溃疡性结肠炎患者血清TNFα和IL-8的临床研究
广东医学院 1附属医院保健科 2消化科 3微生物与免疫教研室 广东省湛江市 524001
作者简介 崔淑兰，女，1962-12-28生，安徽砀山人，汉族. 1985年新疆医学院医疗系毕业，内科主治医师，发表论文10篇[电话(0759)2387512].(收稿 1997-06-06 修回 1997-08-25)
Clinical investigation of serum TNF-α and IL-8 levels in patients with ulcerative colitis
CUI Shu-Lan1, TANG Bin3, WANG Wan-Mei2, CHEN Ken2, LIANG Jian2, and WANG Sheng-Chun3
, 百拇医药
1Department of Healthcare, Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, Guangdong Province, China
2Department of Gastroenterology3Department of Microbiology and Immunology, Guangdong Medical College
Subject headings colitis, ulcerative/blood; tumor necrosis factor/metabolism; interleukin-8/blood
Abstract
, 百拇医药
AIM To study the action and significance of serum tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-8 (IL-8) in patients with
ulcerative colitis.
METHODS Serum TNF-α (262.2ng/L±2.0ng/L vs 146.2ng/L±2.5ng/L, P<0.05) and IL-8 (111.8ng/L±2.6ng/L vs 57.5ng/L±4.0ng/L， P<0.05) in 33 patients with active ulcerative colitis and in 40 normal subjects were detected using a Sandwich ELISA.
, http://www.100md.com
RESULTS Serum TNF-α and IL-8 levels in patients with ulcerative colitis were elevated significantly and related to the severity of the disease and area of lesions (P<0.05).
CONCLUSION Immune dysfunction exists in patients with ulcerative colitis. The increased serum TNF-α and IL-8 are related to the development of ulcerative colitis and may serve as an indicator of ulcerative colitis.
, http://www.100md.com 主题词 结肠炎，溃疡性/血液； 肿瘤坏死因子/代谢； 白细胞介素8/血液
中国图书资料分类号 R574.62
摘要
目的 研究血清TNF-α和IL-8在溃疡性结肠炎(UC)发生发展中的作用和意义.
方法 利用双抗体夹心ELISA法测定33例UC患者(男17例，女16例；年龄25岁～67岁；病程2个月～15a；轻型7例，中型20例，重型6例)及正常对照者40例，血清TNF-α和IL-8水平.
结果 活动性UC患者血清TNF-α(262.2ng/L±2.0ng/L vs 146.2ng/L±2.5ng/L, P<0.05)和IL-8 (111.8ng/L±2.6ng/L vs 57.5ng/L±4.0ng/L， P<0.05)水平明显增高，并与病情的轻重和病变的范围有关(P<0.05).
, http://www.100md.com
结论 UC患者血清TNF-α和IL-8水平增高可能与UC的发生发展有关，它可作为UC病情判断的指标.
溃疡性结肠炎(UC)的发生机理尚不清楚[1]，多数学者认为属自身免疫性疾病，细胞因子和炎性介质的参与在UC的发生发展中可能起着重要作用. 为此，作者测定了UC患者血清TNF-α和IL-8水平，并探讨其在UC发生发展中的作用和意义.
1 对象和方法
1.1 对象 活动期UC患者(活动组)33例，男17例，女16例，年龄25岁～67岁；病程2个月～15a. 全部病例都符合1993年太原会议制定的UC诊断标准[2]. 并根据该标准将33例UC患者分为轻(7例)、中(20例)、重(6例)3级；上述病例经内科系统治疗近期治愈者(治愈组)15例. 正常对照组40例，均来自健康体检者，除外感染、风湿病和肿瘤疾病.
, 百拇医药
1.2 方法 空腹取静脉血离心分离血清，置-20℃保存待检. TNF-α检测试剂盒由解放军军事科学院邦定生物医学公司提供；IL-8检测试剂盒由第四军医大学免疫教研室提供. 均采用双抗体夹心ELISA法，严格按试剂盒说明书进行操作.
统计学处理 所得实验数据呈偏态分布，先行对数转换，得出对数x±s后，再行反对数得出实际含量，并以x±s表示，根据方差齐性与否采用F检验，多个样本间的两两比较采用q检验(Newman-Keuls法).
2 结果
2.1 血清TNF-α和IL-8的水平 UC患者活动组血清TNF-α和IL-8水平明显高于缓解期和正常对照组(P<0.05)；缓解期患者血清TNF-α和IL-8水平较活动组明显降低(P<0.05)，与正常对照组相比无显著差异(P>0.05，表1). 随病情加重血清TNF-α和IL-8有增高趋势，重度明显高于轻、中度(P<0.05)，但轻度与中度相比无显著差异(P>0.05，表2).
, 百拇医药
2.2 病变部位血清TNF-α和IL-8水平 全结肠炎及左半结肠炎者血清TNF-α水平明显高于直、乙状结肠炎组(P<0.05)，但前两者相比无显著差异(P>0.05)；全结肠炎组血清IL-8水平明显高于左半结肠炎和直、乙状结肠炎组，病变的发生部位有关(P<0.05)，但后两者相比无显著差异(P>0.05，表3).
2.3 血清TNF-α和IL-8的相关性 33例UC患者血清TNF-α与IL-8水平呈正相关(r=0.67，P<0.01).
表1 UC患者血清TNF-α和IL-8水平(ng/L)(x±s)
, http://www.100md.com
aP<0.05, vs 正常对照组及治愈组；TNF-α：F=5.29；IL-8： F=3.42.
表2 病情与血清TNF-α和IL-8水平(ng/L)(x±s)
, 百拇医药
aP<0.05, vs 轻中度；TNF-α：F=5.29；IL-8：F=4.19.
表3 病变部位血清TNF-α和IL-8水平(ng/L)(x±s)
, 百拇医药
aP<0.05, vs 直乙状结肠组与左半结肠组；cP<0.05 vs 直乙状结肠组；TNF-α：F=14.80；IL-8： F=7.8.
3 讨论
在感染过程中，TNF-α可介导炎症反应、发热和(或)感染性休克的发生. TNF-α的监测对辅助诊断、疾病分期、活动情况及预后判定均有重要意义[3]. IL-8主要对中性粒细胞具有趋化和激活作用. 给动物皮下注射IL-8可 导致局部中性粒细胞的大量聚集，出现与急性炎症反应类似的组织病理变化[4]. 研究发现UC患者结肠和回肠末端IL-8有增加[5]，分泌IL-8的细胞呈弥漫性分布，主要定位于溃疡底部、粘膜表面、渗出液和隐窝脓肿中，起源于单核细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞和上皮细胞[6]. 本结果显示活动期UC患者血清TNF-α和IL-8水平明显增高，提示TNF-α和IL-8直接参与了UC的病理过程. 由于UC患者体内多种异常抗体、免疫复合物产生及合并病原微生物感染通过不同途径刺激单核-巨噬细胞产生并释放TNF-α至血循环中，导致血中TNF-α水平增高. 增高的TNF-α一 方面与炎症细胞相互作用，加重局部肠粘膜的炎症反应；另一方面可刺激血中和(或)炎症局部巨噬细胞、中性粒细胞、T淋巴细胞和血管内皮细胞分泌IL-8，致使血中IL-8水平增高，升高的IL-8可进一步通过对中性粒细胞的趋化作用，导致组织细胞浸润，促进肠粘膜炎性损伤. 此外，TNF-α还可激活中性粒细胞，诱导产生血小板激活因子(PAF)、白三烯B4 、血栓素A2、弹力蛋白酶、O2及H2O2等；改变固有膜内小血管内及细胞的抗凝性质，诱发促凝活性和抑制血栓调变素，在UC固有膜内小血管炎的基础上，形成微血栓，造成肠粘膜微循环障碍；对肠粘膜血管内皮的直接毒性作用，使血浆渗出，甚至红细胞渗出等. 说明UC患者存在有严重的细胞免疫功能的紊乱，TNF-α和IL-8在UC的发生和病情发展中起着重要作用.
, 百拇医药
本文结果显示血清TNF-α和IL-8水平的高低与病情轻重和病变累及的范围有关，病变近期治愈后血清TNF-α和IL-8水平明显降低(P<0.05)，提示测定血清TNF-α和IL-8水平可反映UC的病情变化，并可作为观察疗效和判断预后的生物学指标之一.
4 参考文献
1 欧阳钦. 我国炎症性肠病研究的概况及展望. 中华消化杂志，1993；6(6)：313-314
2 溃疡性结肠炎的诊断及疗效标准. 中华消化杂志，1993；6(6)：354
3 伏爽，钱玉昆. 肿瘤坏死因子的研究进展. 国外医学免疫分册，1993；5(5)：252-253
4 Hechtman DH, Cybulsky MI, Fuchs HJ, et al. Intravascular IL-8: Inhibitor of polymorphonuclear leukocyte accumulation at
, http://www.100md.com
sites of acute inflammation. J Immunol, 1991;147(3):883-892
5 Izzo RS, Witkon K, Chen AI, et al. Interleukin-8 and neutrophil markers in colonic mucosa fron patients with ulcerative
colitis. Am J Gastroenterol, 1992;87(10):1447-1452
6 Mazzuccheli L, Hauser C, Zgraggen K, et al. Expression of interleukin-8 gene in inflammatory bowel disease is related to
the histological grade of active inflammation. Am J Pathol, 1994;144(5):997-1007, http://www.100md.com(崔淑兰1 汤 斌3 王婉梅2 陈 垦2 梁 坚2 王胜春3)
作者简介 崔淑兰，女，1962-12-28生，安徽砀山人，汉族. 1985年新疆医学院医疗系毕业，内科主治医师，发表论文10篇[电话(0759)2387512].(收稿 1997-06-06 修回 1997-08-25)
Clinical investigation of serum TNF-α and IL-8 levels in patients with ulcerative colitis
CUI Shu-Lan1, TANG Bin3, WANG Wan-Mei2, CHEN Ken2, LIANG Jian2, and WANG Sheng-Chun3
, 百拇医药
1Department of Healthcare, Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, Guangdong Province, China
2Department of Gastroenterology3Department of Microbiology and Immunology, Guangdong Medical College
Subject headings colitis, ulcerative/blood; tumor necrosis factor/metabolism; interleukin-8/blood
Abstract
, 百拇医药
AIM To study the action and significance of serum tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-8 (IL-8) in patients with
ulcerative colitis.
METHODS Serum TNF-α (262.2ng/L±2.0ng/L vs 146.2ng/L±2.5ng/L, P<0.05) and IL-8 (111.8ng/L±2.6ng/L vs 57.5ng/L±4.0ng/L， P<0.05) in 33 patients with active ulcerative colitis and in 40 normal subjects were detected using a Sandwich ELISA.
, http://www.100md.com
RESULTS Serum TNF-α and IL-8 levels in patients with ulcerative colitis were elevated significantly and related to the severity of the disease and area of lesions (P<0.05).
CONCLUSION Immune dysfunction exists in patients with ulcerative colitis. The increased serum TNF-α and IL-8 are related to the development of ulcerative colitis and may serve as an indicator of ulcerative colitis.
, http://www.100md.com 主题词 结肠炎，溃疡性/血液； 肿瘤坏死因子/代谢； 白细胞介素8/血液
中国图书资料分类号 R574.62
摘要
目的 研究血清TNF-α和IL-8在溃疡性结肠炎(UC)发生发展中的作用和意义.
方法 利用双抗体夹心ELISA法测定33例UC患者(男17例，女16例；年龄25岁～67岁；病程2个月～15a；轻型7例，中型20例，重型6例)及正常对照者40例，血清TNF-α和IL-8水平.
结果 活动性UC患者血清TNF-α(262.2ng/L±2.0ng/L vs 146.2ng/L±2.5ng/L, P<0.05)和IL-8 (111.8ng/L±2.6ng/L vs 57.5ng/L±4.0ng/L， P<0.05)水平明显增高，并与病情的轻重和病变的范围有关(P<0.05).
, http://www.100md.com
结论 UC患者血清TNF-α和IL-8水平增高可能与UC的发生发展有关，它可作为UC病情判断的指标.
溃疡性结肠炎(UC)的发生机理尚不清楚[1]，多数学者认为属自身免疫性疾病，细胞因子和炎性介质的参与在UC的发生发展中可能起着重要作用. 为此，作者测定了UC患者血清TNF-α和IL-8水平，并探讨其在UC发生发展中的作用和意义.
1 对象和方法
1.1 对象 活动期UC患者(活动组)33例，男17例，女16例，年龄25岁～67岁；病程2个月～15a. 全部病例都符合1993年太原会议制定的UC诊断标准[2]. 并根据该标准将33例UC患者分为轻(7例)、中(20例)、重(6例)3级；上述病例经内科系统治疗近期治愈者(治愈组)15例. 正常对照组40例，均来自健康体检者，除外感染、风湿病和肿瘤疾病.
, 百拇医药
1.2 方法 空腹取静脉血离心分离血清，置-20℃保存待检. TNF-α检测试剂盒由解放军军事科学院邦定生物医学公司提供；IL-8检测试剂盒由第四军医大学免疫教研室提供. 均采用双抗体夹心ELISA法，严格按试剂盒说明书进行操作.
统计学处理 所得实验数据呈偏态分布，先行对数转换，得出对数x±s后，再行反对数得出实际含量，并以x±s表示，根据方差齐性与否采用F检验，多个样本间的两两比较采用q检验(Newman-Keuls法).
2 结果
2.1 血清TNF-α和IL-8的水平 UC患者活动组血清TNF-α和IL-8水平明显高于缓解期和正常对照组(P<0.05)；缓解期患者血清TNF-α和IL-8水平较活动组明显降低(P<0.05)，与正常对照组相比无显著差异(P>0.05，表1). 随病情加重血清TNF-α和IL-8有增高趋势，重度明显高于轻、中度(P<0.05)，但轻度与中度相比无显著差异(P>0.05，表2).
, 百拇医药
2.2 病变部位血清TNF-α和IL-8水平 全结肠炎及左半结肠炎者血清TNF-α水平明显高于直、乙状结肠炎组(P<0.05)，但前两者相比无显著差异(P>0.05)；全结肠炎组血清IL-8水平明显高于左半结肠炎和直、乙状结肠炎组，病变的发生部位有关(P<0.05)，但后两者相比无显著差异(P>0.05，表3).
2.3 血清TNF-α和IL-8的相关性 33例UC患者血清TNF-α与IL-8水平呈正相关(r=0.67，P<0.01).
表1 UC患者血清TNF-α和IL-8水平(ng/L)(x±s)
| 组别 | n | TNF-α | IL-8 |
| 正常对照组 | 40 | 146.2±2.5 | 57.5±4.0 |
| UC活动组 | 33 | 262.2±2.0a | 111.8±2.6a |
| UC治愈组 | 15 | 157.2±1.9 | 49.1±3.1 |
, http://www.100md.com
aP<0.05, vs 正常对照组及治愈组；TNF-α：F=5.29；IL-8： F=3.42.
表2 病情与血清TNF-α和IL-8水平(ng/L)(x±s)
| 病情 | n | TNF-α | IL-8 |
| 轻度 | 7 | 170.3±1.9 | 77.3±2.3 |
| 中度 | 20 | 244.2±1.8 | 96.7±2.5 |
| 重度 | 6 | 441.6±2.3a | 279.0±2.1a |
, 百拇医药
aP<0.05, vs 轻中度；TNF-α：F=5.29；IL-8：F=4.19.
表3 病变部位血清TNF-α和IL-8水平(ng/L)(x±s)
| 病变部位 | n | TNF-α | IL-8 |
| 直乙状结肠炎 | 17 | 181.8±1.7 | 74.0±2.3 |
| 左半结肠炎 | 10 | 365.3±1.6c | 117.1±2.3 |
| 全结肠炎 | 6 | 603.1±1.5a | 333.0±1.8a |
, 百拇医药
aP<0.05, vs 直乙状结肠组与左半结肠组；cP<0.05 vs 直乙状结肠组；TNF-α：F=14.80；IL-8： F=7.8.
3 讨论
在感染过程中，TNF-α可介导炎症反应、发热和(或)感染性休克的发生. TNF-α的监测对辅助诊断、疾病分期、活动情况及预后判定均有重要意义[3]. IL-8主要对中性粒细胞具有趋化和激活作用. 给动物皮下注射IL-8可 导致局部中性粒细胞的大量聚集，出现与急性炎症反应类似的组织病理变化[4]. 研究发现UC患者结肠和回肠末端IL-8有增加[5]，分泌IL-8的细胞呈弥漫性分布，主要定位于溃疡底部、粘膜表面、渗出液和隐窝脓肿中，起源于单核细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞和上皮细胞[6]. 本结果显示活动期UC患者血清TNF-α和IL-8水平明显增高，提示TNF-α和IL-8直接参与了UC的病理过程. 由于UC患者体内多种异常抗体、免疫复合物产生及合并病原微生物感染通过不同途径刺激单核-巨噬细胞产生并释放TNF-α至血循环中，导致血中TNF-α水平增高. 增高的TNF-α一 方面与炎症细胞相互作用，加重局部肠粘膜的炎症反应；另一方面可刺激血中和(或)炎症局部巨噬细胞、中性粒细胞、T淋巴细胞和血管内皮细胞分泌IL-8，致使血中IL-8水平增高，升高的IL-8可进一步通过对中性粒细胞的趋化作用，导致组织细胞浸润，促进肠粘膜炎性损伤. 此外，TNF-α还可激活中性粒细胞，诱导产生血小板激活因子(PAF)、白三烯B4 、血栓素A2、弹力蛋白酶、O2及H2O2等；改变固有膜内小血管内及细胞的抗凝性质，诱发促凝活性和抑制血栓调变素，在UC固有膜内小血管炎的基础上，形成微血栓，造成肠粘膜微循环障碍；对肠粘膜血管内皮的直接毒性作用，使血浆渗出，甚至红细胞渗出等. 说明UC患者存在有严重的细胞免疫功能的紊乱，TNF-α和IL-8在UC的发生和病情发展中起着重要作用.
, 百拇医药
本文结果显示血清TNF-α和IL-8水平的高低与病情轻重和病变累及的范围有关，病变近期治愈后血清TNF-α和IL-8水平明显降低(P<0.05)，提示测定血清TNF-α和IL-8水平可反映UC的病情变化，并可作为观察疗效和判断预后的生物学指标之一.
4 参考文献
1 欧阳钦. 我国炎症性肠病研究的概况及展望. 中华消化杂志，1993；6(6)：313-314
2 溃疡性结肠炎的诊断及疗效标准. 中华消化杂志，1993；6(6)：354
3 伏爽，钱玉昆. 肿瘤坏死因子的研究进展. 国外医学免疫分册，1993；5(5)：252-253
4 Hechtman DH, Cybulsky MI, Fuchs HJ, et al. Intravascular IL-8: Inhibitor of polymorphonuclear leukocyte accumulation at
, http://www.100md.com
sites of acute inflammation. J Immunol, 1991;147(3):883-892
5 Izzo RS, Witkon K, Chen AI, et al. Interleukin-8 and neutrophil markers in colonic mucosa fron patients with ulcerative
colitis. Am J Gastroenterol, 1992;87(10):1447-1452
6 Mazzuccheli L, Hauser C, Zgraggen K, et al. Expression of interleukin-8 gene in inflammatory bowel disease is related to
the histological grade of active inflammation. Am J Pathol, 1994;144(5):997-1007, http://www.100md.com(崔淑兰1 汤 斌3 王婉梅2 陈 垦2 梁 坚2 王胜春3)