TNFα诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡的电镜观察
1第一军医大学南方医院全军消化病研究所 广东省广州市 510515
2第一军医大学病理学教研室 广东省广州市 510515
项目负责人 梁卫江第一军医大学南方医院全军消化病研究所 广东省广州市 510515
收稿日期 1998-08-30
Subject headings colorectal neoplasms; tumor necrosis factor; apoptosis; Lovo cells
主题词 结直肠肿瘤；肿瘤坏死因子；细胞凋亡
摘 要
目的 如何诱导肿瘤细胞凋亡，是目前肿瘤治疗的研究热点之一. 本研究旨在探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α, TNFα)诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡的可能性及其超微结构特点. 为探索肿瘤治疗提供了新途径.
方法 Lovo在体外用RPMI-1640培养液、置5% CO2孵箱、37℃常规培养. 以TNFα终浓度1×104μ/mL作用24，36和48h，诱导Lovo细胞凋亡. 用倒置显微镜直接观察其光镜下形态改变；细胞经戊二醛和饿酸固定、丙酮脱水、环氧树脂包埋、超薄切片、醋酸铀-柠檬酸铅染色，用透射电镜观察其超微结构特点.
结果 ①光镜下，随TNFα作用24h，Lovo细胞由长梭形变为短梭状，胞体缩小；细胞间隙增宽，细胞密度无增加，生长抑制. 作用36h，细胞变为椭圆形，少数短梭状；体积缩小，细胞内颗粒增多；仍贴壁生长. 作用48h，细胞变为圆形，体积更小，颗粒较多，透亮度差；多数仍贴壁生长，少数上浮于液面. ②电镜下，凋亡早期的Lovo细胞外形不规则，胞体大小及胞质变化不大，微绒毛变细，染色质离散，开始向核膜下集中；中期，胞体缩小，胞膜完整，染色质呈颗粒、块状，凝集在核膜内侧、核孔只之间；后期：核裂解，形成凋亡小体，一些未凋亡的肿瘤细胞内可见吞噬的凋亡小体.
结论 TNFα能够诱导大肠癌Lovo细胞凋亡，倒置显微镜下可见其体积缩小、胞内颗粒增多等改变；透射电镜可见凋亡的Lovo细胞具有特征性形态改变. 本研究为TNFα治疗肿瘤提供新的信息和理论依据., 百拇医药(梁卫江1 黄卓垣2 丁彦青2 张万岱1)
2第一军医大学病理学教研室 广东省广州市 510515
项目负责人 梁卫江第一军医大学南方医院全军消化病研究所 广东省广州市 510515
收稿日期 1998-08-30
Subject headings colorectal neoplasms; tumor necrosis factor; apoptosis; Lovo cells
主题词 结直肠肿瘤；肿瘤坏死因子；细胞凋亡
摘 要
目的 如何诱导肿瘤细胞凋亡，是目前肿瘤治疗的研究热点之一. 本研究旨在探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α, TNFα)诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡的可能性及其超微结构特点. 为探索肿瘤治疗提供了新途径.
方法 Lovo在体外用RPMI-1640培养液、置5% CO2孵箱、37℃常规培养. 以TNFα终浓度1×104μ/mL作用24，36和48h，诱导Lovo细胞凋亡. 用倒置显微镜直接观察其光镜下形态改变；细胞经戊二醛和饿酸固定、丙酮脱水、环氧树脂包埋、超薄切片、醋酸铀-柠檬酸铅染色，用透射电镜观察其超微结构特点.
结果 ①光镜下，随TNFα作用24h，Lovo细胞由长梭形变为短梭状，胞体缩小；细胞间隙增宽，细胞密度无增加，生长抑制. 作用36h，细胞变为椭圆形，少数短梭状；体积缩小，细胞内颗粒增多；仍贴壁生长. 作用48h，细胞变为圆形，体积更小，颗粒较多，透亮度差；多数仍贴壁生长，少数上浮于液面. ②电镜下，凋亡早期的Lovo细胞外形不规则，胞体大小及胞质变化不大，微绒毛变细，染色质离散，开始向核膜下集中；中期，胞体缩小，胞膜完整，染色质呈颗粒、块状，凝集在核膜内侧、核孔只之间；后期：核裂解，形成凋亡小体，一些未凋亡的肿瘤细胞内可见吞噬的凋亡小体.
结论 TNFα能够诱导大肠癌Lovo细胞凋亡，倒置显微镜下可见其体积缩小、胞内颗粒增多等改变；透射电镜可见凋亡的Lovo细胞具有特征性形态改变. 本研究为TNFα治疗肿瘤提供新的信息和理论依据., 百拇医药(梁卫江1 黄卓垣2 丁彦青2 张万岱1)