娟,210002,江苏省南京市,解放军81医院病理科 收搞日期 1995-02-10 接收日期 1995-04-03
Subject headings polymerase chain reaction hepatitis B virus/geneties DNA, viral/analysis digestive system neoplasms/virology
主题词 聚合酶链反应;肝炎病毒，乙型/遗传学;DNA，病毒/分析;消化系统肿瘤/病毒学
石凤娟,李祥周,王春淑.PCR检测消化管癌组织中HBV DNA.新消化病学杂志，1996；4(7)：408-409
, http://www.100md.com
研究表明，乙型肝炎病毒(HBV)具有泛嗜性，除了肝细胞外尚可存在于肝外的其它组织中，如胰腺、心肌、肾、肺等.我们用PCR技术，对消化管癌与非癌组织作了HBV DNA检测，以了解其在这些组织中的存在情况及临床意义.
1 对象和方法
1.1 对象 我院外科切除消化道癌标本74例，其中食管癌20例，HBV感染血清学标志，仅查HBsAg者6例，其中5例阴性，1例阳性；作“两对半”检查者13例，其中抗-HBs阳性者4例，抗-HBc阳性1例，HBsAg和抗-HBs阳性1例，抗-HBs和抗HBc阳性2例，HBsAg、抗-HBe和抗-HBc阳性者1例，HBsAg、抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性者1例，均阴性者3例，1例未查“两对半”.胃癌36例，HBV感染血清学标志：25例仅查HBsAg，其中20例阴性，5例阳性；查“两对半”者7例，其中HBsAg阳性者1例，抗-HBs阳性者1例，抗-HBs和抗-HBc阳性者1例，均阴性者4例，4例未查“两对半”.肠癌18例，HBV血清学感染标志：10例仅查HBsAg，其中9例阴性，1例阳性；5例作“两对半”检查者中HBsAg和抗-HBs阳性者1例，抗-HBs阳性者3例，均阴性者1例；3例未查“两对半”.
, 百拇医药
1.2 方法 每例标本均选癌与非癌部石蜡包埋组织，根据组织块大小不同分别切取蜡片30-40张，放入1.5ml的Appendorf管内，常规脱蜡后按酚-氯仿法提取DNA.HBVDNA扩增试剂盒由南通宏达生物技术有限公司提供，DNA循环仪系Derkin Elmer公司产品.循环程序按试剂盒要求设计，PCR产物用含溴乙啶的1%琼酯糖电泳，最后在302中波长紫外光源下观察.每次试验均设阳性及阴性对照.用χ2检验.
2 结果
消化道癌与非癌组织中均可检出HBV DNA(表1)，癌组织检出率为28.4%(21/74)，非癌组织检出率是14.9%(11/14)，癌与非癌组织的共同检出率是10.8%(8/14).共同检出率低于单个组织的检出率，非癌组织的检出率低于癌组织的检出率，癌与非癌组织间HBV DNA的检出率差异显著(P<0.05).
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表1 癌与非癌组织HBV DNA PCR阳性结果 (n，%)
aP<0.05， vs 非癌组织.
3 讨论
, 百拇医药
用PCR法检测HBV DNA，在74例消化道癌患者的癌与非癌部的石蜡包埋组织中分别检出了21例(28.4%)和11例(14.9%)，证实了在消化道癌与非癌组织中确实存在着HBV DNA.在组织HBV DNA阳性病例中，大部分(12∶24)其HBV感染的血清学标志有一项或多项阳性.存在于消化道癌与非癌组织中的HBV DNA，是由于存在于患者血清中抑或是白细胞体内的HBV污染所致，还是真正属于该病毒感染的结果尚难定论.本组选用的试剂盒内的一对引物是指导扩增HBV基因组中的前C 1736至C区2300间的565片段，其扩增阳性产物只能证实有HBV DNA的存在，无法定位其所在部位.确定HBV感染组织的可靠指标是在组织中需存在着整合型HBV DNA.文献中有的作者利用原位分子杂交方法在肾小管上皮细胞核内检测到HBV DNA，笔者推测至少有一部分存在于消化道癌与非癌组织中的HBV DNA是HBV直接感染的结果.
本组癌与非癌组织中HBV DNA的检出率虽有差异，但未显示出癌与HBV DNA间很强的相关性.尽管不少文献揭示HBV与肝癌的发生密切相关，但从本组资料分析消化道癌的发生与HBV的相关性不大., 百拇医药(石凤娟 李祥周 王春淑)
项目负责人 石凤娟,210002,江苏省南京市,解放军81医院病理科 收搞日期 1995-02-10 接收日期 1995-04-03
Subject headings polymerase chain reaction hepatitis B virus/geneties DNA, viral/analysis digestive system neoplasms/virology
主题词 聚合酶链反应;肝炎病毒，乙型/遗传学;DNA，病毒/分析;消化系统肿瘤/病毒学
石凤娟,李祥周,王春淑.PCR检测消化管癌组织中HBV DNA.新消化病学杂志，1996；4(7)：408-409
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研究表明，乙型肝炎病毒(HBV)具有泛嗜性，除了肝细胞外尚可存在于肝外的其它组织中，如胰腺、心肌、肾、肺等.我们用PCR技术，对消化管癌与非癌组织作了HBV DNA检测，以了解其在这些组织中的存在情况及临床意义.
1 对象和方法
1.1 对象 我院外科切除消化道癌标本74例，其中食管癌20例，HBV感染血清学标志，仅查HBsAg者6例，其中5例阴性，1例阳性；作“两对半”检查者13例，其中抗-HBs阳性者4例，抗-HBc阳性1例，HBsAg和抗-HBs阳性1例，抗-HBs和抗HBc阳性2例，HBsAg、抗-HBe和抗-HBc阳性者1例，HBsAg、抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性者1例，均阴性者3例，1例未查“两对半”.胃癌36例，HBV感染血清学标志：25例仅查HBsAg，其中20例阴性，5例阳性；查“两对半”者7例，其中HBsAg阳性者1例，抗-HBs阳性者1例，抗-HBs和抗-HBc阳性者1例，均阴性者4例，4例未查“两对半”.肠癌18例，HBV血清学感染标志：10例仅查HBsAg，其中9例阴性，1例阳性；5例作“两对半”检查者中HBsAg和抗-HBs阳性者1例，抗-HBs阳性者3例，均阴性者1例；3例未查“两对半”.
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1.2 方法 每例标本均选癌与非癌部石蜡包埋组织，根据组织块大小不同分别切取蜡片30-40张，放入1.5ml的Appendorf管内，常规脱蜡后按酚-氯仿法提取DNA.HBVDNA扩增试剂盒由南通宏达生物技术有限公司提供，DNA循环仪系Derkin Elmer公司产品.循环程序按试剂盒要求设计，PCR产物用含溴乙啶的1%琼酯糖电泳，最后在302中波长紫外光源下观察.每次试验均设阳性及阴性对照.用χ2检验.
2 结果
消化道癌与非癌组织中均可检出HBV DNA(表1)，癌组织检出率为28.4%(21/74)，非癌组织检出率是14.9%(11/14)，癌与非癌组织的共同检出率是10.8%(8/14).共同检出率低于单个组织的检出率，非癌组织的检出率低于癌组织的检出率，癌与非癌组织间HBV DNA的检出率差异显著(P<0.05).
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表1 癌与非癌组织HBV DNA PCR阳性结果 (n，%)
| 癌部位 | n | 癌组织a | 非癌组织 | 癌与非癌组织 |
| 食管癌 | 20 | 8(40.0) | 1(5.0) | 1(5.0) |
| 胃 癌 | 36 | 10(27.8) | 7(19.4) | 5(13.9) |
| 肠 癌 | 18 | 3(16.7) | 3(16.7) | 2(11.1) |
aP<0.05， vs 非癌组织.
3 讨论
, 百拇医药
用PCR法检测HBV DNA，在74例消化道癌患者的癌与非癌部的石蜡包埋组织中分别检出了21例(28.4%)和11例(14.9%)，证实了在消化道癌与非癌组织中确实存在着HBV DNA.在组织HBV DNA阳性病例中，大部分(12∶24)其HBV感染的血清学标志有一项或多项阳性.存在于消化道癌与非癌组织中的HBV DNA，是由于存在于患者血清中抑或是白细胞体内的HBV污染所致，还是真正属于该病毒感染的结果尚难定论.本组选用的试剂盒内的一对引物是指导扩增HBV基因组中的前C 1736至C区2300间的565片段，其扩增阳性产物只能证实有HBV DNA的存在，无法定位其所在部位.确定HBV感染组织的可靠指标是在组织中需存在着整合型HBV DNA.文献中有的作者利用原位分子杂交方法在肾小管上皮细胞核内检测到HBV DNA，笔者推测至少有一部分存在于消化道癌与非癌组织中的HBV DNA是HBV直接感染的结果.
本组癌与非癌组织中HBV DNA的检出率虽有差异，但未显示出癌与HBV DNA间很强的相关性.尽管不少文献揭示HBV与肝癌的发生密切相关，但从本组资料分析消化道癌的发生与HBV的相关性不大., 百拇医药(石凤娟 李祥周 王春淑)