美蓝染色法检查幽门螺杆菌的临床应用
1成都军区总医院干部病房 消化病区 四川省成都市 610083
2四川省邛崃市高何医院
曹忠铭，男，1943-06-26生，山西省祁县人，汉族.1967年第七军医大学医疗系毕业，主任医师，主要从事消化内科、消化内镜、老年病的诊治研究.现任四川省消化内镜学会副主任委员、消化内科学会委员和成都军区医学科学委员会委员、消化专业组副组长.发表学术论文50篇，编著《中国老年之宝》等三部专著，获科技进步奖15项，其中国家二等奖1项，军队三等奖3项，军队四等奖11项
项目负责人 曹忠铭,610083,四川省成都市,成都军区总医院干部病房消化病区
Tel: 028-6570408(办)，028-3571363(宅)
, http://www.100md.com
收稿日期 1995-09-09
Clinical application of methyleneblue stain in detection of Helicobacter pylori
Zhong-Ming Cao1, Hong-Zhi Luo1, Kuan-Yu Liu1, Song-Bin Yue1, Li Wang1,Hong-Bin Chen1, Hui Xu1, Wen-Zhi You1, Zhi-Yuan Chen1 and Ze-Min Jin2
, 百拇医药
General Hospital of Chinese PLA Chengdu Command Area, Chengdu 610083 Sichuan Province, China
Abstract
AIMS With a methyleneblue section-stain of the gastromucosal biopsy, the relation of Hp infection to the dyspepsia and the pathologic changes of gastromucosa, eg. chronic endogastritis, peptic ulcer etc was studied.
METHODS The gastroscopy and routine biopsy were completed in 32 patients without the symptoms and 476 with dyspepsia. Hp was detected with the methyleneblue section-stain of gastromucosal biopsy tissue simul tanenously. Detectable rate of Hp in asymptiomatic group was compared with that in each disease group.
, 百拇医药
RESULTS The methyleneblue stain was characterized by simplicity and effectiveness. Infectious rate of Hp recached 43.7% in asymptomatic group, and 85.7% with the chronic gastritis by gastromucosal biopsy in asymptomatic group, 6.3% with normality by gastromucosal biopsy. Detectable rates of Hp in patients with chronic gastritis and peptic ulcer were 54.4% and 48.9% respectiviely.
CONCLUSIONS Infection of Hp is related with gastritis, but not associated with dyspepsia. Infection of Hp could initiate gastromucosal pathologic change.
, 百拇医药
Subject headings Helicobacter pylori gastritis peptic ulcer dyspepsia stains and staining
Cao ZM, Luo HZ, Liu KY, Yue SB, Wang L, Chen HB, Xu H, You WZ, Chen ZY, Jin ZM.Clinical application of methyleneblue stain in detection of Helicobacter pylori.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(11)：615-616
摘要
目的 用自己设计的胃粘膜活检组织切片美蓝染色法检查Hp，研究Hp感染与消化不良等症状的关系，及Hp感染与胃粘膜慢性炎症、消化性溃疡等病理改变的关系.
, http://www.100md.com
方法 对32例无症状者及476例有消化不良等症状者在进行内镜检查及常规病理活检的同时，对组织切片行美蓝染色检查Hp，对无症状组及各疾病组的Hp检出率进行比较.
结果 美蓝染色方法简单，效果好. Hp感染在无症状人群中达43.7%，其中胃粘膜活检有慢性炎症改变者Hp检诊达85.7%；胃粘膜病理活检正常者Hp检出率为6.3%. 慢性胃炎及消化性溃疡的Hp检出率分别为54.5%及48.9%.
结论 Hp感染与镜下胃粘膜炎症改变相关而不一定有消化不良症状. Hp感染可引起慢性胃炎、消化性溃疡等胃粘膜病变.
主题词 螺杆菌，幽门;消化不良;胃炎;消化性溃疡;染剂和染色法
曹忠铭,罗洪志,刘宽宇,岳松滨,王丽,陈宏彬,徐辉,游文智,陈志远,金泽民.美蓝染色法检查幽门螺杆菌的临床应用.
, http://www.100md.com
新消化病学杂志，1996；4(11)：615-616
近年来国内外对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)及其在上胃肠道疾病中的作用研究相当活跃[1]，我们应用胃粘膜活检组织切片美蓝染色法检查Hp，并对508例有或无消化不良等上消化道症状人群进行观察.
1 对象和方法
1.1 对象 所有受试者均作内镜检查及病理活检(胃窦、胃角、胃体小弯侧各取1-3块，见明显病灶加取至少4块).无症状者32人(男30，女2；年龄18-48岁，平均21.0岁)，其中内镜和病理活检正常者14例(组Ⅰ)；内镜检查正常，病理活检有轻度或局限性慢性浅表型炎症者18例(组Ⅱ).有症状者系不经选择的内镜检查者476例(男334例，女142例；年龄18-75岁，平均47.7岁).
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 病理检查Hp方法 石蜡切片常规脱蜡入水.入0.03%美蓝溶液0.5-2min(视染液新旧而定).自来水清洗.常规脱水，透明，树胶封固.然后进行阅片.
1.2.2 Hp定量标准 全切片上无Hp为阴性；阳性者先低倍镜观察，选Hp最密集区域换油镜观察20个视野，平均每个油镜视野<20个Hp为
(+)，20-50个Hp为(++)，>50个为(+++).
2 结果
, http://www.100md.com
美蓝染色镜下观察Hp呈蓝色，胃粘膜上皮，胞浆及分泌物呈淡蓝色，固有膜、结缔组织呈深蓝色；Hp呈弯曲状，S状，短弧状及杆状，位于胃小凹或胃小凹分泌物中，亦可见于上皮胞浆中.Hp在各组的检出情况如表1.
表1 Hp的检出率
, http://www.100md.com
注：非器质性消化不良系有消化道症状，而内镜检查病理活检均正常，同时又排除其它疾病者.
Hp在胃内的分布：以CAG，CS-AG，CSG三组中Hp阳性者统计，以胃窦为主或仅胃窦有Hp者分别为57.4%，63.4%，72.6%.
3 讨论
在目前常用的Hp检查方法中，组织切片染色镜检以直观、准确、不需在病理活检以外加取组织而受到重视.可经典的Warthin-Starry银染色法操作繁琐，费时，技术较难掌握.为寻找操作容易，快速、准确的切片染色法，国内外学者均进行了不少探索.我们在实践中摸索出的美蓝染色法，经与尿素酶试验、细菌培养，Warthin-Starry银染色及HE染色进行了比较，认为其简捷方便，细菌与组织染色对比明显，用普通光学显微镜观察即可清晰地辨认出弯曲型及S型的Hp，值得推广应用.
, 百拇医药
在无症状人群中检出Hp国内外均有报道.杨海涛等[2]报道高达86.7%.有研究[3]发现在50岁以上的正常献血者中幽门螺杆菌抗体阳性者可达50%以上.Pettross等[4]与杨海涛等[2]均报告无症状而Hp阳性者病理检查大多有镜下的慢性炎症改变.本组在无症状人群中Hp的检出率为43.8%(14/32)，无症状而Hp阳性者中有镜下胃粘膜慢性炎症者达85.7%(12/14)，无症状而Hp又阴性者中有镜下胃粘膜慢性炎症者仅33.33%(6/18)，两者相比有显著性差异(P<0.05)，说明Hp的感染率相当普遍，即使无症状人群中亦达43.8%，而且Hp的感染与胃粘膜镜下慢性炎症改变相关.
本组在消化不良等上消化道症状的人群中Hp的检出率，慢性胃炎为54.5%，消化性溃疡为48.9%，两者与无症状组相比，P均>0.05；残胃炎及胃息肉的Hp检出率还低于无症状组，非器质性消化不良组则未能检出Hp.这些都说明消化不良等上消化道临床症状与Hp感染不必然相关.这些症状大多由胃肠道的炎症、溃疡、糜烂等器质性改变，以及胃肠运动功能不正常所引起.Hp虽然被认为是引起慢性胃炎及消化性溃疡的病因之一，可是单纯杀灭Hp并不能有助于缓解这些病的临床症状，必须配合其它诸如抑制胃酸或改善胃动力等药物治疗.本研究中内镜下胃粘膜活检病理正常者(包括无症状者Ⅰ组及非器质性消化不良组)共32例，而仅2例检出Hp，检出率为6.3%，以此与各慢性胃炎组及PU组之Hp检出率相比，P均<0.01，而在食管炎及食管癌中均未检出Hp.说明Hp与正常胃粘膜及食管粘膜不相关，而与各型胃炎，包括仅有镜下慢性炎症而无临床症状的胃炎，以及消化性溃疡等有病变的胃粘膜相关.从本组资料可以看出Hp在胃内感染的部位是以胃窦为甚，CG，CS-AG，CSG三组其胃窦Hp感染率分别占57.14%，63.41%，72.6%，且以中度感染(即)者为主，这正好与我国慢性胃窦炎发病率高相吻合，这又进一步证明了Hp是慢性胃炎及消化性溃疡发病原因之一的论点.
, 百拇医药
4 参考文献
1 张锦坤.胃幽门螺杆菌诊治进展.临床消化病杂志，1995；7(1)：30-34
2 杨海涛，周殿元，方国存，等.无症状者幽门螺杆菌感染的调查.中华内科杂志，1988；27(4)：208-209
3 Kosunen TU, Hk J, Rautelin HI, et al. Age-dependent increase of compylobacter pylori antibodies in blood donors.
Scand J Gastroenterol, 1989;24(1):110-114
4 Pettross CW, Appleman MD, Cohen H, et al. Prevalence of campylobacter pylori and association with antral mucosal histology
in subjects with and without upper gastrointestinal symptos. Dig Dis Sci, 1988;33(6):649-653, 百拇医药(曹忠铭1 罗洪志1 刘宽宇1 岳松滨1 王丽1 陈宏彬1 徐辉1 游文智1 )
2四川省邛崃市高何医院
曹忠铭，男，1943-06-26生，山西省祁县人，汉族.1967年第七军医大学医疗系毕业，主任医师，主要从事消化内科、消化内镜、老年病的诊治研究.现任四川省消化内镜学会副主任委员、消化内科学会委员和成都军区医学科学委员会委员、消化专业组副组长.发表学术论文50篇，编著《中国老年之宝》等三部专著，获科技进步奖15项，其中国家二等奖1项，军队三等奖3项，军队四等奖11项
项目负责人 曹忠铭,610083,四川省成都市,成都军区总医院干部病房消化病区
Tel: 028-6570408(办)，028-3571363(宅)
, http://www.100md.com
收稿日期 1995-09-09
Clinical application of methyleneblue stain in detection of Helicobacter pylori
Zhong-Ming Cao1, Hong-Zhi Luo1, Kuan-Yu Liu1, Song-Bin Yue1, Li Wang1,Hong-Bin Chen1, Hui Xu1, Wen-Zhi You1, Zhi-Yuan Chen1 and Ze-Min Jin2
, 百拇医药
General Hospital of Chinese PLA Chengdu Command Area, Chengdu 610083 Sichuan Province, China
Abstract
AIMS With a methyleneblue section-stain of the gastromucosal biopsy, the relation of Hp infection to the dyspepsia and the pathologic changes of gastromucosa, eg. chronic endogastritis, peptic ulcer etc was studied.
METHODS The gastroscopy and routine biopsy were completed in 32 patients without the symptoms and 476 with dyspepsia. Hp was detected with the methyleneblue section-stain of gastromucosal biopsy tissue simul tanenously. Detectable rate of Hp in asymptiomatic group was compared with that in each disease group.
, 百拇医药
RESULTS The methyleneblue stain was characterized by simplicity and effectiveness. Infectious rate of Hp recached 43.7% in asymptomatic group, and 85.7% with the chronic gastritis by gastromucosal biopsy in asymptomatic group, 6.3% with normality by gastromucosal biopsy. Detectable rates of Hp in patients with chronic gastritis and peptic ulcer were 54.4% and 48.9% respectiviely.
CONCLUSIONS Infection of Hp is related with gastritis, but not associated with dyspepsia. Infection of Hp could initiate gastromucosal pathologic change.
, 百拇医药
Subject headings Helicobacter pylori gastritis peptic ulcer dyspepsia stains and staining
Cao ZM, Luo HZ, Liu KY, Yue SB, Wang L, Chen HB, Xu H, You WZ, Chen ZY, Jin ZM.Clinical application of methyleneblue stain in detection of Helicobacter pylori.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(11)：615-616
摘要
目的 用自己设计的胃粘膜活检组织切片美蓝染色法检查Hp，研究Hp感染与消化不良等症状的关系，及Hp感染与胃粘膜慢性炎症、消化性溃疡等病理改变的关系.
, http://www.100md.com
方法 对32例无症状者及476例有消化不良等症状者在进行内镜检查及常规病理活检的同时，对组织切片行美蓝染色检查Hp，对无症状组及各疾病组的Hp检出率进行比较.
结果 美蓝染色方法简单，效果好. Hp感染在无症状人群中达43.7%，其中胃粘膜活检有慢性炎症改变者Hp检诊达85.7%；胃粘膜病理活检正常者Hp检出率为6.3%. 慢性胃炎及消化性溃疡的Hp检出率分别为54.5%及48.9%.
结论 Hp感染与镜下胃粘膜炎症改变相关而不一定有消化不良症状. Hp感染可引起慢性胃炎、消化性溃疡等胃粘膜病变.
主题词 螺杆菌，幽门;消化不良;胃炎;消化性溃疡;染剂和染色法
曹忠铭,罗洪志,刘宽宇,岳松滨,王丽,陈宏彬,徐辉,游文智,陈志远,金泽民.美蓝染色法检查幽门螺杆菌的临床应用.
, http://www.100md.com
新消化病学杂志，1996；4(11)：615-616
近年来国内外对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)及其在上胃肠道疾病中的作用研究相当活跃[1]，我们应用胃粘膜活检组织切片美蓝染色法检查Hp，并对508例有或无消化不良等上消化道症状人群进行观察.
1 对象和方法
1.1 对象 所有受试者均作内镜检查及病理活检(胃窦、胃角、胃体小弯侧各取1-3块，见明显病灶加取至少4块).无症状者32人(男30，女2；年龄18-48岁，平均21.0岁)，其中内镜和病理活检正常者14例(组Ⅰ)；内镜检查正常，病理活检有轻度或局限性慢性浅表型炎症者18例(组Ⅱ).有症状者系不经选择的内镜检查者476例(男334例，女142例；年龄18-75岁，平均47.7岁).
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 病理检查Hp方法 石蜡切片常规脱蜡入水.入0.03%美蓝溶液0.5-2min(视染液新旧而定).自来水清洗.常规脱水，透明，树胶封固.然后进行阅片.
1.2.2 Hp定量标准 全切片上无Hp为阴性；阳性者先低倍镜观察，选Hp最密集区域换油镜观察20个视野，平均每个油镜视野<20个Hp为
(+)，20-50个Hp为(++)，>50个为(+++).
2 结果
, http://www.100md.com
美蓝染色镜下观察Hp呈蓝色，胃粘膜上皮，胞浆及分泌物呈淡蓝色，固有膜、结缔组织呈深蓝色；Hp呈弯曲状，S状，短弧状及杆状，位于胃小凹或胃小凹分泌物中，亦可见于上皮胞浆中.Hp在各组的检出情况如表1.
表1 Hp的检出率
| 组别 | n(男 女) | Hp阴性 | Hp阳性 | 检出率 (%) | ||
| + | ++ | +++ | ||||
| 无症状组Ⅰ | 14(12 2) | 12 | 2 | 43.8 | ||
| 无症状组Ⅱ | 18(18 0) | 6 | 1 | 5 | 6 | |
| CAG | 84(67 17) | 35 | 17 | 21 | 11 | 58.3 |
| CS-AG | 127(86 41) | 43 | 21 | 47 | 16 | 66.1 |
| CSG | 142(91 51) | 81 | 24 | 27 | 10 | 43.0 |
| PU | 45(37 8) | 23 | 10 | 5 | 7 | 48.9 |
| 残胃炎 | 21(19 2) | 14 | 1 | 5 | 1 | 33.3 |
| 胃息肉 | 9(5 4) | 6 | 1 | 1 | 1 | 33.3 |
| 胃癌 | 13(11 2) | 12 | 1 | 7.7 | ||
| 非器质性消化不良 | 18 (9 9) | 18 | 0.0 | |||
| 食管炎 | 9(4 5) | 9 | 0.0 | |||
| 食管癌 | 8(5 3) | 8 | 0.0 |
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注：非器质性消化不良系有消化道症状，而内镜检查病理活检均正常，同时又排除其它疾病者.
Hp在胃内的分布：以CAG，CS-AG，CSG三组中Hp阳性者统计，以胃窦为主或仅胃窦有Hp者分别为57.4%，63.4%，72.6%.
3 讨论
在目前常用的Hp检查方法中，组织切片染色镜检以直观、准确、不需在病理活检以外加取组织而受到重视.可经典的Warthin-Starry银染色法操作繁琐，费时，技术较难掌握.为寻找操作容易，快速、准确的切片染色法，国内外学者均进行了不少探索.我们在实践中摸索出的美蓝染色法，经与尿素酶试验、细菌培养，Warthin-Starry银染色及HE染色进行了比较，认为其简捷方便，细菌与组织染色对比明显，用普通光学显微镜观察即可清晰地辨认出弯曲型及S型的Hp，值得推广应用.
, 百拇医药
在无症状人群中检出Hp国内外均有报道.杨海涛等[2]报道高达86.7%.有研究[3]发现在50岁以上的正常献血者中幽门螺杆菌抗体阳性者可达50%以上.Pettross等[4]与杨海涛等[2]均报告无症状而Hp阳性者病理检查大多有镜下的慢性炎症改变.本组在无症状人群中Hp的检出率为43.8%(14/32)，无症状而Hp阳性者中有镜下胃粘膜慢性炎症者达85.7%(12/14)，无症状而Hp又阴性者中有镜下胃粘膜慢性炎症者仅33.33%(6/18)，两者相比有显著性差异(P<0.05)，说明Hp的感染率相当普遍，即使无症状人群中亦达43.8%，而且Hp的感染与胃粘膜镜下慢性炎症改变相关.
本组在消化不良等上消化道症状的人群中Hp的检出率，慢性胃炎为54.5%，消化性溃疡为48.9%，两者与无症状组相比，P均>0.05；残胃炎及胃息肉的Hp检出率还低于无症状组，非器质性消化不良组则未能检出Hp.这些都说明消化不良等上消化道临床症状与Hp感染不必然相关.这些症状大多由胃肠道的炎症、溃疡、糜烂等器质性改变，以及胃肠运动功能不正常所引起.Hp虽然被认为是引起慢性胃炎及消化性溃疡的病因之一，可是单纯杀灭Hp并不能有助于缓解这些病的临床症状，必须配合其它诸如抑制胃酸或改善胃动力等药物治疗.本研究中内镜下胃粘膜活检病理正常者(包括无症状者Ⅰ组及非器质性消化不良组)共32例，而仅2例检出Hp，检出率为6.3%，以此与各慢性胃炎组及PU组之Hp检出率相比，P均<0.01，而在食管炎及食管癌中均未检出Hp.说明Hp与正常胃粘膜及食管粘膜不相关，而与各型胃炎，包括仅有镜下慢性炎症而无临床症状的胃炎，以及消化性溃疡等有病变的胃粘膜相关.从本组资料可以看出Hp在胃内感染的部位是以胃窦为甚，CG，CS-AG，CSG三组其胃窦Hp感染率分别占57.14%，63.41%，72.6%，且以中度感染(即)者为主，这正好与我国慢性胃窦炎发病率高相吻合，这又进一步证明了Hp是慢性胃炎及消化性溃疡发病原因之一的论点.
, 百拇医药
4 参考文献
1 张锦坤.胃幽门螺杆菌诊治进展.临床消化病杂志，1995；7(1)：30-34
2 杨海涛，周殿元，方国存，等.无症状者幽门螺杆菌感染的调查.中华内科杂志，1988；27(4)：208-209
3 Kosunen TU, Hk J, Rautelin HI, et al. Age-dependent increase of compylobacter pylori antibodies in blood donors.
Scand J Gastroenterol, 1989;24(1):110-114
4 Pettross CW, Appleman MD, Cohen H, et al. Prevalence of campylobacter pylori and association with antral mucosal histology
in subjects with and without upper gastrointestinal symptos. Dig Dis Sci, 1988;33(6):649-653, 百拇医药(曹忠铭1 罗洪志1 刘宽宇1 岳松滨1 王丽1 陈宏彬1 徐辉1 游文智1 )