HCV基因分型和不同型HCV重叠HBV感染临床分析
徐州医学院附属医院传染科 江苏省徐州市 221002
Subject headings genotype; hepatitis C viruses/genetics; hepatitis C/complications; hepatitis B/complications; superinfection
主题词 基因型； 肝炎病毒组，丙型/遗传学； 肝炎，丙型/并发症； 重叠感染
中国图书资料分类号 R512.6
1 对象和方法
1.1 对象 90例血清HCV RNA阳性丙型肝炎(HC)患者选自本院1993年1月～1995年10月门诊及病房患者，年龄3岁～67岁，平均36.8岁±13.0岁，男65例，女25例，有输血史63例，无输血史27例. HC诊断依据1990年上海全国第6届病毒性肝炎会议制定的诊断和分类标准进行.
, 百拇医药
1.2 HCV基因5′-末端非编码区酶切分型 HCV RNA PCR检测采用北京医科大学肝病研究所生产试剂盒，酶切分型所用HaeⅢ及分子量标志PBR322/HaeⅢ购自SABC. 酶切分型方法及结果判断参照文献[1，2]进行.
1.3 血清HBV标志检测 测定HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，总抗-HBc，抗-HBcIgM，均用上海实业科华生物技术有限公司药盒，ELISA法；血清HBV DNA采用生物素探针分子杂交法检测；肝功能：血清谷丙转氨酶(ALT)，血清胆红素(SB)，由本院全自动生化分析仪检测.
统计学处理 样本均数以x±s表示，均数比较用t 或u检验，率比较用χ2检验或四格表确切概率.
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2 结果
2.1 HCV基因分型结果 90例中Ⅱ型71例(78.9%)，Ⅲ型17例(18.9%)，Ⅱ/Ⅲ混合型2例(2.2%).
2.2 单纯HCV感染与重叠感染临床资料比较 90例HC患者中重叠HBV感染38例(42.2%)，其中71例Ⅱ型HCV重叠HBV感染30例(42.3%)，17例Ⅲ型7例(41.2%)，2例Ⅱ/Ⅲ混合型1例(50.0%). 重叠感染患者血清ALT，SB分别为394.0U/L±301.2U/L，45.1μmol/L±39.2μmol/L均明显高于单纯HCV感染患者ALT 207.3U/L±115.4U/L，SB 20.6μmol/L±11.5μmol/L(P<0.01)， 而两者的年龄及黄疸发生率均无差别(P>0.05). Ⅱ型HCV重叠HBV感染患者血清ALT 450.5U/L±250.1U/L明显高于Ⅲ型HCV重叠HBV感染患者ALT 211.2U/L±164.3U/L(P<0.05)，而且Ⅱ型重叠感染HBV复制率46.7%(14/30)，明显高于Ⅲ型28.6%(2/7)(P<0.05). 两型发生重叠感染率及两型重叠感染患者的年龄，SB水平均无差别(P>0.05).
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3 讨论
HCV毒株变异较大，不同国家，同一国家不同地区甚至同一地区不同人群感染HCV基因型或基因型构成存在一定差异. 国内HCV基因分型结果表明，HCV流行株主要基因型为Ⅱ型，其次为Ⅲ型，大部分地区存在Ⅱ/Ⅲ混合型，且基因型呈南北分布差异，南方城市以Ⅱ型感染为主，越往南方Ⅱ型所占比例越高，越往北方Ⅲ型所占比例越高[3]. 本地区HCV基因型主要为Ⅱ型78.9%，同时存在Ⅲ型18.9%及Ⅱ/Ⅲ混合型2.2%，基因型分布符合我国HCV基因型分布的特征，可能反映我国东部沿海地区HCV基因型分布.
本文结果显示重叠感染患者肝损明显重于单纯HCV感染患者. 我国为病毒性肝炎高发区，乙、丙型肝炎患者较多，故存在相当一部分HCV与HBV重叠感染患者，值得大家重视. 目前认为重叠感染的发生机理可能为：①从HBV、HCV感染流行病学方面来看，两者的传播途径十分相似，故可以同时感染. ②不论先感染HBV或HCV其中之一，发展为乙型肝炎(HB)或HC，一方面对机体的免疫系统影响，导致机体细胞免疫或体液免疫功能降低，故而机体更易遭受另一种HCV或HBV嗜肝病毒感染；另一方面在肝炎诊疗过程中医源性感染另一种病毒，最终均导致重叠感染的发生. ③某些HCV基因型或准种或毒株感染人体可能依赖于体内HBV的存在，与丁型肝炎病毒感染依赖于HBV存在的模式相似. ④国内单纯HCV感染患者较少见，或单纯HCV感染患者大多数属亚临床型感染，重叠感染后加重肝损，促使临床显性感染的发生.
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不同基因型HCV感染患者临床表现轻重不一. Ⅱ型患者肝损重于Ⅲ型，Ⅱ型HCV重叠HBV感染后肝损亦明显重于Ⅲ型HCV重叠HBV感染(P<0.05)，提示Ⅱ型HCV毒株毒力与致病性可能强于Ⅲ型. 目前发现重叠感染后病毒复制呈两种现象[4-6]：即两种病毒同时复制或HBV复制暂趋于抑制，对不同基因型HCV重叠HBV感染后HBV复制率作比较，发现Ⅱ型患者HBV复制率46.1%明显高于Ⅲ型28.6%(P<0.05)，尚未见这方面文献报道. 结合Ⅱ型HCV感染患者临床病情常重于Ⅲ型而Ⅱ型用干扰素治疗疗效差于Ⅲ型，推测其机制为：①Ⅲ型HCV在分子水平上直接干扰或抑制HBV复制能力强于Ⅱ型；②Ⅲ型HCV感染后诱导体内产生内源性干扰素或其他抗病毒物质多于Ⅱ型，从而导致Ⅲ型HCV间接抑制HBV复制能力强于Ⅱ型；③Ⅱ、Ⅲ两型HCV本身复制过程及其干扰HBV复制机理存在一定差异；④Ⅲ型HCV感染后，对机体免疫功能影响小于Ⅱ型，故Ⅲ型重叠HBV感染后机体免疫功能较Ⅱ型完善，从而导致对HBV复制抑制作用强于Ⅱ型. 具体机制尚有待于进一步探讨.
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4 参考文献
1 杜绍材，陶其敏，朱凌，等. 丙型肝炎病毒基因5′-末端非编码区酶切分型研究. 中华医学杂志，1993；73(1)：7-9
2 杜绍材，陶其敏. 丙型肝炎及肝癌患者HCV基因分型研究. 北京医科大学学报，1993；24(1)：353
3 Wang Y, Okamoto M, Tsuda F, et al. Prevalence, genotypes and an isolate (HC-C2) of hepatitis C virus in Chinese patients
with liver diseases. J Med Virol, 1993;40(1):254-257
4 谭德明，胡国龄，张 王争，等. 丙型肝炎病毒感染的临床分析. 中华内科杂志，1993；32(5)：268-270
5 任培工，谭德明，胡国龄. 慢性乙型肝炎与丙型肝炎病毒重叠感染. 中华消化杂志，1992；12(3)：61-62
6 虞作春，方静，吕祝庆，等. 丙型肝炎病毒感染与各类肝病. 临床荟萃，1995；10(4)：153-154(收稿 1997-07-16 修回 1997-07-22), 百拇医药(颜学兵 魏 来 吴文漪)
Subject headings genotype; hepatitis C viruses/genetics; hepatitis C/complications; hepatitis B/complications; superinfection
主题词 基因型； 肝炎病毒组，丙型/遗传学； 肝炎，丙型/并发症； 重叠感染
中国图书资料分类号 R512.6
1 对象和方法
1.1 对象 90例血清HCV RNA阳性丙型肝炎(HC)患者选自本院1993年1月～1995年10月门诊及病房患者，年龄3岁～67岁，平均36.8岁±13.0岁，男65例，女25例，有输血史63例，无输血史27例. HC诊断依据1990年上海全国第6届病毒性肝炎会议制定的诊断和分类标准进行.
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1.2 HCV基因5′-末端非编码区酶切分型 HCV RNA PCR检测采用北京医科大学肝病研究所生产试剂盒，酶切分型所用HaeⅢ及分子量标志PBR322/HaeⅢ购自SABC. 酶切分型方法及结果判断参照文献[1，2]进行.
1.3 血清HBV标志检测 测定HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，总抗-HBc，抗-HBcIgM，均用上海实业科华生物技术有限公司药盒，ELISA法；血清HBV DNA采用生物素探针分子杂交法检测；肝功能：血清谷丙转氨酶(ALT)，血清胆红素(SB)，由本院全自动生化分析仪检测.
统计学处理 样本均数以x±s表示，均数比较用t 或u检验，率比较用χ2检验或四格表确切概率.
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2 结果
2.1 HCV基因分型结果 90例中Ⅱ型71例(78.9%)，Ⅲ型17例(18.9%)，Ⅱ/Ⅲ混合型2例(2.2%).
2.2 单纯HCV感染与重叠感染临床资料比较 90例HC患者中重叠HBV感染38例(42.2%)，其中71例Ⅱ型HCV重叠HBV感染30例(42.3%)，17例Ⅲ型7例(41.2%)，2例Ⅱ/Ⅲ混合型1例(50.0%). 重叠感染患者血清ALT，SB分别为394.0U/L±301.2U/L，45.1μmol/L±39.2μmol/L均明显高于单纯HCV感染患者ALT 207.3U/L±115.4U/L，SB 20.6μmol/L±11.5μmol/L(P<0.01)， 而两者的年龄及黄疸发生率均无差别(P>0.05). Ⅱ型HCV重叠HBV感染患者血清ALT 450.5U/L±250.1U/L明显高于Ⅲ型HCV重叠HBV感染患者ALT 211.2U/L±164.3U/L(P<0.05)，而且Ⅱ型重叠感染HBV复制率46.7%(14/30)，明显高于Ⅲ型28.6%(2/7)(P<0.05). 两型发生重叠感染率及两型重叠感染患者的年龄，SB水平均无差别(P>0.05).
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3 讨论
HCV毒株变异较大，不同国家，同一国家不同地区甚至同一地区不同人群感染HCV基因型或基因型构成存在一定差异. 国内HCV基因分型结果表明，HCV流行株主要基因型为Ⅱ型，其次为Ⅲ型，大部分地区存在Ⅱ/Ⅲ混合型，且基因型呈南北分布差异，南方城市以Ⅱ型感染为主，越往南方Ⅱ型所占比例越高，越往北方Ⅲ型所占比例越高[3]. 本地区HCV基因型主要为Ⅱ型78.9%，同时存在Ⅲ型18.9%及Ⅱ/Ⅲ混合型2.2%，基因型分布符合我国HCV基因型分布的特征，可能反映我国东部沿海地区HCV基因型分布.
本文结果显示重叠感染患者肝损明显重于单纯HCV感染患者. 我国为病毒性肝炎高发区，乙、丙型肝炎患者较多，故存在相当一部分HCV与HBV重叠感染患者，值得大家重视. 目前认为重叠感染的发生机理可能为：①从HBV、HCV感染流行病学方面来看，两者的传播途径十分相似，故可以同时感染. ②不论先感染HBV或HCV其中之一，发展为乙型肝炎(HB)或HC，一方面对机体的免疫系统影响，导致机体细胞免疫或体液免疫功能降低，故而机体更易遭受另一种HCV或HBV嗜肝病毒感染；另一方面在肝炎诊疗过程中医源性感染另一种病毒，最终均导致重叠感染的发生. ③某些HCV基因型或准种或毒株感染人体可能依赖于体内HBV的存在，与丁型肝炎病毒感染依赖于HBV存在的模式相似. ④国内单纯HCV感染患者较少见，或单纯HCV感染患者大多数属亚临床型感染，重叠感染后加重肝损，促使临床显性感染的发生.
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不同基因型HCV感染患者临床表现轻重不一. Ⅱ型患者肝损重于Ⅲ型，Ⅱ型HCV重叠HBV感染后肝损亦明显重于Ⅲ型HCV重叠HBV感染(P<0.05)，提示Ⅱ型HCV毒株毒力与致病性可能强于Ⅲ型. 目前发现重叠感染后病毒复制呈两种现象[4-6]：即两种病毒同时复制或HBV复制暂趋于抑制，对不同基因型HCV重叠HBV感染后HBV复制率作比较，发现Ⅱ型患者HBV复制率46.1%明显高于Ⅲ型28.6%(P<0.05)，尚未见这方面文献报道. 结合Ⅱ型HCV感染患者临床病情常重于Ⅲ型而Ⅱ型用干扰素治疗疗效差于Ⅲ型，推测其机制为：①Ⅲ型HCV在分子水平上直接干扰或抑制HBV复制能力强于Ⅱ型；②Ⅲ型HCV感染后诱导体内产生内源性干扰素或其他抗病毒物质多于Ⅱ型，从而导致Ⅲ型HCV间接抑制HBV复制能力强于Ⅱ型；③Ⅱ、Ⅲ两型HCV本身复制过程及其干扰HBV复制机理存在一定差异；④Ⅲ型HCV感染后，对机体免疫功能影响小于Ⅱ型，故Ⅲ型重叠HBV感染后机体免疫功能较Ⅱ型完善，从而导致对HBV复制抑制作用强于Ⅱ型. 具体机制尚有待于进一步探讨.
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4 参考文献
1 杜绍材，陶其敏，朱凌，等. 丙型肝炎病毒基因5′-末端非编码区酶切分型研究. 中华医学杂志，1993；73(1)：7-9
2 杜绍材，陶其敏. 丙型肝炎及肝癌患者HCV基因分型研究. 北京医科大学学报，1993；24(1)：353
3 Wang Y, Okamoto M, Tsuda F, et al. Prevalence, genotypes and an isolate (HC-C2) of hepatitis C virus in Chinese patients
with liver diseases. J Med Virol, 1993;40(1):254-257
4 谭德明，胡国龄，张 王争，等. 丙型肝炎病毒感染的临床分析. 中华内科杂志，1993；32(5)：268-270
5 任培工，谭德明，胡国龄. 慢性乙型肝炎与丙型肝炎病毒重叠感染. 中华消化杂志，1992；12(3)：61-62
6 虞作春，方静，吕祝庆，等. 丙型肝炎病毒感染与各类肝病. 临床荟萃，1995；10(4)：153-154(收稿 1997-07-16 修回 1997-07-22), 百拇医药(颜学兵 魏 来 吴文漪)