自体与异体LAK细胞治疗慢性肝炎130例
解放军第464医院内4科 天津市 300381
董寒梅，女，1948-12-10生，山东省济南市人，汉族.1976年武汉军区军医学校检验班毕业，放免室主管技师，发表论文3篇.
项目负责人 董寒梅,天津李七庄.
Tel: 022-3382821-2092收搞日期 1995-03-22 接受日期 1995-06-22
Auto- and allo-LAK cells in the treatment of 130 patients with chronic active hepatitis
Han-Mei Dong and Duan-Yang Zhang
, 百拇医药
Tianjin Hospital of Air Force of PLA, Tianjin 300381
AbstractAIM To evaluate the effects of lymphokine-activated killer cells (LAK) in the treatment of patients with chronic active hepatitis (CAH).
METHODS All the patients in three groups (A, B, treatment group s; C, control group) were treated with oral vitamins and Ganyanling injections. In group A, auto-LAK cell infusion and, in group B, allo-LAK cell infusion were added respectively.
, 百拇医药
RESULTS The HBeAg negative conversion rate was higher in treatm ent groups than in the control group, and in group A it was 47.5%, in group B, 58.0%, in group C, 15.0% (P<0.05). The ratios of HBV DNA transverse to n egative in the three groups were 45.0%, 66.0% and 11.8%, respectively.
CONCLUSION LAK cells can inhibit HBV replication obviously.
Subject headings Hepatitis,chronic active/therapy; Lymphokine_activiated killer cells Immunotherapy; DNA,viral/analysis HBeAg/analysis
, 百拇医药
Dong HM, Zhang DY. Auto- and allo-LAK cells in the treatment of 130 patients with chronic active hepatitis.
Xin Xiaohuabingxue Zazhi, 1997;5(5):313-314
摘 要目的 对LAK细胞治疗慢性肝炎作客观估价.
方法 治疗与对照组均口服维生素，肌注肝炎灵.治疗A组加回输自体LAK细胞，每周2次，6周为1个疗程；B组每周输注异体LAK细胞悬液1次，5次为1疗程.
结果 LAK细胞治疗慢性肝炎能使部分患者HBeAg及HBV DNA阴转. 治疗结束时HBeAg阴转率A组为47.5%，B组为58.0%；而对照组C为15.0%(P<0.05).HBVDNA阴转率A组为45.0%，B组为66.0%，而对照组C为11.8%，(P<0.05%).
, 百拇医药
结论 LAK细胞治疗对HBV复制有明显抑制作用.异体LAK组的HBeAg及HBV DNA阴转率高于自体LAK组.
主题词 肝炎，慢性活动性/治疗 淋巴因子激活杀伤细胞 免疫疗法 DNA，病毒/分析 乙型肝炎核心抗原/分析
董寒梅,张端阳.自体与异体LAK细胞治疗慢性肝炎130例.新消化病学杂志,1997;5(5):313-314
以LAK细胞为先导的过继免疫疗法治疗慢性乙型肝炎已有报道，我们采用回输自体和异体LAK细胞治疗慢性乙型肝炎，使HBeAg和HBV DNA阴转，取得良好的疗效，现报告如下.
1 对象和方法
, 百拇医药
1.1 对象 病例来源为1991年11月～1994年1月的住院及门诊患者210例，随意分为自体LAK细胞治疗组 80例(简称A组)，男69例，女11例，年龄9岁～66岁，平均38岁.异体LAK细胞治疗组50例(简 称B组)，男47例，女3例，年龄为13岁～60岁，平均37岁.对照组80例(简称C组)， 男68例，女12例，年龄8岁～68岁，平均38岁.对照组患者条件与治疗组大致相同，有可比性.肝炎诊断分型依据1990年上海全国病毒性肝炎会议诊断标准.血清学检测，HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc采用酶联法.HBVDNA检测采用斑点杂 交法.各组病例均为HBsAg(+)，HBeAg(+)，抗_HBc(+)，HBVDNA(+)，抗HBs(-)，抗HBe(-).
1.2 方法 治疗与对照组均口服维生素，肌注肝炎灵，剂量相同，A组加回输自体LAK细胞，每周2次，6 周为1个疗程.自体LAK细胞在无菌条件下取肝素抗凝的静脉血50ml，分离血浆和血细胞取 其淋巴细胞入原血浆中再加IL_2 5000U，置37℃ 5% CO2孵育箱孵育3h后取出与自身 红细胞悬液混合即成.B组每周静脉输注异体LAK细胞悬液1次，5次为1个疗程.异体LAK细胞 取健康成人O型抗凝血200ml(市中心血站提供)，分离出单个核细胞合入50ml培养液中加 IL_25万U，再置于37℃ 5% CO2孵箱中培养5_7d制成LAK细胞悬液.
, 百拇医药
2 结果LAK细胞治疗慢性肝炎前后HBV标记物的变化(表1，2).
表1 LAK细胞治疗慢性肝炎前后HBV比较 〔n%)
, 百拇医药
表2 LAK细胞治疗慢性肝炎结束后3个月HBV标记物的变化 〔n(%)〕
, 百拇医药
3 讨论本研究表明，LAK细胞治疗组HBeAg阴转率和抗_HBe阳转率与对照组相比有显著性差异(P<0.05).异体LAK组又高于自体LAK组. LAK细胞治疗组HBV DNA阴转率明显高于对照组(P<0.05)，异体LAK组与自体LAK组相比HBV DNA阴转率亦有显著性差异(P<0.05).患者在行LAK细胞治疗结束后3个月复查HBeAg、HBV DNA阴转率变化不大，而抗_HBe阳转率呈上升趋势，近期疗效可以.LAK细胞治疗慢性肝炎有促进HBeAg和HBV DNA阴转的作用.根据我们的体会认为异体LAK更优于自体LAK.①异体LAK细胞培养液为RPMI1640加AB血清，内含多种氨基酸等物质，有利于细胞生长.自体LAK是以患者自身的血浆培养，文献报道慢性肝炎血清对正常人LAK，IL_2诱生活性具有明显抑制作用.②异体LAK采用健康成人外周血的单个核细胞培养5d～7d，能获得较多的LAK细胞，自体LAK是采用自身的外周血单个核细胞培养3h，细胞质量和数量上远不如健康人.③异体LAK不需抽取患者血液，患者容易接受，减轻了患者的思想寺牵跎倭嘶颊叩痛苦，简化了手续，降低了成本. ④治疗中未发现任何不良反应，极少数病例于输后出现低热(38℃左右)，无需处理均自行缓解.IL_2是一种淋巴因子，是免疫增强因子，也是免疫调节因子，可以促进NK活性诱生LAK细胞 [1]，受白细胞介素2激活的杀伤细胞(LAK)具有清除肿瘤细胞和病毒感染细胞的作 用，慢性乙肝患者PBMC生成IL_2能力低下，体内IL_2缺乏直接影响T杀伤性细胞、NK细胞、 LAK活性和B细胞功能正常发挥，结果一方面机体抗病毒能力低下使HBV长期感染机体，另一方面加重了CAH患者的自身免疫反应[2]，而LAK细胞回输入体内后可引起体内生成某些细胞因子(如α_干扰素、γ_干扰素、IL_2及TNF_α)等，这些细胞因子在体内有利于增加机体的抗HBV免疫反应. 结果初步显示LAK细胞治疗对HBV复制有明显的抑制作用.异体LAK组的HBVDNA、HBeAg阴转率，抗_HBe阳转率，高于自体LAK组，可见异体LAK细胞治疗慢性乙型肝炎是很有前途的.但治疗机理尚需进一步的探讨研究.
4 参考文献1 冯作化，罗毅，陈兆聪，等.白细胞介素2受体的两种蛋白及其功能.国外医学免疫学分册，1989；(1)：4-6
2 孙永良，何南祥，王明海，等.慢性乙型肝炎患者LAK、IL-2和TNF活性及其相互关系.中华传染病杂志，1992；10(2)：63-67, 百拇医药(董寒梅 张端阳)
董寒梅，女，1948-12-10生，山东省济南市人，汉族.1976年武汉军区军医学校检验班毕业，放免室主管技师，发表论文3篇.
项目负责人 董寒梅,天津李七庄.
Tel: 022-3382821-2092收搞日期 1995-03-22 接受日期 1995-06-22
Auto- and allo-LAK cells in the treatment of 130 patients with chronic active hepatitis
Han-Mei Dong and Duan-Yang Zhang
, 百拇医药
Tianjin Hospital of Air Force of PLA, Tianjin 300381
AbstractAIM To evaluate the effects of lymphokine-activated killer cells (LAK) in the treatment of patients with chronic active hepatitis (CAH).
METHODS All the patients in three groups (A, B, treatment group s; C, control group) were treated with oral vitamins and Ganyanling injections. In group A, auto-LAK cell infusion and, in group B, allo-LAK cell infusion were added respectively.
, 百拇医药
RESULTS The HBeAg negative conversion rate was higher in treatm ent groups than in the control group, and in group A it was 47.5%, in group B, 58.0%, in group C, 15.0% (P<0.05). The ratios of HBV DNA transverse to n egative in the three groups were 45.0%, 66.0% and 11.8%, respectively.
CONCLUSION LAK cells can inhibit HBV replication obviously.
Subject headings Hepatitis,chronic active/therapy; Lymphokine_activiated killer cells Immunotherapy; DNA,viral/analysis HBeAg/analysis
, 百拇医药
Dong HM, Zhang DY. Auto- and allo-LAK cells in the treatment of 130 patients with chronic active hepatitis.
Xin Xiaohuabingxue Zazhi, 1997;5(5):313-314
摘 要目的 对LAK细胞治疗慢性肝炎作客观估价.
方法 治疗与对照组均口服维生素，肌注肝炎灵.治疗A组加回输自体LAK细胞，每周2次，6周为1个疗程；B组每周输注异体LAK细胞悬液1次，5次为1疗程.
结果 LAK细胞治疗慢性肝炎能使部分患者HBeAg及HBV DNA阴转. 治疗结束时HBeAg阴转率A组为47.5%，B组为58.0%；而对照组C为15.0%(P<0.05).HBVDNA阴转率A组为45.0%，B组为66.0%，而对照组C为11.8%，(P<0.05%).
, 百拇医药
结论 LAK细胞治疗对HBV复制有明显抑制作用.异体LAK组的HBeAg及HBV DNA阴转率高于自体LAK组.
主题词 肝炎，慢性活动性/治疗 淋巴因子激活杀伤细胞 免疫疗法 DNA，病毒/分析 乙型肝炎核心抗原/分析
董寒梅,张端阳.自体与异体LAK细胞治疗慢性肝炎130例.新消化病学杂志,1997;5(5):313-314
以LAK细胞为先导的过继免疫疗法治疗慢性乙型肝炎已有报道，我们采用回输自体和异体LAK细胞治疗慢性乙型肝炎，使HBeAg和HBV DNA阴转，取得良好的疗效，现报告如下.
1 对象和方法
, 百拇医药
1.1 对象 病例来源为1991年11月～1994年1月的住院及门诊患者210例，随意分为自体LAK细胞治疗组 80例(简称A组)，男69例，女11例，年龄9岁～66岁，平均38岁.异体LAK细胞治疗组50例(简 称B组)，男47例，女3例，年龄为13岁～60岁，平均37岁.对照组80例(简称C组)， 男68例，女12例，年龄8岁～68岁，平均38岁.对照组患者条件与治疗组大致相同，有可比性.肝炎诊断分型依据1990年上海全国病毒性肝炎会议诊断标准.血清学检测，HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc采用酶联法.HBVDNA检测采用斑点杂 交法.各组病例均为HBsAg(+)，HBeAg(+)，抗_HBc(+)，HBVDNA(+)，抗HBs(-)，抗HBe(-).
1.2 方法 治疗与对照组均口服维生素，肌注肝炎灵，剂量相同，A组加回输自体LAK细胞，每周2次，6 周为1个疗程.自体LAK细胞在无菌条件下取肝素抗凝的静脉血50ml，分离血浆和血细胞取 其淋巴细胞入原血浆中再加IL_2 5000U，置37℃ 5% CO2孵育箱孵育3h后取出与自身 红细胞悬液混合即成.B组每周静脉输注异体LAK细胞悬液1次，5次为1个疗程.异体LAK细胞 取健康成人O型抗凝血200ml(市中心血站提供)，分离出单个核细胞合入50ml培养液中加 IL_25万U，再置于37℃ 5% CO2孵箱中培养5_7d制成LAK细胞悬液.
, 百拇医药
2 结果LAK细胞治疗慢性肝炎前后HBV标记物的变化(表1，2).
表1 LAK细胞治疗慢性肝炎前后HBV比较 〔n%)
| 分组 | n | HBsAg治后阴转 | HBeAg治后阴转 | 抗_HBc治后阴转 | 抗_HBs治后阳转 | 抗_HBe治后阳转 |
| A组 | 80 | 0(0.0) | 38(47.5) | 0(0.0) | 0(0.0) | 27(34.8) |
| B组 | 50 | 0(0.0) | 29(58.0) | 0(0.0) | 1(2.0) | 24(48.0) |
| C组 | 80 | 0(0.0) | 12(15.0) | 0(0.0) | 0(0.0) | 10(12.5) |
, 百拇医药
表2 LAK细胞治疗慢性肝炎结束后3个月HBV标记物的变化 〔n(%)〕
| 分组 | n | HBeAg治后阴转 | 抗_HBe治后阳转 | HBVDNA治后阴转 | |
| A组 | 治疗停止时治疗后3个月 | 80 | 38(47.5)39(49.0) | 27(33.8)29(36.0) | 36(45.0)37(46.0) |
| B组 | 治疗停止时治疗后3个月 | 50 | 29(58.0)29(58.0) | 24(48.0)27(54.0) | 33(66.0)33(66.0) |
| C组 | 治疗停止时治疗后3个月 | 80 | 12(15.0)12(15.0) | 10(12.5)8(10.0) | 9(11.3) 9(11.3) |
, 百拇医药
3 讨论本研究表明，LAK细胞治疗组HBeAg阴转率和抗_HBe阳转率与对照组相比有显著性差异(P<0.05).异体LAK组又高于自体LAK组. LAK细胞治疗组HBV DNA阴转率明显高于对照组(P<0.05)，异体LAK组与自体LAK组相比HBV DNA阴转率亦有显著性差异(P<0.05).患者在行LAK细胞治疗结束后3个月复查HBeAg、HBV DNA阴转率变化不大，而抗_HBe阳转率呈上升趋势，近期疗效可以.LAK细胞治疗慢性肝炎有促进HBeAg和HBV DNA阴转的作用.根据我们的体会认为异体LAK更优于自体LAK.①异体LAK细胞培养液为RPMI1640加AB血清，内含多种氨基酸等物质，有利于细胞生长.自体LAK是以患者自身的血浆培养，文献报道慢性肝炎血清对正常人LAK，IL_2诱生活性具有明显抑制作用.②异体LAK采用健康成人外周血的单个核细胞培养5d～7d，能获得较多的LAK细胞，自体LAK是采用自身的外周血单个核细胞培养3h，细胞质量和数量上远不如健康人.③异体LAK不需抽取患者血液，患者容易接受，减轻了患者的思想寺牵跎倭嘶颊叩痛苦，简化了手续，降低了成本. ④治疗中未发现任何不良反应，极少数病例于输后出现低热(38℃左右)，无需处理均自行缓解.IL_2是一种淋巴因子，是免疫增强因子，也是免疫调节因子，可以促进NK活性诱生LAK细胞 [1]，受白细胞介素2激活的杀伤细胞(LAK)具有清除肿瘤细胞和病毒感染细胞的作 用，慢性乙肝患者PBMC生成IL_2能力低下，体内IL_2缺乏直接影响T杀伤性细胞、NK细胞、 LAK活性和B细胞功能正常发挥，结果一方面机体抗病毒能力低下使HBV长期感染机体，另一方面加重了CAH患者的自身免疫反应[2]，而LAK细胞回输入体内后可引起体内生成某些细胞因子(如α_干扰素、γ_干扰素、IL_2及TNF_α)等，这些细胞因子在体内有利于增加机体的抗HBV免疫反应. 结果初步显示LAK细胞治疗对HBV复制有明显的抑制作用.异体LAK组的HBVDNA、HBeAg阴转率，抗_HBe阳转率，高于自体LAK组，可见异体LAK细胞治疗慢性乙型肝炎是很有前途的.但治疗机理尚需进一步的探讨研究.
4 参考文献1 冯作化，罗毅，陈兆聪，等.白细胞介素2受体的两种蛋白及其功能.国外医学免疫学分册，1989；(1)：4-6
2 孙永良，何南祥，王明海，等.慢性乙型肝炎患者LAK、IL-2和TNF活性及其相互关系.中华传染病杂志，1992；10(2)：63-67, 百拇医药(董寒梅 张端阳)