结直肠癌树突状细胞浸润及癌周淋巴细胞反应与预后的关系
1中山医科大学附属第一医院消化内科 广东省广州市 510080
2中山医科大学孙逸仙纪念医院
项目负责人 刘思纯.中山医科大学附属第一医院消化内科 广东省广州市 510080收搞日期 1995-09-10 接收日期 1996-01-15
Relationship between infiltration of dendritic cells, pericancerous lymphocytic reaction and prognosis in colorectal carcinomas
Liu Si-Chun and Shi-Zhen Yuan
, http://www.100md.com
Department of Gastroenterology, First Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University of Medical Sciences, Guangzhou 510080, China
AbstractAIM To study the relationship between dendritic cells (DC), pericancerous lymphocytic reaction and the prognosis in colorectal carcinomas.
METHODS This study was based on tissues from 71 patients with c olorectal carcinomas treated surgically from 1980 to 1987. All patients were fol lowed up for over 5 years. The tumor tissues were examined by ABC immunohistoche mical method using S100 protein antibody and DC was counted.
, 百拇医药
RESULTS The patients who survived over 5 years had significantl y higher DC number in situ than those who survived less than 5 years (57.67/mm3±13.38/mm3 vs 30.59/mm3±9.31/mm3, P<0.01). The degree of pericancerous lymphocytic reation was closely related to DC infil tration density and the 5-year survival rate.
CONCLUSION DC infiltration density and the degree of pericance rous lymphocytic reaction were the markers of host immune response against tumor , and were good indicators in assessing prognosis.
, 百拇医药
Subject headings Colorectal neoplasms/pathology\ \ Dentritic cells/pathology\ \ Neoplasms invasiveness\ \ Lymphocytes
Liu SC,Yuan SZ.Relationship between infiltration of dendritic cells, pericancerous lymphocytic reaction and prognosis in colorectal carcinomas.Xin Xiaohuabingxue Zazhi, 1997；5(3)：156-157
摘 要目的 研究结直肠癌树突状细胞(DC)浸润和癌周淋巴细胞反应的关系及对预后的影响.
, 百拇医药
方法 1980年～1987年结直肠癌手术71例，均有随访记录，癌及癌周组织 采用S-100蛋白抗体ABC免疫组化染色，行DC计数.
结果 术后生存期≥5年者癌组织DC数量(57.67/mm3±13.38/mm3)明显高于<5年者(30.59/mm3±9.31/mm3) (P<0.01).癌周淋巴细胞反应强度 和癌组织DC浸润密度及5年生存率密切相关.
结论 结直肠癌癌组织DC浸润密度和癌周淋巴细胞反应强度反映了机体抗 肿瘤免疫力，是估计预后的良好指标.
主题词 结肠直肠肿瘤/病理学;树突细胞/病理学;肿瘤浸润;淋 巴细胞
, http://www.100md.com
刘思纯,袁世珍.结直肠癌树突状细胞浸润及癌周淋巴细胞反应与预后的关系.新消化病学杂志, 1997；5(3)：156-157
免疫病理学的研究认为结直肠癌癌周淋巴细胞的浸润是宿主对肿瘤免疫反应的一个方面，对预后有一定影响.T细胞是肿瘤浸润性淋巴细胞的主要成分，而T细胞的激活需要抗原提呈细胞(APC)的辅佐.目前认为体内主要的APC是树突状细胞(DC)[1].近年发现某些恶性肿瘤的预后和肿瘤组织DC的浸润密度有关[2]，但尚缺乏大肠癌和DC间关系的类似报道.作者采用S-100蛋白抗体ABC免疫组化方法，定量检测结直肠癌原位DC，同 时观察癌周淋巴细胞反应，以期研究DC与癌周淋巴细胞反应的关系及对预后的影响.
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 收集本院1980年～1987年资料完整的结直肠癌手术标本71例.男42例，女29例；年龄17岁～ 88岁，平均51.9岁.术后均有随访，术后生存时间<5年者36例，≥5年者35例，5年生存率49.3%，其中15例存活已超过10年.全部患者术前、术后均未接受过放疗及系统化疗.71例行根治性手术59例，姑息性手术12例 .全部标本的HE切片经复习，结直肠癌的病理学分类(包括癌周淋巴细胞反应程度)按《中国 常见恶性肿瘤诊治规范，第3分册，大肠癌》的标准诊断[3].
1.2 免疫组化染色 以ABC法检测DC.S_100蛋白抗体购自Dako公司，第2抗体和ABC液为Vector实验室产品.设立阳性及阴性对照以确立染色特异性.DC计数：计数相当于粘膜下层深度的癌组 织，选择阳性DC密集区，在光镜高倍镜下取10个视野，用显微测微尺进行计数.以细胞个数/mm2为单位. 统计方法 采用t及F检验和卡方检验.
, 百拇医药
2 结果
2.1 DC分布 DC呈S-100蛋白阳性反应，胞核胞浆均着色，细胞形态不规则，表面有树突状突起.在癌组织，DC区域性分布于间质中，常和淋巴细胞相伴浸 润形成细胞簇.在癌灶可见DC树突和周围癌细胞紧密接触，环抱癌细胞(图1，2).
2.2 癌组织DC数和预后 术后生存期≥5年和<5年的两组病例癌组织DC数量分别为57.67/mm2±13.38/mm2和30.59/mm2±9.31/mm/2，差异有显著性意义(P<0.01).在具备同一种病理因素 的患者中，不同生存期者癌组织DC数量差异仍有显著性差异(表1).癌周淋巴细胞反应和DC数量及预后的关系(表2).
表1 结直肠癌病理因素、生存期与DC数量
, http://www.100md.com
bP<0.01，与<5年组比较.
表2 结直肠癌癌周淋巴细胞反应和DC数量及预后关系
aP<0.05，和(-)组比较；bP<0.01，各组间比较.
, http://www.100md.com
图1 结直肠高分化腺癌，DC成簇分布和淋巴细胞及癌细胞紧密接触 ABC×200
图2 结直肠中分化腺癌，DC成簇，包绕癌细胞 ABC×200
3 讨论近年来的免疫学及病理学的研究已证实DC是体内主要的APC，S-100蛋白是DC的细胞内标志 [4].多数文献报道，DC浸润密度和患者生存率呈正相关[2，4].本实验结果示，术后生存期≥5年的结直肠癌患者癌组织DC数量明显高于生存期<5年者，和Ambe等 [4]的结果一致.在具备同一种病理因素的患者中，生存期不同者其癌组织DC数量 差异也有显著性，表明结直肠癌癌组织DC数量可作为估计预后的一项指标.本结果还表明， 结直肠癌癌组织DC数量的变化和癌周淋巴细胞反应强度有关，在癌周淋巴细胞反应低下时， 癌组织DC减少，随着癌周淋巴细胞反应的增强，癌组织DC明显增加.在对5年生存率的分析中也发现这种相关性，癌周淋巴细胞反应较强时 ，DC增加，5年生存率明显增高.提示癌周淋巴细胞反应和癌组织DC浸润对预后的影响作用 是一致的.
, 百拇医药
DC可以识别肿瘤特异性抗原，提呈抗原给T细胞，和T细胞发生聚集，促发一系列的免疫反应 ，活化的肿瘤特异T细胞就大量浸润，以细胞毒作用杀伤肿瘤细胞[4]. 故DC在癌组织的浸润程度代表了机体抗肿瘤免疫反应的一个方面.本文所观察到的结直肠 癌组织DC的形态和分布特征及和癌周淋巴细胞反应的关系为DC能借助其突起直接摄取肿瘤抗原并发挥抗原提呈作用提供了形态学依据.在抗肿瘤免疫中，这两种免疫反应密切相关，协同作用.定量检测癌组织DC和观察癌周淋巴细胞反应，可以更好地估计机体 抗肿瘤免疫力及预测患者预后.
4 参考文献1 Young JW, Sleinman RM. Dendritic cells stimulate primary human cytoly tic lymphocyte resposes in the absence of
, 百拇医药
CD4 + helper T cells. J Exp Med, 1990;171(4):1315-1332
2 Kakeji Y, Maehara Y, Korenga D, et al. Prognostic significance of tumor_h ost interaction in clinical gastric cancer:
relationship between DNA ploidy and dendritic cell infiltration. J Surg Oncol,1993;52(4):207-212
3 全国肿瘤防治办公室、中国抗癌协会合编.中国常见恶性肿瘤诊治规范.第3分册.大肠癌.北京：
北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1990：11-23
4 Ambe K, Mori M, Enjoji M. S_100 protein_positive dendritic cells in colorect al adenocarcinoma. Distribution and relation
to the clinical prognosis. Cancer, 1989;63(3):496-503, 百拇医药
2中山医科大学孙逸仙纪念医院
项目负责人 刘思纯.中山医科大学附属第一医院消化内科 广东省广州市 510080收搞日期 1995-09-10 接收日期 1996-01-15
Relationship between infiltration of dendritic cells, pericancerous lymphocytic reaction and prognosis in colorectal carcinomas
Liu Si-Chun and Shi-Zhen Yuan
, http://www.100md.com
Department of Gastroenterology, First Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University of Medical Sciences, Guangzhou 510080, China
AbstractAIM To study the relationship between dendritic cells (DC), pericancerous lymphocytic reaction and the prognosis in colorectal carcinomas.
METHODS This study was based on tissues from 71 patients with c olorectal carcinomas treated surgically from 1980 to 1987. All patients were fol lowed up for over 5 years. The tumor tissues were examined by ABC immunohistoche mical method using S100 protein antibody and DC was counted.
, 百拇医药
RESULTS The patients who survived over 5 years had significantl y higher DC number in situ than those who survived less than 5 years (57.67/mm3±13.38/mm3 vs 30.59/mm3±9.31/mm3, P<0.01). The degree of pericancerous lymphocytic reation was closely related to DC infil tration density and the 5-year survival rate.
CONCLUSION DC infiltration density and the degree of pericance rous lymphocytic reaction were the markers of host immune response against tumor , and were good indicators in assessing prognosis.
, 百拇医药
Subject headings Colorectal neoplasms/pathology\ \ Dentritic cells/pathology\ \ Neoplasms invasiveness\ \ Lymphocytes
Liu SC,Yuan SZ.Relationship between infiltration of dendritic cells, pericancerous lymphocytic reaction and prognosis in colorectal carcinomas.Xin Xiaohuabingxue Zazhi, 1997；5(3)：156-157
摘 要目的 研究结直肠癌树突状细胞(DC)浸润和癌周淋巴细胞反应的关系及对预后的影响.
, 百拇医药
方法 1980年～1987年结直肠癌手术71例，均有随访记录，癌及癌周组织 采用S-100蛋白抗体ABC免疫组化染色，行DC计数.
结果 术后生存期≥5年者癌组织DC数量(57.67/mm3±13.38/mm3)明显高于<5年者(30.59/mm3±9.31/mm3) (P<0.01).癌周淋巴细胞反应强度 和癌组织DC浸润密度及5年生存率密切相关.
结论 结直肠癌癌组织DC浸润密度和癌周淋巴细胞反应强度反映了机体抗 肿瘤免疫力，是估计预后的良好指标.
主题词 结肠直肠肿瘤/病理学;树突细胞/病理学;肿瘤浸润;淋 巴细胞
, http://www.100md.com
刘思纯,袁世珍.结直肠癌树突状细胞浸润及癌周淋巴细胞反应与预后的关系.新消化病学杂志, 1997；5(3)：156-157
免疫病理学的研究认为结直肠癌癌周淋巴细胞的浸润是宿主对肿瘤免疫反应的一个方面，对预后有一定影响.T细胞是肿瘤浸润性淋巴细胞的主要成分，而T细胞的激活需要抗原提呈细胞(APC)的辅佐.目前认为体内主要的APC是树突状细胞(DC)[1].近年发现某些恶性肿瘤的预后和肿瘤组织DC的浸润密度有关[2]，但尚缺乏大肠癌和DC间关系的类似报道.作者采用S-100蛋白抗体ABC免疫组化方法，定量检测结直肠癌原位DC，同 时观察癌周淋巴细胞反应，以期研究DC与癌周淋巴细胞反应的关系及对预后的影响.
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 收集本院1980年～1987年资料完整的结直肠癌手术标本71例.男42例，女29例；年龄17岁～ 88岁，平均51.9岁.术后均有随访，术后生存时间<5年者36例，≥5年者35例，5年生存率49.3%，其中15例存活已超过10年.全部患者术前、术后均未接受过放疗及系统化疗.71例行根治性手术59例，姑息性手术12例 .全部标本的HE切片经复习，结直肠癌的病理学分类(包括癌周淋巴细胞反应程度)按《中国 常见恶性肿瘤诊治规范，第3分册，大肠癌》的标准诊断[3].
1.2 免疫组化染色 以ABC法检测DC.S_100蛋白抗体购自Dako公司，第2抗体和ABC液为Vector实验室产品.设立阳性及阴性对照以确立染色特异性.DC计数：计数相当于粘膜下层深度的癌组 织，选择阳性DC密集区，在光镜高倍镜下取10个视野，用显微测微尺进行计数.以细胞个数/mm2为单位. 统计方法 采用t及F检验和卡方检验.
, 百拇医药
2 结果
2.1 DC分布 DC呈S-100蛋白阳性反应，胞核胞浆均着色，细胞形态不规则，表面有树突状突起.在癌组织，DC区域性分布于间质中，常和淋巴细胞相伴浸 润形成细胞簇.在癌灶可见DC树突和周围癌细胞紧密接触，环抱癌细胞(图1，2).
2.2 癌组织DC数和预后 术后生存期≥5年和<5年的两组病例癌组织DC数量分别为57.67/mm2±13.38/mm2和30.59/mm2±9.31/mm/2，差异有显著性意义(P<0.01).在具备同一种病理因素 的患者中，不同生存期者癌组织DC数量差异仍有显著性差异(表1).癌周淋巴细胞反应和DC数量及预后的关系(表2).
表1 结直肠癌病理因素、生存期与DC数量
| 病理因素 | ≥5年 | <5年 | ||
| n | DC数量 | n | DC数量 | |
| 中分化腺癌 | 11 | 58.65±14.63b | 9 | 32.72±9.73 |
| 浸润浆膜层 | 14 | 54.55±11.18b | 27 | 28.47±7.53 |
| 无淋巴结转移 | 30 | 59.48±13.62b | 10 | 37.88±11.22 |
, http://www.100md.com
bP<0.01，与<5年组比较.
表2 结直肠癌癌周淋巴细胞反应和DC数量及预后关系
| 癌周淋巴细胞反应 | n | DC数量 | 5年生存率(%) |
| - | 25 | 34.19±12.14b | 36.0 |
| + | 27 | 42.08±13.21b | 44.4 |
| ++ | 19 | 53.65±16.28b | 73.7a |
aP<0.05，和(-)组比较；bP<0.01，各组间比较.
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图1 结直肠高分化腺癌，DC成簇分布和淋巴细胞及癌细胞紧密接触 ABC×200
图2 结直肠中分化腺癌，DC成簇，包绕癌细胞 ABC×200
3 讨论近年来的免疫学及病理学的研究已证实DC是体内主要的APC，S-100蛋白是DC的细胞内标志 [4].多数文献报道，DC浸润密度和患者生存率呈正相关[2，4].本实验结果示，术后生存期≥5年的结直肠癌患者癌组织DC数量明显高于生存期<5年者，和Ambe等 [4]的结果一致.在具备同一种病理因素的患者中，生存期不同者其癌组织DC数量 差异也有显著性，表明结直肠癌癌组织DC数量可作为估计预后的一项指标.本结果还表明， 结直肠癌癌组织DC数量的变化和癌周淋巴细胞反应强度有关，在癌周淋巴细胞反应低下时， 癌组织DC减少，随着癌周淋巴细胞反应的增强，癌组织DC明显增加.在对5年生存率的分析中也发现这种相关性，癌周淋巴细胞反应较强时 ，DC增加，5年生存率明显增高.提示癌周淋巴细胞反应和癌组织DC浸润对预后的影响作用 是一致的.
, 百拇医药
DC可以识别肿瘤特异性抗原，提呈抗原给T细胞，和T细胞发生聚集，促发一系列的免疫反应 ，活化的肿瘤特异T细胞就大量浸润，以细胞毒作用杀伤肿瘤细胞[4]. 故DC在癌组织的浸润程度代表了机体抗肿瘤免疫反应的一个方面.本文所观察到的结直肠 癌组织DC的形态和分布特征及和癌周淋巴细胞反应的关系为DC能借助其突起直接摄取肿瘤抗原并发挥抗原提呈作用提供了形态学依据.在抗肿瘤免疫中，这两种免疫反应密切相关，协同作用.定量检测癌组织DC和观察癌周淋巴细胞反应，可以更好地估计机体 抗肿瘤免疫力及预测患者预后.
4 参考文献1 Young JW, Sleinman RM. Dendritic cells stimulate primary human cytoly tic lymphocyte resposes in the absence of
, 百拇医药
CD4 + helper T cells. J Exp Med, 1990;171(4):1315-1332
2 Kakeji Y, Maehara Y, Korenga D, et al. Prognostic significance of tumor_h ost interaction in clinical gastric cancer:
relationship between DNA ploidy and dendritic cell infiltration. J Surg Oncol,1993;52(4):207-212
3 全国肿瘤防治办公室、中国抗癌协会合编.中国常见恶性肿瘤诊治规范.第3分册.大肠癌.北京：
北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1990：11-23
4 Ambe K, Mori M, Enjoji M. S_100 protein_positive dendritic cells in colorect al adenocarcinoma. Distribution and relation
to the clinical prognosis. Cancer, 1989;63(3):496-503, 百拇医药