黑色素斑胃肠道息肉病染色体不稳定性和肿瘤易感性
解放军264中心医院 山西省太原市 030001
Subject headings pigmentation/etiology; colonic neoplasms/genetics; colonic polyps/genetics; chromosome fragils sites; chromosome aberrations; oncogenes
主题词 色素沉着/病因学；结肠肿瘤/遗传学；结肠息肉/遗传学；染色体脆性位点；染色体畸变；癌基因
中国图书资料分类号 R735.35
1 对象和方法
1.1 对象 1990年～1995年经体检患者唇、颊粘膜，指趾有黑斑；结肠镜检，结肠内有息肉确诊为黑色素斑胃肠道息肉病(PJS)7例，患者来自A、B两家系. A家系3例，B家系4例；7例家族成员均系A、B两家系患者的一级亲属，例数同上组，并以不饮酒及无其它诱变物质接触史两家系7例健康人作为对照组.
, 百拇医药
1.2 方法 取供血者外周血接种于含25%优质小牛血清 (fos)TC-199(Nissut)培养基 中(pH 7.5)，37℃恒温培养72h，加入fudR 0.1ml，使最终浓度为0.05/ml，继续培养17h，再加入咖啡因，最终浓度为2.2μg/L，经6h后(终止培养前2h～3h)加入秋水仙素，最终浓度为0.04μg/L，按常规收获制片，胰酶消化显G带处理. 镜下观察100个以上中期分裂相细胞、记录染色体及其裂隙数目，凡有一次即记为1次畸变，并做显微摄影. 分析标准：每例供血者观察100个以上中期分裂相细胞，作染色体数量和畸变结构率分析；选择分散良好，长度适中的染色体；G显带处理后，确定裂隙部位，显微照相，按HGM公布确认的脆性位点定位. c-fra出现3次以上. r-fra、癌基因位点，癌断裂点出现1次均统计在内，计算fra数量，表达次数、频率、与癌基因位点、癌断裂点的同位率.
2 结果
, 百拇医药 2.1 脆性位点分析 3组成员观察中期分裂相细胞，PJS患者组共752个，其家族成员组748个，正常组720个. 结果显示：c-fra出现3次以上，r-fra、癌基因位点，癌断裂点出现1次以上，PJS患者组共检出34个脆性位点、表达179次，表达率为25.6%，涉及16条染色体. 出现频率最多的是2，3，6，7号染色体，都在17次以上，其次为16q23表达13次；其家庭成员组为脆性位点8个11次，表达率为1.6%，涉及8条染色体，正常组脆性位点3个6次，表达率为0.9%，涉及4条染色体(P<0.01，表1).
表1 3组fra与癌基因位点癌断裂点同位频率
, 百拇医药
a：癌断裂点；c：癌基因位点. bP<0.01， vs PJS家族组；dP<0.01， vs 正常对照组.
2.2 脆性位点与癌基因、癌断裂点的关系 从表1中统计资料中可以看出，PJS患者组和其家族成员中的染色体脆性位点与癌基因位点、癌断裂点同位率明显高于健康对照组.
3 讨论
有关该病结肠息肉能否癌变，目前尚无定论[2]. 我们曾报道了三家系15例PJS患者，其中3例死于结肠息肉癌变，1例死于卵巢癌[1]. 研究该病染色体不稳定性和肿瘤易感性，有助于揭示其癌变的物质基础，并指示患者是否已是癌前改变的高危对象和为早发现、早治疗提供有力依据. 本组PJS患者fra与癌基因位点，癌断裂点同位10个，占所统计fra的29.4%，表达次数的37.4%，此结果说明该病染色体是很不稳定的. 目前普遍认为，细胞遗传物质的不稳定性和 个体患癌的易感性有明显关系，这为靶细胞两次突变奠定了基础，使肿瘤易于发生[3]，Yunis进一步指出，fra至少有两个方面与肿瘤发生有关，一是肿瘤染色体重排的易感部位，二是与癌基因位点和癌断裂点同位或相邻，在多种因素作用下，癌基因易被激活，导致癌的发生[4]，二者关系密切.
, 百拇医药
3p14是人类常出现fra的区带，属DNA损伤修复抑制区，易损伤而不易修复[5]. 我们在3p14区带检出fra 33次，表达率为4.7%；PJS家族成员组检出3次，表达率为0.43%；正常对照组检出 2次，表达率为0.29%. PJS患者的fra在3p14的表达率是家族成员的10.9倍，正常人的16.2倍，并且亦明显高于其他肿瘤的表达率. 此点很可能是在PJS结肠息肉癌变中起着重要作用或可能是控制该病的基因所在.
总之，PJS染色体不但具有很强的不稳定性，而且fra与癌基因位点，癌断裂点同位甚多，图1. 频率亦很高，说明该病有较强的肿瘤遗传易感性，其结肠息肉癌变是可能的.
图1 黑色素斑胃肠道息肉病染色体.
, 百拇医药 4 参考文献
1 康连春，张家芳，郭凌，等.黑色素斑胃肠道息肉病. 中华医学遗传学杂志，1996；(13)：6：386
2 吴阶平，袭法祖，主编. 黄家驷外科学. 北京人民卫生院出版社，1992：1991-1992
3 HSU TC. Genetic instability in the human Population: a working hypothesis. Heredic, 1983;(98):110
4 Smith DM, Gorff DE. Determination of cellular oncogrne rearrangement of amplification in ovarian adenocarcinomas.
Am J Obstet Gynecol, 1989;16(4):911
5 Smeets DHCM, Scheres JMJC, Hustinx TWJ. The most common fragile site in man is 3q14. Hum Genet, 1986;72:215
(收稿 1997-04-29 修回 1997-08-21), 百拇医药(康连春 范登华 郭 凌 张家芳 张世华 白 玲)
Subject headings pigmentation/etiology; colonic neoplasms/genetics; colonic polyps/genetics; chromosome fragils sites; chromosome aberrations; oncogenes
主题词 色素沉着/病因学；结肠肿瘤/遗传学；结肠息肉/遗传学；染色体脆性位点；染色体畸变；癌基因
中国图书资料分类号 R735.35
1 对象和方法
1.1 对象 1990年～1995年经体检患者唇、颊粘膜，指趾有黑斑；结肠镜检，结肠内有息肉确诊为黑色素斑胃肠道息肉病(PJS)7例，患者来自A、B两家系. A家系3例，B家系4例；7例家族成员均系A、B两家系患者的一级亲属，例数同上组，并以不饮酒及无其它诱变物质接触史两家系7例健康人作为对照组.
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1.2 方法 取供血者外周血接种于含25%优质小牛血清 (fos)TC-199(Nissut)培养基 中(pH 7.5)，37℃恒温培养72h，加入fudR 0.1ml，使最终浓度为0.05/ml，继续培养17h，再加入咖啡因，最终浓度为2.2μg/L，经6h后(终止培养前2h～3h)加入秋水仙素，最终浓度为0.04μg/L，按常规收获制片，胰酶消化显G带处理. 镜下观察100个以上中期分裂相细胞、记录染色体及其裂隙数目，凡有一次即记为1次畸变，并做显微摄影. 分析标准：每例供血者观察100个以上中期分裂相细胞，作染色体数量和畸变结构率分析；选择分散良好，长度适中的染色体；G显带处理后，确定裂隙部位，显微照相，按HGM公布确认的脆性位点定位. c-fra出现3次以上. r-fra、癌基因位点，癌断裂点出现1次均统计在内，计算fra数量，表达次数、频率、与癌基因位点、癌断裂点的同位率.
2 结果
, 百拇医药 2.1 脆性位点分析 3组成员观察中期分裂相细胞，PJS患者组共752个，其家族成员组748个，正常组720个. 结果显示：c-fra出现3次以上，r-fra、癌基因位点，癌断裂点出现1次以上，PJS患者组共检出34个脆性位点、表达179次，表达率为25.6%，涉及16条染色体. 出现频率最多的是2，3，6，7号染色体，都在17次以上，其次为16q23表达13次；其家庭成员组为脆性位点8个11次，表达率为1.6%，涉及8条染色体，正常组脆性位点3个6次，表达率为0.9%，涉及4条染色体(P<0.01，表1).
表1 3组fra与癌基因位点癌断裂点同位频率
| 癌基因位点 | 1q25a | 3p14a | 7q32c | 7q22ca | 8q22ca | 8q24ca | 11q13ca | 12q13ca | 14q24ca | 2q22c | 合计 | 符合频率 |
| 与癌断裂点 | ARG | fas | met | mas | myc | sec | int | fas | ras | |||
| FJS患者组 | 1 | 33 | 5 | 7 | 7 | 2 | 3 | 2 | 2 | 5 | 67 | 6.7b |
| PJS家族组 | 0 | 3 | 1 | 1 | 1 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 | 8 | 0.8d |
| 正常对照组 | 0 | 2 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 3 | 0.3 |
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a：癌断裂点；c：癌基因位点. bP<0.01， vs PJS家族组；dP<0.01， vs 正常对照组.
2.2 脆性位点与癌基因、癌断裂点的关系 从表1中统计资料中可以看出，PJS患者组和其家族成员中的染色体脆性位点与癌基因位点、癌断裂点同位率明显高于健康对照组.
3 讨论
有关该病结肠息肉能否癌变，目前尚无定论[2]. 我们曾报道了三家系15例PJS患者，其中3例死于结肠息肉癌变，1例死于卵巢癌[1]. 研究该病染色体不稳定性和肿瘤易感性，有助于揭示其癌变的物质基础，并指示患者是否已是癌前改变的高危对象和为早发现、早治疗提供有力依据. 本组PJS患者fra与癌基因位点，癌断裂点同位10个，占所统计fra的29.4%，表达次数的37.4%，此结果说明该病染色体是很不稳定的. 目前普遍认为，细胞遗传物质的不稳定性和 个体患癌的易感性有明显关系，这为靶细胞两次突变奠定了基础，使肿瘤易于发生[3]，Yunis进一步指出，fra至少有两个方面与肿瘤发生有关，一是肿瘤染色体重排的易感部位，二是与癌基因位点和癌断裂点同位或相邻，在多种因素作用下，癌基因易被激活，导致癌的发生[4]，二者关系密切.
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3p14是人类常出现fra的区带，属DNA损伤修复抑制区，易损伤而不易修复[5]. 我们在3p14区带检出fra 33次，表达率为4.7%；PJS家族成员组检出3次，表达率为0.43%；正常对照组检出 2次，表达率为0.29%. PJS患者的fra在3p14的表达率是家族成员的10.9倍，正常人的16.2倍，并且亦明显高于其他肿瘤的表达率. 此点很可能是在PJS结肠息肉癌变中起着重要作用或可能是控制该病的基因所在.
总之，PJS染色体不但具有很强的不稳定性，而且fra与癌基因位点，癌断裂点同位甚多，图1. 频率亦很高，说明该病有较强的肿瘤遗传易感性，其结肠息肉癌变是可能的.
图1 黑色素斑胃肠道息肉病染色体.
, 百拇医药 4 参考文献
1 康连春，张家芳，郭凌，等.黑色素斑胃肠道息肉病. 中华医学遗传学杂志，1996；(13)：6：386
2 吴阶平，袭法祖，主编. 黄家驷外科学. 北京人民卫生院出版社，1992：1991-1992
3 HSU TC. Genetic instability in the human Population: a working hypothesis. Heredic, 1983;(98):110
4 Smith DM, Gorff DE. Determination of cellular oncogrne rearrangement of amplification in ovarian adenocarcinomas.
Am J Obstet Gynecol, 1989;16(4):911
5 Smeets DHCM, Scheres JMJC, Hustinx TWJ. The most common fragile site in man is 3q14. Hum Genet, 1986;72:215
(收稿 1997-04-29 修回 1997-08-21), 百拇医药(康连春 范登华 郭 凌 张家芳 张世华 白 玲)