经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞 及化疗药物治疗中晚期肝癌
王在国，男，1964-10-04生，四川省平武县人，汉族.1986年泸州医学院医学系毕业，学士学位，外科副主任医师，主要从事肝胆胰肿瘤的临床医疗和科研工作，发表论文13篇
项目负责人 王在国,610041 四川省成都市人民南路四段55号,成都市,四川省肿瘤医院外科肝胆胰专业
Tel: 028-5552212转3360或5839，Fax: 028-5554506 收搞日期 1995-03-05 接收日期 1995-06-17
四川省肿瘤医院外科肝胆胰专业 成都市 610041〖FQ)〗〖HJ〗
〖FK(H0785.48〗〖HT2，4HB〗
, 百拇医药 经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌
〖HT5HB〗王在国 张爱玲 丁福全 刘光中〖FK)〗
〖FL(2K2〗〖HJ*6〗
Local transfusion of LAK cell with chemotherapy in the treatment of pat
ients and advanced liver cancer with IDDS
WANG Zai-Guo, ZHANG Ai-Ling, DING Fu-Quan and
LIU Guang-Zhong
Department of Surgery, Shichuan Cancer Hospital, Chengdu 610041
, 百拇医药
Sichuan Province, China
Abstract
AIMS\ To study the clinical effectiveness of local transfusion
of LAK cell and chemotherapy in the treatment of patients with advanced liver ca
ncer with implantable drug delivery system(IDDS).
METHODS\ Ninety-two patients with advanced primary liver cancer
, http://www.100md.com
we
re identified by pathological examination in whom 14 were treated by transfusi
ng the auto-LAK cell and chemotherapeutic agents as the experimental group.
78 patients were only treated by chemotherapy as the control group.
RESULTS\ In the experimental group, 6 cases had complete remissi
on(CR) and 6 cases had partial remission(PR), the effective rate was 87.5%, in
, http://www.100md.com
the control group, 17 cases had CR and 28 PR, the effective rate was 57.7%,
the defference was significant(P<0.05).
CONCLUSIONS\ Local transfusion of auto-LAK cell and chemoeher
apy through portal vein or hepatic artery by IDDS can prompt the effect for live
r cancer.
[WTF9]Subject headings\ liver neoplasms/therapy carcinoma, hepatocell
, http://www.100md.com
ular/therapy killer cells, lymphokine-activated antineoplastic agents,
combined
Wang ZG, Zhang AL, Ding FQ,Liu GZ.Local transfusion of LAK cell with chemotherapy in the treatment of patients and advanced liver cancer with IDDS.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(8)：448-449
摘要
目的 探讨肝动脉门静脉输注自体LAK细胞在肝癌肝脏灌注化疗中的临床价值.
, 百拇医药
方法 病理证实的原发性肝癌患者92例，14例肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物，78例肝动脉门静脉输注化疗药物作为对照.
结果 自体LAK细胞加化疗组CR 6例，PR 6例，有效率85.7%；对照组CR 17例，PR 28例，有效率57.7%；两组间疗效有显著性差异
(P<0.05).
结论 肝动脉门静脉输注自体LAK细胞可以提高肝癌肝脏灌注化疗的效果，经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌的研究具有实际临床意义.
主题词 肝肿瘤/治疗;癌，肝细胞/治疗;杀伤细胞，淋巴因子激活;抗肿瘤药，多剂联用
, 百拇医药
王在国,张爱玲,丁福全,刘光中.经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌.新消化病学杂志，1996；4(8)：448-449
肝癌起病隐匿，进展快，临床可切除率仅10%-20%，放、化疗对肝癌治疗效果均不理想.随着生物高技术特别是细胞工程和基因工程技术的飞跃发展，生物治疗已迅速成为肿瘤治疗的第四大模式.经肝动脉输注LAK细胞治疗肝癌已取得较好的效果[1，2].我院1993年8月-1994年8月经肝动脉门静脉双途径输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌14例，近期疗效满意，现报告如下.
1 对象和方法
1.1 对象 自体LAK细胞及化疗药物肝动脉门静脉输注治疗组14例，均男性， 年龄40-64岁，Ⅱa期3例，Ⅱb期7例，Ⅲ期4例，全部病例均经病理诊断为原发性肝细胞性肝癌.以1990年7月-1993年7月我院肝动脉门静脉输注化疗药物治疗的78例中晚期肝癌作为历史对照组.全部患者经剖腹探查及肿瘤组织切取活检(单纯化疗组17例，LAK加化疗组6例，行肿瘤姑息性切除)后，经胃网膜右动、静脉分别插管至肝固有动脉、门静脉，将给药装置(四川康科公司生产MT-100型及陕西高科联生产KL-Ⅱ型)埋植于切口旁侧皮下备用.
, http://www.100md.com
1.2 自体LAK细胞液的制备 自体LAK细胞液由四川省肿瘤研究所制备，无菌条件下采取患者外周血液20ml(肝素抗凝),Ficoll密度梯度常规分离淋巴细胞；按2×106细胞/ml加入PHA至终浓度为25μg/ml，于37℃，5%CO2培养48h；收集细胞，用1640培养液离心洗2次；按0.5×106细胞/ml加入人天然IL-2至终浓度40μ/ml， 每隔2d换液，37℃，5% CO2培养，培养14d，收集细胞，用5%GNS离心洗2次，然后加入适量5% GNS，经2001m过筛后，再加5% GNS至100ml，封瓶立即使用；每隔24h，又收集细胞，按上述程序制备成自体LAK细胞液.每100ml自体LAK细胞液中，含自体LAK细胞1×109个，人天然IL-2 4000U及人体白蛋白1g，细胞杀伤活性按10∶1E/T反应大于40%.
1.3 方法 术后7-10d开始经肝动脉门静脉交替输注自体LAK细胞液，每次100ml，隔日1次，共5次为1个疗程(肝动脉3次，门静脉2次)；最后1次输注后3-4d，行肝脏灌注化疗，选用阿霉素50mg第1天肝动脉推注，丝裂霉素C 20mg第1天门静脉推注，氟脲嘧啶脱氧核苷1000mg 肝动脉(第1，5，9天)门静脉(第3,7天)滴注，28d为1个周期，连用2个周期为1个疗程(化疗方案与历史对照组一致).治疗前后检查血象、肝肾功、ECG，AFP值(放免法)及肿块变化情况(B超或CT)，治疗期间密切观察并及时处理毒性反应，1个疗程结束后评价疗效.根据肝区疼痛、肿瘤大小，AFP值的变化情况，按照全国肿瘤防治办公室和中国抗癌协会制定的标准[3]进行疗效判断.
, 百拇医药
2 结果
2.1 近期疗效 自体LAK细胞液加化疗药物治疗组CR 6例，PR 6例，NC 2例，有效率85.7%；历史对照组CR 17例，PR 28例，NC 33例，有效率57.7%.经过统计学处理，χ2=3.93，P<0.05，两组疗效间存在显著性差异.
2.2 副作用 ①自体LAK细胞毒性反应：四肢躯干荨麻疹3例，全身疼痛无力2例，发热(38℃-38.7℃, 12-24h自行恢复)2例，1例出现畏寒、寒颤及轻度呼吸窘迫，肌注非那根25mg后迅速缓解(该例效果也最好：肝内5个直径5-7cm肿块，治疗一个疗程后，肿块缩小至3-5cm，且绝大部分液化坏死，AFP由4800μg/L降至92μg/L，生存16个月后因上消化道大出血突然死亡).②化疗药物毒性反应：肝脏灌注化疗毒性反应轻微，根据WHO毒性分级标准，消化道毒性反应12例(1-2级)，骨髓抑制12例(1-2级)，脱发13例(1-2级)，无1例出现心肝肾功能损害.
, http://www.100md.com
3 讨论
通过输注免疫活性细胞，以达到治疗肿瘤目的的过继免疫治疗，是近年来生物治疗中最活跃的领域之一.LAK细胞是一种免疫活性细胞，它只杀伤肿瘤细胞，不杀伤正常细胞.将LAK细胞与IL-2联合应用并经肝动脉输注，可以明显提高LAK细胞疗效.曾有学者应用LAK细胞治疗10例肝癌，结果CR 2例，PR 4例，MR 2例，有效率80%.
肝癌由肝动脉门静脉双重供血.目前国内有关肝动脉门静脉插管双途径灌注化疗治疗中晚期肝癌的研究报告日益增多，报告的疗效也高低不等[4-7].我院经肝动脉门静脉插管化疗治疗78例中晚期肝癌，结果CR 17例，PR 28例，有效率57.7%；而经肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗14例中晚期肝癌，结果CR 6例，PR 6例，有效率85.7%.经统计学处理，肝动脉门静脉化疗组与肝动脉门静脉自体LAK细胞加化疗组的疗效有显著性差异(P<0.05)，表明肝动脉门静脉输注自体LAK细胞可以明显提高肝癌肝脏灌注化疗的效果.
, http://www.100md.com
经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注LAK细胞液及化疗药物，既能使肝脏获得高浓度的LAK细胞和化疗药物，因而提高治疗效果，同时又降低了全身毒副作用[2，7]；该装置还具有方便患者生活与护理工作，以及可反复穿刺使用等优点.因此，经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌的研究具有实际临床意义.
致谢：本研究得到四川省肿瘤研究所黄建鸣、谢之荣、邓碧芳的大力支持.
4 参考文献
1 李东复，葛焕琦，杨海山，等.LAK细胞肝动脉灌注与化疗栓塞联合应用治疗原发性肝癌14例.中华肿瘤杂志，1995；17(1)：59
2 周伟平，吴孟超，陈汉，等.肝癌切除加免疫化疗对术后复发的影响.中华外科杂志，1995；33(1)：35-37
, http://www.100md.com
3 全国肿瘤防办公室、中国抗癌协会合编.中国常见恶性肿瘤诊治规范.第二分册.原发性肝癌.北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合
出版社，1990：54-55
4 王在国，刘光中，曾令源，等.肝动脉门静脉双路插管化疗的并发症及其防治.实用癌症杂志，1994；9(4)：243-245
5 盛茂鑫，倪恿文，饶荣生主编.肝癌导管治疗与序贯切除进展.南昌：江西科技出版社，1994：253-256
6 万向荣.肝动脉门静脉双重插管化疗治疗晚期肝癌(附4例报告).中国肿瘤临床，1993；20(7)：557
7 王在国，仲渝民，丁福全，等.阿霉素肝动脉外周静脉注射的血药浓度变化观察.实用癌症杂志，1995；10(3)：175-176, 百拇医药(王在国 张爱玲 丁福全 刘光中)
项目负责人 王在国,610041 四川省成都市人民南路四段55号,成都市,四川省肿瘤医院外科肝胆胰专业
Tel: 028-5552212转3360或5839，Fax: 028-5554506 收搞日期 1995-03-05 接收日期 1995-06-17
四川省肿瘤医院外科肝胆胰专业 成都市 610041〖FQ)〗〖HJ〗
〖FK(H0785.48〗〖HT2，4HB〗
, 百拇医药 经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌
〖HT5HB〗王在国 张爱玲 丁福全 刘光中〖FK)〗
〖FL(2K2〗〖HJ*6〗
Local transfusion of LAK cell with chemotherapy in the treatment of pat
ients and advanced liver cancer with IDDS
WANG Zai-Guo, ZHANG Ai-Ling, DING Fu-Quan and
LIU Guang-Zhong
Department of Surgery, Shichuan Cancer Hospital, Chengdu 610041
, 百拇医药
Sichuan Province, China
Abstract
AIMS\ To study the clinical effectiveness of local transfusion
of LAK cell and chemotherapy in the treatment of patients with advanced liver ca
ncer with implantable drug delivery system(IDDS).
METHODS\ Ninety-two patients with advanced primary liver cancer
, http://www.100md.com
we
re identified by pathological examination in whom 14 were treated by transfusi
ng the auto-LAK cell and chemotherapeutic agents as the experimental group.
78 patients were only treated by chemotherapy as the control group.
RESULTS\ In the experimental group, 6 cases had complete remissi
on(CR) and 6 cases had partial remission(PR), the effective rate was 87.5%, in
, http://www.100md.com
the control group, 17 cases had CR and 28 PR, the effective rate was 57.7%,
the defference was significant(P<0.05).
CONCLUSIONS\ Local transfusion of auto-LAK cell and chemoeher
apy through portal vein or hepatic artery by IDDS can prompt the effect for live
r cancer.
[WTF9]Subject headings\ liver neoplasms/therapy carcinoma, hepatocell
, http://www.100md.com
ular/therapy killer cells, lymphokine-activated antineoplastic agents,
combined
Wang ZG, Zhang AL, Ding FQ,Liu GZ.Local transfusion of LAK cell with chemotherapy in the treatment of patients and advanced liver cancer with IDDS.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(8)：448-449
摘要
目的 探讨肝动脉门静脉输注自体LAK细胞在肝癌肝脏灌注化疗中的临床价值.
, 百拇医药
方法 病理证实的原发性肝癌患者92例，14例肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物，78例肝动脉门静脉输注化疗药物作为对照.
结果 自体LAK细胞加化疗组CR 6例，PR 6例，有效率85.7%；对照组CR 17例，PR 28例，有效率57.7%；两组间疗效有显著性差异
(P<0.05).
结论 肝动脉门静脉输注自体LAK细胞可以提高肝癌肝脏灌注化疗的效果，经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌的研究具有实际临床意义.
主题词 肝肿瘤/治疗;癌，肝细胞/治疗;杀伤细胞，淋巴因子激活;抗肿瘤药，多剂联用
, 百拇医药
王在国,张爱玲,丁福全,刘光中.经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌.新消化病学杂志，1996；4(8)：448-449
肝癌起病隐匿，进展快，临床可切除率仅10%-20%，放、化疗对肝癌治疗效果均不理想.随着生物高技术特别是细胞工程和基因工程技术的飞跃发展，生物治疗已迅速成为肿瘤治疗的第四大模式.经肝动脉输注LAK细胞治疗肝癌已取得较好的效果[1，2].我院1993年8月-1994年8月经肝动脉门静脉双途径输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌14例，近期疗效满意，现报告如下.
1 对象和方法
1.1 对象 自体LAK细胞及化疗药物肝动脉门静脉输注治疗组14例，均男性， 年龄40-64岁，Ⅱa期3例，Ⅱb期7例，Ⅲ期4例，全部病例均经病理诊断为原发性肝细胞性肝癌.以1990年7月-1993年7月我院肝动脉门静脉输注化疗药物治疗的78例中晚期肝癌作为历史对照组.全部患者经剖腹探查及肿瘤组织切取活检(单纯化疗组17例，LAK加化疗组6例，行肿瘤姑息性切除)后，经胃网膜右动、静脉分别插管至肝固有动脉、门静脉，将给药装置(四川康科公司生产MT-100型及陕西高科联生产KL-Ⅱ型)埋植于切口旁侧皮下备用.
, http://www.100md.com
1.2 自体LAK细胞液的制备 自体LAK细胞液由四川省肿瘤研究所制备，无菌条件下采取患者外周血液20ml(肝素抗凝),Ficoll密度梯度常规分离淋巴细胞；按2×106细胞/ml加入PHA至终浓度为25μg/ml，于37℃，5%CO2培养48h；收集细胞，用1640培养液离心洗2次；按0.5×106细胞/ml加入人天然IL-2至终浓度40μ/ml， 每隔2d换液，37℃，5% CO2培养，培养14d，收集细胞，用5%GNS离心洗2次，然后加入适量5% GNS，经2001m过筛后，再加5% GNS至100ml，封瓶立即使用；每隔24h，又收集细胞，按上述程序制备成自体LAK细胞液.每100ml自体LAK细胞液中，含自体LAK细胞1×109个，人天然IL-2 4000U及人体白蛋白1g，细胞杀伤活性按10∶1E/T反应大于40%.
1.3 方法 术后7-10d开始经肝动脉门静脉交替输注自体LAK细胞液，每次100ml，隔日1次，共5次为1个疗程(肝动脉3次，门静脉2次)；最后1次输注后3-4d，行肝脏灌注化疗，选用阿霉素50mg第1天肝动脉推注，丝裂霉素C 20mg第1天门静脉推注，氟脲嘧啶脱氧核苷1000mg 肝动脉(第1，5，9天)门静脉(第3,7天)滴注，28d为1个周期，连用2个周期为1个疗程(化疗方案与历史对照组一致).治疗前后检查血象、肝肾功、ECG，AFP值(放免法)及肿块变化情况(B超或CT)，治疗期间密切观察并及时处理毒性反应，1个疗程结束后评价疗效.根据肝区疼痛、肿瘤大小，AFP值的变化情况，按照全国肿瘤防治办公室和中国抗癌协会制定的标准[3]进行疗效判断.
, 百拇医药
2 结果
2.1 近期疗效 自体LAK细胞液加化疗药物治疗组CR 6例，PR 6例，NC 2例，有效率85.7%；历史对照组CR 17例，PR 28例，NC 33例，有效率57.7%.经过统计学处理，χ2=3.93，P<0.05，两组疗效间存在显著性差异.
2.2 副作用 ①自体LAK细胞毒性反应：四肢躯干荨麻疹3例，全身疼痛无力2例，发热(38℃-38.7℃, 12-24h自行恢复)2例，1例出现畏寒、寒颤及轻度呼吸窘迫，肌注非那根25mg后迅速缓解(该例效果也最好：肝内5个直径5-7cm肿块，治疗一个疗程后，肿块缩小至3-5cm，且绝大部分液化坏死，AFP由4800μg/L降至92μg/L，生存16个月后因上消化道大出血突然死亡).②化疗药物毒性反应：肝脏灌注化疗毒性反应轻微，根据WHO毒性分级标准，消化道毒性反应12例(1-2级)，骨髓抑制12例(1-2级)，脱发13例(1-2级)，无1例出现心肝肾功能损害.
, http://www.100md.com
3 讨论
通过输注免疫活性细胞，以达到治疗肿瘤目的的过继免疫治疗，是近年来生物治疗中最活跃的领域之一.LAK细胞是一种免疫活性细胞，它只杀伤肿瘤细胞，不杀伤正常细胞.将LAK细胞与IL-2联合应用并经肝动脉输注，可以明显提高LAK细胞疗效.曾有学者应用LAK细胞治疗10例肝癌，结果CR 2例，PR 4例，MR 2例，有效率80%.
肝癌由肝动脉门静脉双重供血.目前国内有关肝动脉门静脉插管双途径灌注化疗治疗中晚期肝癌的研究报告日益增多，报告的疗效也高低不等[4-7].我院经肝动脉门静脉插管化疗治疗78例中晚期肝癌，结果CR 17例，PR 28例，有效率57.7%；而经肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗14例中晚期肝癌，结果CR 6例，PR 6例，有效率85.7%.经统计学处理，肝动脉门静脉化疗组与肝动脉门静脉自体LAK细胞加化疗组的疗效有显著性差异(P<0.05)，表明肝动脉门静脉输注自体LAK细胞可以明显提高肝癌肝脏灌注化疗的效果.
, http://www.100md.com
经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注LAK细胞液及化疗药物，既能使肝脏获得高浓度的LAK细胞和化疗药物，因而提高治疗效果，同时又降低了全身毒副作用[2，7]；该装置还具有方便患者生活与护理工作，以及可反复穿刺使用等优点.因此，经埋植式给药装置肝动脉门静脉输注自体LAK细胞及化疗药物治疗中晚期肝癌的研究具有实际临床意义.
致谢：本研究得到四川省肿瘤研究所黄建鸣、谢之荣、邓碧芳的大力支持.
4 参考文献
1 李东复，葛焕琦，杨海山，等.LAK细胞肝动脉灌注与化疗栓塞联合应用治疗原发性肝癌14例.中华肿瘤杂志，1995；17(1)：59
2 周伟平，吴孟超，陈汉，等.肝癌切除加免疫化疗对术后复发的影响.中华外科杂志，1995；33(1)：35-37
, http://www.100md.com
3 全国肿瘤防办公室、中国抗癌协会合编.中国常见恶性肿瘤诊治规范.第二分册.原发性肝癌.北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合
出版社，1990：54-55
4 王在国，刘光中，曾令源，等.肝动脉门静脉双路插管化疗的并发症及其防治.实用癌症杂志，1994；9(4)：243-245
5 盛茂鑫，倪恿文，饶荣生主编.肝癌导管治疗与序贯切除进展.南昌：江西科技出版社，1994：253-256
6 万向荣.肝动脉门静脉双重插管化疗治疗晚期肝癌(附4例报告).中国肿瘤临床，1993；20(7)：557
7 王在国，仲渝民，丁福全，等.阿霉素肝动脉外周静脉注射的血药浓度变化观察.实用癌症杂志，1995；10(3)：175-176, 百拇医药(王在国 张爱玲 丁福全 刘光中)