乙型肝硬变患者外周血IL-2，IL-2R与肝功能的关系
作者：靖大道1 邱德凯2
单位：1上海市第一人民医院消化科 200080；2上海市消化疾病研究所 200001
关键词：高血压，门脉/病理生理学；胃/病理生理学；胃粘膜/病理生理学
乙型肝硬变患者外周血IL
Relationship between IL-2 activity, IL-2R expression and liver function in patients with post-hepatitis B cirrhosis
JING Da-Dao1 and QIU De-Kai2
, 百拇医药
1Department of Gastroenterology, Shanghai First municipal People＇s Hospital, Shanghai 200080, China
2Shanghai Institute of Digestive Diseases, Shanghai 200001, China
Subject headings hypertension, portal/physiopathology; stomach/physiopathology; gastric mucosa/physiopathology
Abstract
AIM To explore the correlation between liver function states and IL-2 activity and IL-2R expression in patients with post-hepatitis B cirrhosis (PHC).
, 百拇医药
METHODS IL-2 production and IL-2R expression on peripheral blood lymphocytes (PBL) induced by PHA-P, the serum level of soluble IL-2 receptor in 56 patients with PHC and in 24 healthy adults as control were measured by the modified MTT method, flow cytometry assay and ELISA method, respectively.
RESULTS IL-2R expression and IL-2 production in PHC patients were much lower than those in the control group (t=2.270 and 4.633，P<0.05 and P<0.01, respectively), but serum sIL-2R level was significantly higher than that in the control group (t=6.219，P<0.01). A significant linear correlation was found between IL-2 production and IL-2R expression (PHC group: r=0.414, P<0.01; control group: r=0.804，P<0.01), while a significant reverse correlation was found between IL-2 activity and serum sIL-2R level (PHC group: r=-0.506, P<0.01; control group: r=-0.422, P<0.05). With Child-Pugh＇s classification of cirrhosis, we found that the poorer the liver function, the lower the IL-2R expression and IL-2 production, and the higher the sIL-2R level.
, http://www.100md.com
CONCLUSION The function of IL-2 system in patients with PHC was decreased and closely correlated with their liver function state.
中国图书资料分类号 R575.290.23
摘 要
目的 探讨乙型肝炎后肝硬变(PHC)患者外周血淋巴细胞(PBL)IL-2活性，IL-2R表达与肝功能的关系.
方法 PHC患者56例，按Child-Pugh分级法将其肝功能状态分成A，B，C三级，检测其IL-2R的表达，IL-2的生成及血清可溶性IL-2受体(sIL-2R)的水平，并与24例健康成人进行比较.
结果 PHC组PBL经PHA-P诱导的IL-2R表达和IL-2生成均显著低于对照组(t=2.270和4.633，P<0.05和P<0.01)，而血清sIL-2R水平则显著高于对照组(t=6.219，P<0.01). PHC组和对照组的IL-2活性与IL-2R表达率之间呈正相关(PHC组：r=0.414，P<0.01;对照组：r=0.804，P<0.01)，与血清sIL-2R水平则呈负相关(PHC组：r=-0.506，P<0.01； 对照组：r=-0.422，P<0.05). PHC患者随着肝功能恶化(Child-Pugh A，B，C三级之降低)，PBL经PHA-P诱导的IL-2R表达和IL-2生成亦越低，而sIL-2R水平则越高.
, 百拇医药
结论 PHC患者IL-2R系统的功能有障碍与缺陷，而且这种障碍与缺陷与其肝功能状态有密切关系.
0 引言
慢性肝炎，肝硬变患者外周IL-2及IL-2R的研究很多，如IL-2R表达障碍，IL-2活性低下等[1-3]. 但系统研究这些改变及其与肝功能分级的关系，尚未见有报道. 我们较全面地观察了56例乙型肝炎后肝硬变(PHC)患者外周血淋巴细胞(PBL)IL-2R的表达、IL-2活性、血清sIL-2R水平及其与肝功能Child-Pugh分级的关系，旨在对PHC患者细胞免疫功能紊乱的机制作进一步的探讨.
1 对象和方法
1.1 对象 PHC患者56例，男36例，女20例；年龄27岁～65岁，平均47.9岁. 选择条件：①外科手术和(或)肝穿刺病理活检证实为PHC；②血清HBV标志物(HBsAg,HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HBV-DNA)至少有两项阳性；③排除肝癌及其他器官的肿瘤和感染，肾功能衰竭等；④近6mo内未用过任何免疫调节药物. 正常健康献血员24例作对照：男16例，女8例；年龄26岁～64岁，平均42.5岁. 选择条件：无肝病及其他器官疾病史，HBV，HCV标志物检查2次以上阴性；肝功能多次多项检查正常.
, 百拇医药
1.2 方法 外周血IL-2的诱生和IL-2R的诱导参见文献[4]. IL-2R表达率测定，IL-2活性及sIL-2R检测分别采用流式细胞仪分析法、MTT比色法和ELISA法[1,3,4]. 肝功能分级采用Child-Pugh分级法[5].
统计学处理 各免疫学指标间的相互关系用相关系数分析法，余均采用t检验.
2 结果
2.1 PHC患者PBL的IL-2活性、IL-2R表达及血清sIL-2R水平 PHC患者PBL在体外经PHA-P诱导产生的IL-2活性及IL-2R表达均较对照组显著低下(t=4.633和2.270，P<0.01和P<0.05)；而其血清sIL-2R则较对照组显著升高(t=6.219，P<0.01，表1).
2.2 IL-2活性与IL-2R表达及血清sIL-2R水平的关系 PHC组和对照组的IL-2活性与IL-2R表达率之间呈非常显著的正相关(PHC组：r=0.414，P<0.01；对照组：r=0.804，P<0.01)，而与血清sIL-2R水平则呈非常显著的负相关(PHC组：r=-0.506，P<0.01；对照组：r=-0.422，P<0.05).
, http://www.100md.com
2.3 PHC患者免疫指标与肝功能分级的关系 对56例PHC患者肝功能按Child-Pugh分级法进行分级(表1)，结果显示，PHC患者PBL的IL-2R表达率、IL-2诱生活性按A，B，C三级依次递减，而血清中sIL-2R水平则依次递增，其中A级与B级比较，IL-2活性、sIL-2R水平差异有显著性(t=2.250，2.191，P<0.05，<0.05)，A级和C级比较，IL-2R，IL-2和sIL-2R差异均有显著性(t=2.501，4.213和3.616，P<0.05，<0.01和<0.01).表1 肝硬变患者免疫学指标与肝功能Child-Pugh分级
分组
n
IL-2R(%)
IL-2(kU/L)
sIL-2R(kU/L)
, http://www.100md.com
对照组
24
47.5±9.5
91±27
238±70
肝硬变组
56
42.2±9.8a
68±18b
357±82b
Child-Pugh A
20
, http://www.100md.com
45.6±9.4
78±13
317±57
B
24
41.5±10.2
65±20c
362±75c
C
12
37.3±8.3c
58±12d
, http://www.100md.com
415±97d
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组； cP<0.05，dP<0.01，vs A级.
3 讨论
在细胞免疫中，T细胞产生的IL-2是机体复杂免疫网络中起调节作用的一种非常重要的淋巴因子. IL-2的免疫调节作用是通过与其效应细胞表面高亲和力受体(IL-2R)相结合而实现的. 因而，外周血中IL-2活性及IL-2R表达可从一个侧面反映机体细胞免疫的功能状况. 本结果表明，PHC患者PBL的IL-2的生成及IL-2R的表达均显著低下，二者之间有显著的正相关性，并且与血清sIL-2R水平升高呈非常显著的负相关. 这与国内外一些研究报道一致[1-3]. 同时，我们亦发现，随着肝功能Child-Pugh分级按A，B，C三级逐渐下降，上述这种改变亦越明显. 这提示PHC患者整个IL-2系统的功能均有障碍与缺陷. 而且这种障碍和缺陷与PHC患者的肝功能状态有密切关系.
, 百拇医药
对PHC患者IL-2系统的功能障碍与缺陷的机制，我们推测可能有以下几个方面：①IL-2生成细胞的数量和功能异常：Th/Ti细胞(CD+4)是IL-2生成的主要细胞，其功能与数量异常将直接影响IL-2的生成与活性. ②T抑制细胞(Ts)活性增强，IL-2的产生受多细胞和因子影响，Ts活性过强，亦可抑制IL-2的合成和分泌. 有研究表明，应用H2受体拮抗剂，抑制Ts细胞表面的组胺受体，可阻断其免疫抑制作用，使IL-2产生增加[2]. ③肝免疫抑制因子作用，人肝浸液中含有一种可溶性抑制因子，能强烈抑制有丝分裂原刺激的淋巴细胞增殖反应. 这种免疫抑制因子是由损伤的肝细胞释放的，具有精胺酸酶活性[6]. 慢性HBV感染及肝硬变失代偿时，肝细胞受损，可释放肝免疫抑制因子入血，从而抑制T细胞增殖、IL-2生成及IL-2R的表达. ④血清sIL-2R作用，sIL-2R是由IL-2R P55蛋白(IL-2R β链)脱落而来. 一般认为，sIL-2R从细胞膜上脱落减低了IL-2R的密度，作为一种自我调节手段，控制活化的T，B等细胞的过度免疫应答而维持机体内免疫稳定. 但越来越多的实验表明[3，7]，sIL-2R对IL-2起着‘封闭因子’作用，抑制淋巴细胞的增殖，下向调节免疫反应. 慢乙肝和PHC患者，体液免疫增强，sIL-2R从大量活化的B细胞膜上脱落. 同时，肝脏对sIL-2R清除能力减低，致使血清sIL-2R水平异常升高，反馈性抑制IL-2的生成及IL-2R的表达[7]. 本结果显示，PHC患者血清sIL-2R水平异常升高亦证明了这点.
, 百拇医药
IL-2系统功能低下和缺陷势必影响其他细胞因子(如干扰素)的生成和功能，乃至影响整个机体细胞免疫功能，从而导致PHC患者易于感染和并发肝癌，并使其肝功能状况进一步恶化. 这提示应用IL-2治疗可望增强和调节PHC患者的细胞免疫功能，并作为防治感染和肿瘤的手段之一.
靖大道，男，1965-06-16生，安徽省泗县人，汉族. 1987年蚌埠医学院本科毕业，1994年上海第二医科大学消化病学硕士，主治医师，主要从事慢性肝病及胃肠疾病的诊治研究，发表论文9篇.
通讯作者 靖大道，200080，上海市第一人民医院消化科，上海市武进路85号.
Correspondence to:JING Da-Dao, Department of Gastroenterology, Shanghai First Municipal People＇s Hospital, 85 Wujinlu, Shanghai 200080, China
, 百拇医药
Tel. +86*21*63240090
收稿日期 1998-04-01
4 参考文献
1 Masumoto T, Onji M, Ohta Y. Decreased interleukin-2 receptor β chain expression by peripheral blood lymphocytes in chronic liver disease. J Gastroenterol Hepatol, 1992;7(4):399-404
2 闻勤生，张国治，孔宪涛. 甲氰脒胍对肝硬化患者白细胞介素2活性影响的研究. 临床肝胆病杂志，1993；9(3)：150-151
3 赵彩彦，刘金星，汤慧华，冯忠军，甄真，张素环. 病毒性肝炎和原发性肝癌患者血清IL2相关指标的意义. 华人消化杂志，1998；6(6)：479-481
, 百拇医药
4 靖大道，邱德凯，萧树东，曾民德. 虫草多糖对人外周血IL-2、IL-2R及IFN-γ调节作用的研究. 上海免疫学杂志，1995；15：321-323
5 Desmet VJ, Gerber M, Hoofnagle JH, Manns M, Scheuer PJ. Classification of chronic hepatitis: diagnosis, grading and staging. Hepatology, 1994;19(6):1513-1520
6 Su HL, Huang MH, Yu CL, Han SH, Chiang BN, Wang SR. The mechanisms of inhibitory effects of liver extract on lymphocyte proliferation. Immunol Invest, 1987;16(4):281-294
7 Chopra RK, Powers DC, Kendig NE, Adler WH, Nagel JE. Soluble interleukin 2 receptors from mitogen stimulated human peripheral blood lymphocytes bind interleukin 2 and inhibit interleukin 2 dependent cell proliferation. Immunol Invest, 1989;18(8):961-973, http://www.100md.com(靖大道1 邱德凯2)
单位：1上海市第一人民医院消化科 200080；2上海市消化疾病研究所 200001
关键词：高血压，门脉/病理生理学；胃/病理生理学；胃粘膜/病理生理学
乙型肝硬变患者外周血IL
Relationship between IL-2 activity, IL-2R expression and liver function in patients with post-hepatitis B cirrhosis
JING Da-Dao1 and QIU De-Kai2
, 百拇医药
1Department of Gastroenterology, Shanghai First municipal People＇s Hospital, Shanghai 200080, China
2Shanghai Institute of Digestive Diseases, Shanghai 200001, China
Subject headings hypertension, portal/physiopathology; stomach/physiopathology; gastric mucosa/physiopathology
Abstract
AIM To explore the correlation between liver function states and IL-2 activity and IL-2R expression in patients with post-hepatitis B cirrhosis (PHC).
, 百拇医药
METHODS IL-2 production and IL-2R expression on peripheral blood lymphocytes (PBL) induced by PHA-P, the serum level of soluble IL-2 receptor in 56 patients with PHC and in 24 healthy adults as control were measured by the modified MTT method, flow cytometry assay and ELISA method, respectively.
RESULTS IL-2R expression and IL-2 production in PHC patients were much lower than those in the control group (t=2.270 and 4.633，P<0.05 and P<0.01, respectively), but serum sIL-2R level was significantly higher than that in the control group (t=6.219，P<0.01). A significant linear correlation was found between IL-2 production and IL-2R expression (PHC group: r=0.414, P<0.01; control group: r=0.804，P<0.01), while a significant reverse correlation was found between IL-2 activity and serum sIL-2R level (PHC group: r=-0.506, P<0.01; control group: r=-0.422, P<0.05). With Child-Pugh＇s classification of cirrhosis, we found that the poorer the liver function, the lower the IL-2R expression and IL-2 production, and the higher the sIL-2R level.
, http://www.100md.com
CONCLUSION The function of IL-2 system in patients with PHC was decreased and closely correlated with their liver function state.
中国图书资料分类号 R575.290.23
摘 要
目的 探讨乙型肝炎后肝硬变(PHC)患者外周血淋巴细胞(PBL)IL-2活性，IL-2R表达与肝功能的关系.
方法 PHC患者56例，按Child-Pugh分级法将其肝功能状态分成A，B，C三级，检测其IL-2R的表达，IL-2的生成及血清可溶性IL-2受体(sIL-2R)的水平，并与24例健康成人进行比较.
结果 PHC组PBL经PHA-P诱导的IL-2R表达和IL-2生成均显著低于对照组(t=2.270和4.633，P<0.05和P<0.01)，而血清sIL-2R水平则显著高于对照组(t=6.219，P<0.01). PHC组和对照组的IL-2活性与IL-2R表达率之间呈正相关(PHC组：r=0.414，P<0.01;对照组：r=0.804，P<0.01)，与血清sIL-2R水平则呈负相关(PHC组：r=-0.506，P<0.01； 对照组：r=-0.422，P<0.05). PHC患者随着肝功能恶化(Child-Pugh A，B，C三级之降低)，PBL经PHA-P诱导的IL-2R表达和IL-2生成亦越低，而sIL-2R水平则越高.
, 百拇医药
结论 PHC患者IL-2R系统的功能有障碍与缺陷，而且这种障碍与缺陷与其肝功能状态有密切关系.
0 引言
慢性肝炎，肝硬变患者外周IL-2及IL-2R的研究很多，如IL-2R表达障碍，IL-2活性低下等[1-3]. 但系统研究这些改变及其与肝功能分级的关系，尚未见有报道. 我们较全面地观察了56例乙型肝炎后肝硬变(PHC)患者外周血淋巴细胞(PBL)IL-2R的表达、IL-2活性、血清sIL-2R水平及其与肝功能Child-Pugh分级的关系，旨在对PHC患者细胞免疫功能紊乱的机制作进一步的探讨.
1 对象和方法
1.1 对象 PHC患者56例，男36例，女20例；年龄27岁～65岁，平均47.9岁. 选择条件：①外科手术和(或)肝穿刺病理活检证实为PHC；②血清HBV标志物(HBsAg,HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HBV-DNA)至少有两项阳性；③排除肝癌及其他器官的肿瘤和感染，肾功能衰竭等；④近6mo内未用过任何免疫调节药物. 正常健康献血员24例作对照：男16例，女8例；年龄26岁～64岁，平均42.5岁. 选择条件：无肝病及其他器官疾病史，HBV，HCV标志物检查2次以上阴性；肝功能多次多项检查正常.
, 百拇医药
1.2 方法 外周血IL-2的诱生和IL-2R的诱导参见文献[4]. IL-2R表达率测定，IL-2活性及sIL-2R检测分别采用流式细胞仪分析法、MTT比色法和ELISA法[1,3,4]. 肝功能分级采用Child-Pugh分级法[5].
统计学处理 各免疫学指标间的相互关系用相关系数分析法，余均采用t检验.
2 结果
2.1 PHC患者PBL的IL-2活性、IL-2R表达及血清sIL-2R水平 PHC患者PBL在体外经PHA-P诱导产生的IL-2活性及IL-2R表达均较对照组显著低下(t=4.633和2.270，P<0.01和P<0.05)；而其血清sIL-2R则较对照组显著升高(t=6.219，P<0.01，表1).
2.2 IL-2活性与IL-2R表达及血清sIL-2R水平的关系 PHC组和对照组的IL-2活性与IL-2R表达率之间呈非常显著的正相关(PHC组：r=0.414，P<0.01；对照组：r=0.804，P<0.01)，而与血清sIL-2R水平则呈非常显著的负相关(PHC组：r=-0.506，P<0.01；对照组：r=-0.422，P<0.05).
, http://www.100md.com
2.3 PHC患者免疫指标与肝功能分级的关系 对56例PHC患者肝功能按Child-Pugh分级法进行分级(表1)，结果显示，PHC患者PBL的IL-2R表达率、IL-2诱生活性按A，B，C三级依次递减，而血清中sIL-2R水平则依次递增，其中A级与B级比较，IL-2活性、sIL-2R水平差异有显著性(t=2.250，2.191，P<0.05，<0.05)，A级和C级比较，IL-2R，IL-2和sIL-2R差异均有显著性(t=2.501，4.213和3.616，P<0.05，<0.01和<0.01).表1 肝硬变患者免疫学指标与肝功能Child-Pugh分级
分组
n
IL-2R(%)
IL-2(kU/L)
sIL-2R(kU/L)
, http://www.100md.com
对照组
24
47.5±9.5
91±27
238±70
肝硬变组
56
42.2±9.8a
68±18b
357±82b
Child-Pugh A
20
, http://www.100md.com
45.6±9.4
78±13
317±57
B
24
41.5±10.2
65±20c
362±75c
C
12
37.3±8.3c
58±12d
, http://www.100md.com
415±97d
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组； cP<0.05，dP<0.01，vs A级.
3 讨论
在细胞免疫中，T细胞产生的IL-2是机体复杂免疫网络中起调节作用的一种非常重要的淋巴因子. IL-2的免疫调节作用是通过与其效应细胞表面高亲和力受体(IL-2R)相结合而实现的. 因而，外周血中IL-2活性及IL-2R表达可从一个侧面反映机体细胞免疫的功能状况. 本结果表明，PHC患者PBL的IL-2的生成及IL-2R的表达均显著低下，二者之间有显著的正相关性，并且与血清sIL-2R水平升高呈非常显著的负相关. 这与国内外一些研究报道一致[1-3]. 同时，我们亦发现，随着肝功能Child-Pugh分级按A，B，C三级逐渐下降，上述这种改变亦越明显. 这提示PHC患者整个IL-2系统的功能均有障碍与缺陷. 而且这种障碍和缺陷与PHC患者的肝功能状态有密切关系.
, 百拇医药
对PHC患者IL-2系统的功能障碍与缺陷的机制，我们推测可能有以下几个方面：①IL-2生成细胞的数量和功能异常：Th/Ti细胞(CD+4)是IL-2生成的主要细胞，其功能与数量异常将直接影响IL-2的生成与活性. ②T抑制细胞(Ts)活性增强，IL-2的产生受多细胞和因子影响，Ts活性过强，亦可抑制IL-2的合成和分泌. 有研究表明，应用H2受体拮抗剂，抑制Ts细胞表面的组胺受体，可阻断其免疫抑制作用，使IL-2产生增加[2]. ③肝免疫抑制因子作用，人肝浸液中含有一种可溶性抑制因子，能强烈抑制有丝分裂原刺激的淋巴细胞增殖反应. 这种免疫抑制因子是由损伤的肝细胞释放的，具有精胺酸酶活性[6]. 慢性HBV感染及肝硬变失代偿时，肝细胞受损，可释放肝免疫抑制因子入血，从而抑制T细胞增殖、IL-2生成及IL-2R的表达. ④血清sIL-2R作用，sIL-2R是由IL-2R P55蛋白(IL-2R β链)脱落而来. 一般认为，sIL-2R从细胞膜上脱落减低了IL-2R的密度，作为一种自我调节手段，控制活化的T，B等细胞的过度免疫应答而维持机体内免疫稳定. 但越来越多的实验表明[3，7]，sIL-2R对IL-2起着‘封闭因子’作用，抑制淋巴细胞的增殖，下向调节免疫反应. 慢乙肝和PHC患者，体液免疫增强，sIL-2R从大量活化的B细胞膜上脱落. 同时，肝脏对sIL-2R清除能力减低，致使血清sIL-2R水平异常升高，反馈性抑制IL-2的生成及IL-2R的表达[7]. 本结果显示，PHC患者血清sIL-2R水平异常升高亦证明了这点.
, 百拇医药
IL-2系统功能低下和缺陷势必影响其他细胞因子(如干扰素)的生成和功能，乃至影响整个机体细胞免疫功能，从而导致PHC患者易于感染和并发肝癌，并使其肝功能状况进一步恶化. 这提示应用IL-2治疗可望增强和调节PHC患者的细胞免疫功能，并作为防治感染和肿瘤的手段之一.
靖大道，男，1965-06-16生，安徽省泗县人，汉族. 1987年蚌埠医学院本科毕业，1994年上海第二医科大学消化病学硕士，主治医师，主要从事慢性肝病及胃肠疾病的诊治研究，发表论文9篇.
通讯作者 靖大道，200080，上海市第一人民医院消化科，上海市武进路85号.
Correspondence to:JING Da-Dao, Department of Gastroenterology, Shanghai First Municipal People＇s Hospital, 85 Wujinlu, Shanghai 200080, China
, 百拇医药
Tel. +86*21*63240090
收稿日期 1998-04-01
4 参考文献
1 Masumoto T, Onji M, Ohta Y. Decreased interleukin-2 receptor β chain expression by peripheral blood lymphocytes in chronic liver disease. J Gastroenterol Hepatol, 1992;7(4):399-404
2 闻勤生，张国治，孔宪涛. 甲氰脒胍对肝硬化患者白细胞介素2活性影响的研究. 临床肝胆病杂志，1993；9(3)：150-151
3 赵彩彦，刘金星，汤慧华，冯忠军，甄真，张素环. 病毒性肝炎和原发性肝癌患者血清IL2相关指标的意义. 华人消化杂志，1998；6(6)：479-481
, 百拇医药
4 靖大道，邱德凯，萧树东，曾民德. 虫草多糖对人外周血IL-2、IL-2R及IFN-γ调节作用的研究. 上海免疫学杂志，1995；15：321-323
5 Desmet VJ, Gerber M, Hoofnagle JH, Manns M, Scheuer PJ. Classification of chronic hepatitis: diagnosis, grading and staging. Hepatology, 1994;19(6):1513-1520
6 Su HL, Huang MH, Yu CL, Han SH, Chiang BN, Wang SR. The mechanisms of inhibitory effects of liver extract on lymphocyte proliferation. Immunol Invest, 1987;16(4):281-294
7 Chopra RK, Powers DC, Kendig NE, Adler WH, Nagel JE. Soluble interleukin 2 receptors from mitogen stimulated human peripheral blood lymphocytes bind interleukin 2 and inhibit interleukin 2 dependent cell proliferation. Immunol Invest, 1989;18(8):961-973, http://www.100md.com(靖大道1 邱德凯2)