中药清开灵注射液防治小鼠酒精中毒性肝损伤
解放军291医院消化科 内蒙古包头市 014040
杨献英，女，1940-08-18生，黑龙江省哈尔滨市人，汉族. 1964年哈尔滨医科大学医疗系毕业，内科主任，主任医师，从事消化系及内分泌疾病的临床诊治工作，发表论文50篇.
项目负责人 杨献英，014040，解放军291医院消化科，内蒙古包头市东河区康复路.
Correspondence to Xian-Ying Yang, Department of Gastroenterology, Chinese PLA 291 Hospital, Kangfu Road of East River District, Baotou 014040, Neimengu
Tel. +86·472·4163149
, http://www.100md.com
收稿日期 1998-01-02 接收日期 1998-03-04
Treatment of alcoholic liver injury with Qingkailing injection in rats
Xian-Ying Yang, Zhen-Hong Shao, Wan-Li Yang, Mei Qiao, Shi-Jie Li and Lei Yang
Department of Gastroenterology, Chinese PLA 291 Hospital, Baotou 014040, Neimengu
, 百拇医药 Abstract
AIM To study the protective and therapeutic effects of Qingkailing injection on liver alcoholic liver injury in rats.
METHODS At random 40 Wistar male rats were divided into three groups. The normaly fed group included 10 rats which were normaly fed. In the alcohol damaged group 15 rats were normaly fed with alcohol. The Qingkailing group included 15 rats given normal food plus alcohol and Qingkailing injection. All the rats were sacrified after 12 weeks treatment and pathologic examinations of their livers and laboratory examinations including liver function and blood lipoid, were carried out for comparison.
, 百拇医药
RESULTS The liver pathology and liver function and lipoid were similar in normaly fed group and Qingkailing group. While in alcohol damaged group they were obviously abnormal as compared with normaly fed group and Qingkailing group (P<0.05 and <0.01, respectively).
CONCLUSION Qingkailing has a better protective and therapeutic effect in alcoholic liver injury.
Subject headings liver disease, alcololic/therapy; liver disease, alcololic/pathology; drugs, Chinese herbal
, 百拇医药
Yang XY, Shao ZH, Yang WL, Qiao M, Li SJ, Yang L. Treatment of alcoholic liver injury with Qingkailing injection in rats.
Huaren Xiaohua Zazhi,1998;6(10):847-849
摘要
目的 研究中药清开灵注射液防治小鼠酒精中毒性肝损伤的作用.
方法 采用Wistar ♂大白鼠40只，随机分为正常喂养组10只，单纯酒精损伤组(正常喂养外每日灌注白酒)15只，清开灵注射组(除上述处理外，每日皮下注射清开灵1mL)15只. 连续观察12wk后，将上述3组动物全部处死，对其肝脏做病理组织学检查，并测血中肝功及血脂.
, 百拇医药
结果 正常喂养组和清开灵注射组肝脏病理组织学、血清肝功及血脂检查近似，而单纯酒精损伤组病理学检查与血清肝功、血脂均有异常，其肝功与血脂与正常喂养组相比有明显差异(P<0.05及P<0.01).
结论 清开灵有较好的防治酒精性肝损伤作用，值得临床推广应用.
主题词 肝疾病，酒精性/治疗；肝疾病，酒精性/病理学；中草药；中药清开灵
杨献英, 邵振鸿, 杨万里, 乔梅, 李世杰, 杨磊.中药清开灵注射液防治小鼠酒精中毒性肝损伤.华人消化杂志,1998;6(10):847-849
0 引言
我们使用中药清开灵注射液对32例酒精中毒性肝损伤患者进行治疗，取得了较理想的疗效[1]. 为进一步研究清开灵注射液对酒精中毒性肝损伤防护及治疗具体作用，特选用大鼠进行试验研究，现将研究结果报道如下.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 体重250g～350g♂大鼠40只，由包头医学院动物实验室提供. 所用酒精，由包头市转龙液酒厂提供的转龙液牌白酒，酒精浓度550mL/L；清开灵注射液由北京中医药大学药厂生产，批号97041413.
1.2 方法 将受试大鼠随机分为3组(按组分笼，每笼5只). 正常饲养组10只，只按要求喂养(饲料由包头医学院动物实验室提供)，不做任何处理，观察12wk；酒精损伤组15只，除正常喂养外，按(10～12)g/kg酒精量每日灌饲转龙液白酒10mL～15mL，连续灌饲12wk，不注射清开灵；清开灵治疗组15只，除按酒精损伤组于每日上午灌饲白酒及正常喂养外，每日下午给每只大白鼠皮下注射清开灵注射液1mL，连续12wk. 于末次正常饲喂、灌饲白酒及注射清开灵24h后将3组大白鼠全部处死，摘取肝脏，除进行肉眼大体观察外，并同时做病理组织学检查；另外从每只大鼠腹主动脉取血检测肝功能和血脂.
, 百拇医药
2 结果实验过程中酒精灌注组及清开灵治疗组各有一只死亡，从中剔除，以下结果为38只白鼠情况.
2.1 肝脏大体所见 正常喂养组肝脏重11g～19g，表面光滑、呈暗红色、弹性好. 酒精损伤组肝脏重15g～25g，部分肿胀，表面呈灰白色或暗紫色. 清开灵治疗组，肝脏重13g～20g，肉眼所见与正常喂养组基本相同.
2.2 肝脏病理组织学所见 应用HE染色或苏丹Ⅲ脂肪染色观察各组大鼠肝脏形态学改变. 正常喂养组，镜下可见中央静脉周围为放射状排列的呈多面体形状的肝细胞，在细胞中央有大而圆的核，细胞质均匀而丰满(图1). 酒精损伤组：肝组织苏丹Ⅲ染色呈阳性反应，组织切片内显示条索状片状桔黄色，细胞质内可见大小不等，数量不一的脂滴空泡，细胞膜被挤破而融合成大片状脂肪囊式大的脂滴空泡，HE染色镜下可见肝细胞肿胀、核不规则，且被挤到一边，胶质疏松，有空泡变性，小叶中央区有点状坏死，有散在淋巴细胞浸润，尤以汇管区明显，微肝(胆)管内皮细胞肿胀、充血，并有不同程度的空泡变性，间质炎细胞浸润，肝窦扩张、充血(图2-4). 清开灵治疗组：组织苏丹Ⅲ染色呈阴性，HE染色镜下见肝小叶结构完好，未见空泡变性，间质仅有少量淋巴细胞浸润，未见肝窦扩张、充血改变及其他异常(图5).
, 百拇医药
图1 正常大鼠肝组织 HE×100
图2 酒精损伤大鼠肝组织 苏丹Ⅲ染色×100
图3 酒精损伤大鼠肝组织 HE×100
图4 酒精损伤大鼠肝组织 HE×100
图5 清开灵防治大鼠肝组织 HE×100
2.3 实验室检查结果 血清ALT，r-GT，TC，TG检查结果显示3组间有一定差异. 正常喂养组和清开灵治疗组各项结果近似，但和酒精损伤未用清开灵治疗组相比有较明显差异(表1).
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表1 各组大白鼠血清学检测结果 (x±s)
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aP<0.05，bP<0.01，vs 正常组；cP<0.05，dP<0.01，vs 损伤组.
3 讨论
多数学者认为酒精中毒所引起的肝损伤与酒精的代谢产物乙醛的直接毒性作用有关[2]，乙醛可使肝细胞内线粒体受损，从而使肝细胞对脂肪酸分解功能低下，此时机体可动员皮下脂肪组织的脂肪酸向肝内转移，久而久之形成脂肪肝. 另外，乙醛的氧化代谢还可促使活性氧的产生，氧自由基增多，进而造成肝细胞损伤使肝细胞坏死. 本结果证明，酒精损伤组大鼠随着灌饮白酒时间延长，大鼠形体逐渐消瘦皮毛不光滑，不愿活动. 肝脏肿大，表面不光滑，色泽发暗. 肝组织切片苏丹Ⅲ染色呈阳性，镜下可见肝脏有脂肪变性，有的细胞膜被挤破，间质炎细胞浸润. 血清ALT，r-GT，TC均明显升高，而正常喂养组大鼠的肝脏无论大体所见及病理检查结果以及血清ALT，r-GT，TC，TG均正常，说明大量长期饮酒确实能造成肝脏实质损伤，也说明本试验制备的酒精损伤动物模型与周淑琴et al[3]使用酒精灌注可使43%动物发生肝脏损伤所制成实验动物模型的报道一致. 从本实验中还可看出，对灌饲酒精的大鼠每日给予清开灵1mL皮下注射后其肝脏大体所见，病理组织学检查均正常和单纯酒精灌注而不给清开灵者有明显差别. 另外血清ALT，r-GTP，TC，TG的检测结果也可看出单纯酒精灌注组上述结果均高于正常组，尤其与清开灵注射组ALT，r-GTP与TC比较差异更显著.
, 百拇医药
综上所述，我们认为使用清开灵注射液后可减弱酒精代谢产物乙醛对肝脏的直接毒性作用，增强脂肪酸在肝细胞内正常代谢，减少体内皮下脂肪向肝内转移；另外还可使乙醛氧化代谢产生的活性氧减少，氧自由基减少，从而具有抗炎症，保护肝细胞，调节肝脏脂质代谢，改善肝脏功能作用，故对酒精中毒性肝损伤确有良好的防护与治疗作用. 说明我们用清开灵注射液治疗酒精中毒性肝损伤取得的良好效果，是有理论依据的，值得推广.
4 参考文献
1 杨献英,邵振鸿,金英,刘军,杨磊. 中药清开灵注射液治疗酒精中毒性肝损伤32例. 华人消化杂志，1998；6(10)：920
2 大西久仁房. 酒精与肝病. 日本医学介绍，1997；18(1)：6-7
3 周淑琴，贺从义，高殿生，毕玉堂. 实验性慢性酒精中毒对大鼠肝脏损伤的病理形态学观察. 中华病理学杂志，1986；15(2)：136-138, 百拇医药(杨献英 邵振鸿 杨万里 乔梅 李世杰 杨磊)
杨献英，女，1940-08-18生，黑龙江省哈尔滨市人，汉族. 1964年哈尔滨医科大学医疗系毕业，内科主任，主任医师，从事消化系及内分泌疾病的临床诊治工作，发表论文50篇.
项目负责人 杨献英，014040，解放军291医院消化科，内蒙古包头市东河区康复路.
Correspondence to Xian-Ying Yang, Department of Gastroenterology, Chinese PLA 291 Hospital, Kangfu Road of East River District, Baotou 014040, Neimengu
Tel. +86·472·4163149
, http://www.100md.com
收稿日期 1998-01-02 接收日期 1998-03-04
Treatment of alcoholic liver injury with Qingkailing injection in rats
Xian-Ying Yang, Zhen-Hong Shao, Wan-Li Yang, Mei Qiao, Shi-Jie Li and Lei Yang
Department of Gastroenterology, Chinese PLA 291 Hospital, Baotou 014040, Neimengu
, 百拇医药 Abstract
AIM To study the protective and therapeutic effects of Qingkailing injection on liver alcoholic liver injury in rats.
METHODS At random 40 Wistar male rats were divided into three groups. The normaly fed group included 10 rats which were normaly fed. In the alcohol damaged group 15 rats were normaly fed with alcohol. The Qingkailing group included 15 rats given normal food plus alcohol and Qingkailing injection. All the rats were sacrified after 12 weeks treatment and pathologic examinations of their livers and laboratory examinations including liver function and blood lipoid, were carried out for comparison.
, 百拇医药
RESULTS The liver pathology and liver function and lipoid were similar in normaly fed group and Qingkailing group. While in alcohol damaged group they were obviously abnormal as compared with normaly fed group and Qingkailing group (P<0.05 and <0.01, respectively).
CONCLUSION Qingkailing has a better protective and therapeutic effect in alcoholic liver injury.
Subject headings liver disease, alcololic/therapy; liver disease, alcololic/pathology; drugs, Chinese herbal
, 百拇医药
Yang XY, Shao ZH, Yang WL, Qiao M, Li SJ, Yang L. Treatment of alcoholic liver injury with Qingkailing injection in rats.
Huaren Xiaohua Zazhi,1998;6(10):847-849
摘要
目的 研究中药清开灵注射液防治小鼠酒精中毒性肝损伤的作用.
方法 采用Wistar ♂大白鼠40只，随机分为正常喂养组10只，单纯酒精损伤组(正常喂养外每日灌注白酒)15只，清开灵注射组(除上述处理外，每日皮下注射清开灵1mL)15只. 连续观察12wk后，将上述3组动物全部处死，对其肝脏做病理组织学检查，并测血中肝功及血脂.
, 百拇医药
结果 正常喂养组和清开灵注射组肝脏病理组织学、血清肝功及血脂检查近似，而单纯酒精损伤组病理学检查与血清肝功、血脂均有异常，其肝功与血脂与正常喂养组相比有明显差异(P<0.05及P<0.01).
结论 清开灵有较好的防治酒精性肝损伤作用，值得临床推广应用.
主题词 肝疾病，酒精性/治疗；肝疾病，酒精性/病理学；中草药；中药清开灵
杨献英, 邵振鸿, 杨万里, 乔梅, 李世杰, 杨磊.中药清开灵注射液防治小鼠酒精中毒性肝损伤.华人消化杂志,1998;6(10):847-849
0 引言
我们使用中药清开灵注射液对32例酒精中毒性肝损伤患者进行治疗，取得了较理想的疗效[1]. 为进一步研究清开灵注射液对酒精中毒性肝损伤防护及治疗具体作用，特选用大鼠进行试验研究，现将研究结果报道如下.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 体重250g～350g♂大鼠40只，由包头医学院动物实验室提供. 所用酒精，由包头市转龙液酒厂提供的转龙液牌白酒，酒精浓度550mL/L；清开灵注射液由北京中医药大学药厂生产，批号97041413.
1.2 方法 将受试大鼠随机分为3组(按组分笼，每笼5只). 正常饲养组10只，只按要求喂养(饲料由包头医学院动物实验室提供)，不做任何处理，观察12wk；酒精损伤组15只，除正常喂养外，按(10～12)g/kg酒精量每日灌饲转龙液白酒10mL～15mL，连续灌饲12wk，不注射清开灵；清开灵治疗组15只，除按酒精损伤组于每日上午灌饲白酒及正常喂养外，每日下午给每只大白鼠皮下注射清开灵注射液1mL，连续12wk. 于末次正常饲喂、灌饲白酒及注射清开灵24h后将3组大白鼠全部处死，摘取肝脏，除进行肉眼大体观察外，并同时做病理组织学检查；另外从每只大鼠腹主动脉取血检测肝功能和血脂.
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2 结果实验过程中酒精灌注组及清开灵治疗组各有一只死亡，从中剔除，以下结果为38只白鼠情况.
2.1 肝脏大体所见 正常喂养组肝脏重11g～19g，表面光滑、呈暗红色、弹性好. 酒精损伤组肝脏重15g～25g，部分肿胀，表面呈灰白色或暗紫色. 清开灵治疗组，肝脏重13g～20g，肉眼所见与正常喂养组基本相同.
2.2 肝脏病理组织学所见 应用HE染色或苏丹Ⅲ脂肪染色观察各组大鼠肝脏形态学改变. 正常喂养组，镜下可见中央静脉周围为放射状排列的呈多面体形状的肝细胞，在细胞中央有大而圆的核，细胞质均匀而丰满(图1). 酒精损伤组：肝组织苏丹Ⅲ染色呈阳性反应，组织切片内显示条索状片状桔黄色，细胞质内可见大小不等，数量不一的脂滴空泡，细胞膜被挤破而融合成大片状脂肪囊式大的脂滴空泡，HE染色镜下可见肝细胞肿胀、核不规则，且被挤到一边，胶质疏松，有空泡变性，小叶中央区有点状坏死，有散在淋巴细胞浸润，尤以汇管区明显，微肝(胆)管内皮细胞肿胀、充血，并有不同程度的空泡变性，间质炎细胞浸润，肝窦扩张、充血(图2-4). 清开灵治疗组：组织苏丹Ⅲ染色呈阴性，HE染色镜下见肝小叶结构完好，未见空泡变性，间质仅有少量淋巴细胞浸润，未见肝窦扩张、充血改变及其他异常(图5).
, 百拇医药
图1 正常大鼠肝组织 HE×100
图2 酒精损伤大鼠肝组织 苏丹Ⅲ染色×100
图3 酒精损伤大鼠肝组织 HE×100
图4 酒精损伤大鼠肝组织 HE×100
图5 清开灵防治大鼠肝组织 HE×100
2.3 实验室检查结果 血清ALT，r-GT，TC，TG检查结果显示3组间有一定差异. 正常喂养组和清开灵治疗组各项结果近似，但和酒精损伤未用清开灵治疗组相比有较明显差异(表1).
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表1 各组大白鼠血清学检测结果 (x±s)
| 组别 | ALT | r-GTP | TC | TG |
| 正常组 | 15.97±3.07 | 4.26±0.69 | 1.83±0.19 | 0.32±0.04 |
| 损伤组 | 39.97±9.19b | 13.36±4.35b | 4.25±1.38a | 1.21±0.09b |
| 清开灵组 | 14.42±3.03d | 7.50±1.25d | 2.46±0.91c | 1.12±0.08 |
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aP<0.05，bP<0.01，vs 正常组；cP<0.05，dP<0.01，vs 损伤组.
3 讨论
多数学者认为酒精中毒所引起的肝损伤与酒精的代谢产物乙醛的直接毒性作用有关[2]，乙醛可使肝细胞内线粒体受损，从而使肝细胞对脂肪酸分解功能低下，此时机体可动员皮下脂肪组织的脂肪酸向肝内转移，久而久之形成脂肪肝. 另外，乙醛的氧化代谢还可促使活性氧的产生，氧自由基增多，进而造成肝细胞损伤使肝细胞坏死. 本结果证明，酒精损伤组大鼠随着灌饮白酒时间延长，大鼠形体逐渐消瘦皮毛不光滑，不愿活动. 肝脏肿大，表面不光滑，色泽发暗. 肝组织切片苏丹Ⅲ染色呈阳性，镜下可见肝脏有脂肪变性，有的细胞膜被挤破，间质炎细胞浸润. 血清ALT，r-GT，TC均明显升高，而正常喂养组大鼠的肝脏无论大体所见及病理检查结果以及血清ALT，r-GT，TC，TG均正常，说明大量长期饮酒确实能造成肝脏实质损伤，也说明本试验制备的酒精损伤动物模型与周淑琴et al[3]使用酒精灌注可使43%动物发生肝脏损伤所制成实验动物模型的报道一致. 从本实验中还可看出，对灌饲酒精的大鼠每日给予清开灵1mL皮下注射后其肝脏大体所见，病理组织学检查均正常和单纯酒精灌注而不给清开灵者有明显差别. 另外血清ALT，r-GTP，TC，TG的检测结果也可看出单纯酒精灌注组上述结果均高于正常组，尤其与清开灵注射组ALT，r-GTP与TC比较差异更显著.
, 百拇医药
综上所述，我们认为使用清开灵注射液后可减弱酒精代谢产物乙醛对肝脏的直接毒性作用，增强脂肪酸在肝细胞内正常代谢，减少体内皮下脂肪向肝内转移；另外还可使乙醛氧化代谢产生的活性氧减少，氧自由基减少，从而具有抗炎症，保护肝细胞，调节肝脏脂质代谢，改善肝脏功能作用，故对酒精中毒性肝损伤确有良好的防护与治疗作用. 说明我们用清开灵注射液治疗酒精中毒性肝损伤取得的良好效果，是有理论依据的，值得推广.
4 参考文献
1 杨献英,邵振鸿,金英,刘军,杨磊. 中药清开灵注射液治疗酒精中毒性肝损伤32例. 华人消化杂志，1998；6(10)：920
2 大西久仁房. 酒精与肝病. 日本医学介绍，1997；18(1)：6-7
3 周淑琴，贺从义，高殿生，毕玉堂. 实验性慢性酒精中毒对大鼠肝脏损伤的病理形态学观察. 中华病理学杂志，1986；15(2)：136-138, 百拇医药(杨献英 邵振鸿 杨万里 乔梅 李世杰 杨磊)