乐胃煎逆转胃癌前病变AgNOR及细胞图像分析
1南京医科大学第一附属医院消化科 江苏省南京市 210029
2上海中医药大学附属曙光医院
项目负责人 郜恒骏,南京医科大学第一附属医院消化科 江苏省南京市 210029
收稿日期: 1995-12-12 接受日期 1996-05-01
Quantitative study of AgNOR and cellular image analysis in gastric precancerous lesions treated with Le Wei Jian
Gao Heng-Jun1, Cai Gan2 and Cheng Yong2
, http://www.100md.com
1Department of Gastroenterology, the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing 210029, China
2Department of Internal Medicine, Shuguang Hospital, Shanghai University o f TCM
Subject headings Stomach neoplasms/zhong yi yao liao faAntineoplastic agents (TCD)/pharmacology;Precancerous conditions/zhong yi ya
o liao fa
, 百拇医药
Abstract AIM To study the effect of Le Wei Jian in the treatment of gastric precancerous lesions incomplete colonic metaplasia and/or moderate dyspla sia.
METHODS The effect of Le Wei Jian was compared with that of De Nol in 46 patients with endoscopically and pathologically confirmed incomplete colonic metaplasia and/or moderate dysplasia. 30 patients were treated with Le Wei Jain, and 16 with DeNol. AgNOR and cellular image analysis were studied before and after treatment.
, 百拇医药
RESULTS Le Wei Jian had a higher recovery rate of incomplete colonic metaplasia (72% vs 25%, P<0.05)and moderate dysplasia (89.5% vs 44.4%, P<0.05). In Le Wei Jian group before and after treatment, AgNOR was 7.30±1.16 and 4.81±1.50 (P<0.01), and in De-Nol group, it was 7.73±0.92 and 7.05±1.02 (P<0.01). Cellular image analysis was performed for 20 cases in Le Wei Jian group. After treatment, most of the parameters were significantly improved.
, 百拇医药
CONCLUSION Le Wei Jian has absolute advantages in the treatment of gastric precancerous lesions.
Gao HJ, Cai G,Cheng Y.Quantitative study of AgNOR and cellular image analysisingastric precancerous lesions treated with Le Wei Jian.Xin XiaohuabingxueZazhi,1997；5(3)：150-151
摘要
目的 研究乐胃煎逆转胃┣安”洳煌耆岢π统或中度异型增生的疗效.
方法 胃镜病理证实为不完全结肠型肠化和/或中度异型增生46例.治疗组30例用乐胃煎，对照组16例用德诺(De_Nol).治疗前后胃镜活检胃窦固定部位粘膜标本作AgNOR染色及细胞图像分析.
, 百拇医药
结果 乐胃煎对不完全结肠型肠化及中度异型增生总有效率均高于De_Nol，分别为72%比25%(P<0.05)和89.5%比44.4% (P<0.05).乐胃煎治疗前后，AgNOR计数分别为7.30±1.16和4.81±1.50 (P<0.01)，De_Nol组为7.73±0.92和7.05±1.02 (P<0.01).两组治疗前后AgNOR计数差值均数相比，统计学上也有显著性差异，分别为2.52±1.54和0.69±0.48 (P<0.01).乐胃煎组中20例作细胞图像分析，治疗后各参数(长轴、短轴、核浆比、结构异型指数等)均有不同程度的降低，有显著性差异.
结论 乐胃煎确有较好地逆转胃癌前病变的功效.
主题词 胃肿瘤/中医药疗法；抗肿瘤药[剂](中药)/药理学；癌前状态/中医药疗法
郜恒骏,蔡淦,程勇.乐胃煎逆转胃癌前病变AgNOR及细胞图像分析.新消化病学杂志,1997；5(3)：150-151
, 百拇医药
近年来，大量研究表明含有大量硫酸粘液的不完全结肠型肠化(ICM)及中、重度异型增生(DYS)为重要的胃癌前病变(GPL)与胃癌关系密切.本研究应用中药制剂乐胃煎(LWJ)治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)伴ICM和/或DYS，通过治疗前后胃粘膜组织的AgNOR染色、计数及细胞图像分析(CIA)技术，客观地评价其逆转效果.
1 材料和方法1.1 材料 病例由蔡淦门诊收集，内镜检查由专人定位操作，于胃窦前后壁、大小弯侧距幽门口1cm 钳取4块.行HE染色、PAS_AB _HID染色.病理诊断由主任医师确立.将CAG，ICM，DYS分为轻、中、重3度[1].幽门螺杆菌(Hp)检查由内镜活检组织CLO test结合病理(甲苯胺蓝法).对确诊CAG伴ICM和/或中度DYS46例患者分别予两种治疗，30例用LWJ，16例用De_Nol，并设立专卡，定期(一般14d)复诊，记录临床表现的改变，疗程结束后复查内镜病理. 两组治疗前一般情况及病理诊断相似(P>0.05，表1，2).
, http://www.100md.com
表1 LWJ及De_Nol组治疗前一般情况
表2 LWJ及De_Nol组治疗前病理诊断
, http://www.100md.com
1.2 药物疗程 LWJ(党参10g，白术10g，茯苓12g， 甘草6g，川莲3g，蒲公英30g，白花蛇舌草30g，甘松6g，莪术15g，炙甲片10g)每瓶500ml(1100g)(曙光医院制剂中心据蔡淦教授经验方研制)，每次30ml，早晚饭前30min两次口服，每疗程6月.De_Nol(Gist_Borcades药厂、荷兰)每次240mg，服法同上，每疗程2个月. 治疗期间停用其它胃药.两组均无严重心肝肾及关节疾病需长期用药的.
1.3 实验方法 AgNOR盒(上海虹桥医学试剂实验研究所，批号930875)，按常规步骤染色.在油镜下观察并计数.细胞核呈淡黄色，AgNOR呈棕黑色小粒，位于细胞核内或核仁内，每个标本随机地于病灶内选择100个完整、清晰、无重叠的细胞作AgNOR计数，然后除以100，则为平均数.CIA系统(VIDAS， OPTON，Conpany， Germany)(上海第二医科大学细胞、分子生物学教研室协助).LWJ组20例(治疗前后40张)作此检查.每张切片选择3～6个腺体，输入CIA系统，分别测定出FSHAPE、FCIRCLE，ELLIPSER(long axle)，ELLIPSEB(short axle)，RATIO1(nucleus to cytoplasm ratio)， RATIO2(structure atypical index)，AREA2(area of nuclear)，AREA1(area of cytoplasm)，打印出结果，均取其平均值进行分析.
, 百拇医药
1.4 疗效标准[1] 显效：临床症状消失或基本消失；病理复查活动性炎症基本消失，慢性炎症好转；CAG、ICM、DYS恢复正常或减轻达2个级差以上(含2个级差).有效：临床症状明显减轻；病理复查炎症有所减轻；CAG、ICM、DYS减轻达1个级差.无效：达不到有效的标准，而未恶化者. 加重：临床症状及内镜复查较前加重.统计学分析：临床总有效率、病理疗效用Ridit统计分析，CIA各指标分析及AgNOR 数分析用t检验.
2 结果 2.1 临床总有效率及病理疗效的比较 综合疗效评定标准，LWJ组治疗显效12例，有效15例，无效2例，加重1例，总有效率90%，De_Nol组分别为5，9，1，1，87.5%(P>0.05).LWJ及De_Nol对CAG总有效率分别为83.3%和75%(P>0.05).对ICM及DYS，两组总有效率相比均有显著性差异.分别为ICM：72%，25%；DYS89.5%，44.4%(P均<0.05).LWJ优于De_Nol.两组Hp清除率分别为76.5%，77.8%.
, http://www.100md.com
2.2 治疗前后LWJ及De_Nol组AgNOR数的比较 LWJ及De_Nol组治疗后AgNOR数均显著降低，分别为t=8.95，P<0.01；t=3. 07，P<0.01.对两组治疗前后差值均数作t检验也有显著性差异，分别为2.52±1.54，0.69±0.48(t=4.36，P<0.01)，说明LWJ比De_Nol更有效地降低AgNOR(表3).
表3 LWJ及De_Nol组治疗前后AgNOR比较
, 百拇医药
bP<0.01，治疗前后及两组间比较.
2.3 胃粘膜组织的CIA LWJ组20例治疗前后粘膜标本作CIA，大部分参数于治疗后显著降低(表4).
表4 LWJ组20例治疗前后CIA的改变 (x-±s)
, 百拇医药
aP<0.05，bP<0.01.
3 讨论 本研究发现LWJ在改善临床症状、逆转CAG、清除Hp方面均有较好的疗效，与De_Nol相比无显著差异.但对ICM及DYS明显优于De_Nol，分别为ICM 72%，25%(P<0.05)；DYS 89.5%，44.4%(P<0.05).另外，从AgNOR，CIA研究也客观地证实LWJ有更好的逆转GPL之功效.研究发现，LWJ及De_Nol治疗前后AgNOR数均显著降低，P均<0.01. 对两组治疗前后差值均数作t检验也有显著性差异(P<0.01)，说明LWJ更有效地纠正细胞的异常分化. ICM分化不成熟，组织结构与细胞形态有异型性.DYS主要表现为细胞异型、结构紊乱、分化异常.近年来，形态测量学有了迅速发展，用形态测量描述组织细胞的形态变化，避免了光镜主观因素的影响，较客观地反映组织形态学特征[2].CIA测量指标主要有长轴、短轴、核浆比、结构异型指数、核面积、浆面积、形态因子等，这些测量值随 病变程度加重而递增[3].我们对LWJ中20例治疗前后粘膜标本作CIA，大部分参数治疗后显著降低(表4)，进一步证实LWJ可有效地改善组织细胞的异型性，纠正组织结构紊乱与分化异常.至于LWJ递转GPL的分子机理有待进一步研究.
4 参考文献1 陈贵廷，杨思澍.实用中西医结合诊断治疗学.北京：中国医药科技出版社，1991：432-433
2 Collan Y. Application of morphometry in tumor pathology. Analyt Quant Cytol Histol, 1987;9(2):79-80
3 邵雪，雷道年.形态测量对胃粘膜异型增生及胃癌的分级与诊断研究.中华病理杂志，1990；19(4)：259-260, 百拇医药
2上海中医药大学附属曙光医院
项目负责人 郜恒骏,南京医科大学第一附属医院消化科 江苏省南京市 210029
收稿日期: 1995-12-12 接受日期 1996-05-01
Quantitative study of AgNOR and cellular image analysis in gastric precancerous lesions treated with Le Wei Jian
Gao Heng-Jun1, Cai Gan2 and Cheng Yong2
, http://www.100md.com
1Department of Gastroenterology, the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing 210029, China
2Department of Internal Medicine, Shuguang Hospital, Shanghai University o f TCM
Subject headings Stomach neoplasms/zhong yi yao liao faAntineoplastic agents (TCD)/pharmacology;Precancerous conditions/zhong yi ya
o liao fa
, 百拇医药
Abstract AIM To study the effect of Le Wei Jian in the treatment of gastric precancerous lesions incomplete colonic metaplasia and/or moderate dyspla sia.
METHODS The effect of Le Wei Jian was compared with that of De Nol in 46 patients with endoscopically and pathologically confirmed incomplete colonic metaplasia and/or moderate dysplasia. 30 patients were treated with Le Wei Jain, and 16 with DeNol. AgNOR and cellular image analysis were studied before and after treatment.
, 百拇医药
RESULTS Le Wei Jian had a higher recovery rate of incomplete colonic metaplasia (72% vs 25%, P<0.05)and moderate dysplasia (89.5% vs 44.4%, P<0.05). In Le Wei Jian group before and after treatment, AgNOR was 7.30±1.16 and 4.81±1.50 (P<0.01), and in De-Nol group, it was 7.73±0.92 and 7.05±1.02 (P<0.01). Cellular image analysis was performed for 20 cases in Le Wei Jian group. After treatment, most of the parameters were significantly improved.
, 百拇医药
CONCLUSION Le Wei Jian has absolute advantages in the treatment of gastric precancerous lesions.
Gao HJ, Cai G,Cheng Y.Quantitative study of AgNOR and cellular image analysisingastric precancerous lesions treated with Le Wei Jian.Xin XiaohuabingxueZazhi,1997；5(3)：150-151
摘要
目的 研究乐胃煎逆转胃┣安”洳煌耆岢π统或中度异型增生的疗效.
方法 胃镜病理证实为不完全结肠型肠化和/或中度异型增生46例.治疗组30例用乐胃煎，对照组16例用德诺(De_Nol).治疗前后胃镜活检胃窦固定部位粘膜标本作AgNOR染色及细胞图像分析.
, 百拇医药
结果 乐胃煎对不完全结肠型肠化及中度异型增生总有效率均高于De_Nol，分别为72%比25%(P<0.05)和89.5%比44.4% (P<0.05).乐胃煎治疗前后，AgNOR计数分别为7.30±1.16和4.81±1.50 (P<0.01)，De_Nol组为7.73±0.92和7.05±1.02 (P<0.01).两组治疗前后AgNOR计数差值均数相比，统计学上也有显著性差异，分别为2.52±1.54和0.69±0.48 (P<0.01).乐胃煎组中20例作细胞图像分析，治疗后各参数(长轴、短轴、核浆比、结构异型指数等)均有不同程度的降低，有显著性差异.
结论 乐胃煎确有较好地逆转胃癌前病变的功效.
主题词 胃肿瘤/中医药疗法；抗肿瘤药[剂](中药)/药理学；癌前状态/中医药疗法
郜恒骏,蔡淦,程勇.乐胃煎逆转胃癌前病变AgNOR及细胞图像分析.新消化病学杂志,1997；5(3)：150-151
, 百拇医药
近年来，大量研究表明含有大量硫酸粘液的不完全结肠型肠化(ICM)及中、重度异型增生(DYS)为重要的胃癌前病变(GPL)与胃癌关系密切.本研究应用中药制剂乐胃煎(LWJ)治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)伴ICM和/或DYS，通过治疗前后胃粘膜组织的AgNOR染色、计数及细胞图像分析(CIA)技术，客观地评价其逆转效果.
1 材料和方法1.1 材料 病例由蔡淦门诊收集，内镜检查由专人定位操作，于胃窦前后壁、大小弯侧距幽门口1cm 钳取4块.行HE染色、PAS_AB _HID染色.病理诊断由主任医师确立.将CAG，ICM，DYS分为轻、中、重3度[1].幽门螺杆菌(Hp)检查由内镜活检组织CLO test结合病理(甲苯胺蓝法).对确诊CAG伴ICM和/或中度DYS46例患者分别予两种治疗，30例用LWJ，16例用De_Nol，并设立专卡，定期(一般14d)复诊，记录临床表现的改变，疗程结束后复查内镜病理. 两组治疗前一般情况及病理诊断相似(P>0.05，表1，2).
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表1 LWJ及De_Nol组治疗前一般情况
| 分组 | n | 性别 | 年龄(岁) | 病程 | |||
| 男 | 女 | 范围 | x±s | 范围(月-年) | x±s | ||
| LWJ | 30 | 19 | 11 | 30～70 | 51.0±11.3 | 2～32 | 13.1±8.7 |
| De_Nol | 16 | 11 | 5 | 31～67 | 47.26±10.3 | 3～30 | 9.2±7.4 |
表2 LWJ及De_Nol组治疗前病理诊断
| 分组 | n | CAG | ICM | DYS | Hp | ||||||
| n1 | + | ++ | +++ | n2 | + | ++ | +++ | n3(++) | 阳性 | ||
| LWJ | 30 | 30 | 5 | 14 | 11 | 25 | 4 | 14 | 7 | 19 | 17 |
| De_Nol | 16 | 16 | 3 | 7 | 6 | 12 | 3 | 6 | 3 | 9 | 9 |
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1.2 药物疗程 LWJ(党参10g，白术10g，茯苓12g， 甘草6g，川莲3g，蒲公英30g，白花蛇舌草30g，甘松6g，莪术15g，炙甲片10g)每瓶500ml(1100g)(曙光医院制剂中心据蔡淦教授经验方研制)，每次30ml，早晚饭前30min两次口服，每疗程6月.De_Nol(Gist_Borcades药厂、荷兰)每次240mg，服法同上，每疗程2个月. 治疗期间停用其它胃药.两组均无严重心肝肾及关节疾病需长期用药的.
1.3 实验方法 AgNOR盒(上海虹桥医学试剂实验研究所，批号930875)，按常规步骤染色.在油镜下观察并计数.细胞核呈淡黄色，AgNOR呈棕黑色小粒，位于细胞核内或核仁内，每个标本随机地于病灶内选择100个完整、清晰、无重叠的细胞作AgNOR计数，然后除以100，则为平均数.CIA系统(VIDAS， OPTON，Conpany， Germany)(上海第二医科大学细胞、分子生物学教研室协助).LWJ组20例(治疗前后40张)作此检查.每张切片选择3～6个腺体，输入CIA系统，分别测定出FSHAPE、FCIRCLE，ELLIPSER(long axle)，ELLIPSEB(short axle)，RATIO1(nucleus to cytoplasm ratio)， RATIO2(structure atypical index)，AREA2(area of nuclear)，AREA1(area of cytoplasm)，打印出结果，均取其平均值进行分析.
, 百拇医药
1.4 疗效标准[1] 显效：临床症状消失或基本消失；病理复查活动性炎症基本消失，慢性炎症好转；CAG、ICM、DYS恢复正常或减轻达2个级差以上(含2个级差).有效：临床症状明显减轻；病理复查炎症有所减轻；CAG、ICM、DYS减轻达1个级差.无效：达不到有效的标准，而未恶化者. 加重：临床症状及内镜复查较前加重.统计学分析：临床总有效率、病理疗效用Ridit统计分析，CIA各指标分析及AgNOR 数分析用t检验.
2 结果 2.1 临床总有效率及病理疗效的比较 综合疗效评定标准，LWJ组治疗显效12例，有效15例，无效2例，加重1例，总有效率90%，De_Nol组分别为5，9，1，1，87.5%(P>0.05).LWJ及De_Nol对CAG总有效率分别为83.3%和75%(P>0.05).对ICM及DYS，两组总有效率相比均有显著性差异.分别为ICM：72%，25%；DYS89.5%，44.4%(P均<0.05).LWJ优于De_Nol.两组Hp清除率分别为76.5%，77.8%.
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2.2 治疗前后LWJ及De_Nol组AgNOR数的比较 LWJ及De_Nol组治疗后AgNOR数均显著降低，分别为t=8.95，P<0.01；t=3. 07，P<0.01.对两组治疗前后差值均数作t检验也有显著性差异，分别为2.52±1.54，0.69±0.48(t=4.36，P<0.01)，说明LWJ比De_Nol更有效地降低AgNOR(表3).
表3 LWJ及De_Nol组治疗前后AgNOR比较
| 分组 | n | AgNOR(x±s) | |
| 治疗前 | 治疗后 | ||
| LWJ | 30 | 7.30±1.16 | 4.18±1.50b |
| De_Nol | 16 | 7.73±0.92 | 7.05±1.02 |
, 百拇医药
bP<0.01，治疗前后及两组间比较.
2.3 胃粘膜组织的CIA LWJ组20例治疗前后粘膜标本作CIA，大部分参数于治疗后显著降低(表4).
表4 LWJ组20例治疗前后CIA的改变 (x-±s)
| 参数 | 治疗前 | 治疗后 |
| FCIRCLE | 0.797±0.051 | 0.788±0.062 |
| FSHRPE | 0.694±0.099 | 0.744±0.100 |
| ELLIPSER(μm) | 82.217±27.061 | 62.426±17.694b |
| ELLIPSEB(μm) | 57.061±15.582 | 46.035±12.212a |
| RATIO1(%) | 23.114±6.230 | ]15.745±4.973b |
| RATIO2(%) | 80.752±38.659 | 56.915±23.514b |
| AREA1(μm2) | 3141.576±1714.232 | 1881.459±1190.026a |
| AREA2(μm2) | 760.269±679.910 | 322.3694±233.937a |
| AREP(%) | 42.430±12.250 | 34.780±0.0345a |
, 百拇医药
aP<0.05，bP<0.01.
3 讨论 本研究发现LWJ在改善临床症状、逆转CAG、清除Hp方面均有较好的疗效，与De_Nol相比无显著差异.但对ICM及DYS明显优于De_Nol，分别为ICM 72%，25%(P<0.05)；DYS 89.5%，44.4%(P<0.05).另外，从AgNOR，CIA研究也客观地证实LWJ有更好的逆转GPL之功效.研究发现，LWJ及De_Nol治疗前后AgNOR数均显著降低，P均<0.01. 对两组治疗前后差值均数作t检验也有显著性差异(P<0.01)，说明LWJ更有效地纠正细胞的异常分化. ICM分化不成熟，组织结构与细胞形态有异型性.DYS主要表现为细胞异型、结构紊乱、分化异常.近年来，形态测量学有了迅速发展，用形态测量描述组织细胞的形态变化，避免了光镜主观因素的影响，较客观地反映组织形态学特征[2].CIA测量指标主要有长轴、短轴、核浆比、结构异型指数、核面积、浆面积、形态因子等，这些测量值随 病变程度加重而递增[3].我们对LWJ中20例治疗前后粘膜标本作CIA，大部分参数治疗后显著降低(表4)，进一步证实LWJ可有效地改善组织细胞的异型性，纠正组织结构紊乱与分化异常.至于LWJ递转GPL的分子机理有待进一步研究.
4 参考文献1 陈贵廷，杨思澍.实用中西医结合诊断治疗学.北京：中国医药科技出版社，1991：432-433
2 Collan Y. Application of morphometry in tumor pathology. Analyt Quant Cytol Histol, 1987;9(2):79-80
3 邵雪，雷道年.形态测量对胃粘膜异型增生及胃癌的分级与诊断研究.中华病理杂志，1990；19(4)：259-260, 百拇医药