大肠癌中Fas FasL HLA-DR表达
河南省人民医院病理科 河南省郑州市 450003
项目负责人 刘政国河南省人民医院病理科 河南省郑州市 450003
收稿日期 1999-01-03 接收日期 1999-02-04
Subject headings genes, Fas; genes, FasL; genes, HLA-DR; colonic neoplasms/pathology
主题词 基因，Fas; 基因，FasL; 基因，HLA-DR; 结肠肿瘤/病理学
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 我院1997/1998大肠癌手术标本存档蜡块40例，复习HE切片，选择癌与癌旁交界处蜡块. 其中高分化腺癌5例，中分化腺癌32例，低分化腺癌3例，取切端粘膜10例作正常对照；同时选取淋巴结转移癌蜡块10例. 以上标本均用中性福尔马林固定、常规脱水、包埋、切片、染色. 患者平均年龄55岁(17岁～80岁)，男21例，女19例. 术前未做过任何化疗和放疗.
1.2 方法 ①免疫组织化学染色为切片厚3μm，采用SP法染色，同时用已知阳性切片做阳性对照；用PBS代替一抗做阴性对照. ②以癌细胞、正常粘膜细胞及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)胞膜或胞质出现棕黄色细颗粒且其染色强度高于背景非特异染色者为该部位阳性. 根据阳性细胞占全部同类细胞的比例将其分为；未发现阳性细胞为(-)；阳性细胞占1%～25%为(+)；阳性细胞占25%～50%为(++)；阳性细胞占51%～75%为(+++)；阳性细胞>75%为(++++).
, 百拇医药
2 结果
2.1 Fas表达 10例正常大肠粘膜中Fas抗原检测均为阳性. 40例大肠癌中，Fas抗原阳性14例，其Fas抗原均匀分布于胞膜及胞质中，与正常粘膜相比，有显著性(P<0.05). 不同分化程度大肠癌其Fas阳性表达情况为高分化腺癌100%(5/5)，中分化腺癌28%(9/32)，两组间差异有显著性(P<0.05). 低分化腺癌3例均未检测到Fas抗原表达. Fas的表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移间差异无意义(P>0.05). 40例中有29例TIL细胞Fas阳性.
2.2 FasL表达 10例正常大肠粘膜无FasL表达. 40例大肠癌中，FasL阳性34例(85%)，其FasL抗原均匀分布在胞膜及胞质中. FasL的表达与细胞的分化程度，肿瘤浸润深度及淋巴结转移间差异均无明显显著性(P>0.05). 此外31例TIL细胞FasL阳性. 10例淋巴结转移癌中的癌细胞FasL均强阳性表达.
, 百拇医药
2.3 HLA-DR表达 10例正常大肠粘膜HLA-DR均表达阳性. 40例大肠癌中，有13例HLA-DR阳性，HLA-DR均分布在胞膜及胞质中. HLA-DR表达在高分化腺癌100%(5/5)，中分化腺癌25%(8/32)，低分化腺癌3例均无表达. HLA-DR 的表达与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移间无明显关系(P>0.05).
3 讨论
本研究中10例正常大肠粘膜Fas均表达阳性，而40例大肠癌中仅14例检测到Fas表达；10例正常大肠粘膜HLA-DR表达均阳性，而40例大肠癌中仅13例有HLA-DR表达，且Fas及HLA-DR均阴性的病例为17例，推测大肠癌细胞通过Fas及HLA-DR抗原的下调表达，逃避机体活化的CTL的杀伤，合并MHCI类分子的下调表达[1]；共刺激分子B7的缺乏[2]；免疫抑制因子如TGF-β[3]的分泌共同完成免疫逃逸. 肿瘤周围浸润淋巴细胞中FasL表达阳性，FasL阳性的肿瘤细胞与FasL阳性的TIL细胞相互作用，主要取决于对Fas介导凋亡的相对敏感性. 推测大肠癌细胞可能通过Fas抗原的下调表达及对FasL介导凋亡的抗性而逃逸机体的免疫监视并对活化的TIL细胞发生免疫反攻击，对肿瘤的最终形成创造了条件.
, 百拇医药
大肠癌细胞通过Fas，HLA-DR的下调表达，部分Fas阳性肿瘤细胞对FasL介导凋亡的抗性，逃避机体的免疫攻击；同时，通过FasL的上调表达，杀伤TIL，进行免疫反攻击. Fas, FasL及HLA-DR在肿瘤的发生、发展及转移过程中具有重要的作用，如何使肿瘤细胞重新表达功能性的Fas抗原、提高HLA-DR的表达及如何阻断肿瘤细胞对TIL的杀伤，将对未来肿瘤治疗策略的设定具有重要的意义.
4 参考文献
1 Restifo NP, Esquivel F, Kawakami Y, Yewdll JW, Mule JJ, Rosenberg SA, Bennink JR. Identification of human cancers deficient
in antigen processing. J Exp Med, 1993;177:265-272
, 百拇医药
2 Chen L, Ashe S, Brady WA, Hellstrom I, Hellstrom KE, Ledbetter JA, McGowan P, Linsley PS. Costimulation of antitumor immunity
by the B7 counterrecepter for the lymphocyte molecules CD28 and CTL-4. Cell, 1992；71：1093-1102
3 Sulitzeanu D. Immunosuppressive factors in human cancer. Adv. Cancer Res,1993;60;247-271, 百拇医药(刘政国 银平章 王宝梅 孔令非 赵跃武)
项目负责人 刘政国河南省人民医院病理科 河南省郑州市 450003
收稿日期 1999-01-03 接收日期 1999-02-04
Subject headings genes, Fas; genes, FasL; genes, HLA-DR; colonic neoplasms/pathology
主题词 基因，Fas; 基因，FasL; 基因，HLA-DR; 结肠肿瘤/病理学
1 材料和方法
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1.1 材料 我院1997/1998大肠癌手术标本存档蜡块40例，复习HE切片，选择癌与癌旁交界处蜡块. 其中高分化腺癌5例，中分化腺癌32例，低分化腺癌3例，取切端粘膜10例作正常对照；同时选取淋巴结转移癌蜡块10例. 以上标本均用中性福尔马林固定、常规脱水、包埋、切片、染色. 患者平均年龄55岁(17岁～80岁)，男21例，女19例. 术前未做过任何化疗和放疗.
1.2 方法 ①免疫组织化学染色为切片厚3μm，采用SP法染色，同时用已知阳性切片做阳性对照；用PBS代替一抗做阴性对照. ②以癌细胞、正常粘膜细胞及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)胞膜或胞质出现棕黄色细颗粒且其染色强度高于背景非特异染色者为该部位阳性. 根据阳性细胞占全部同类细胞的比例将其分为；未发现阳性细胞为(-)；阳性细胞占1%～25%为(+)；阳性细胞占25%～50%为(++)；阳性细胞占51%～75%为(+++)；阳性细胞>75%为(++++).
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2 结果
2.1 Fas表达 10例正常大肠粘膜中Fas抗原检测均为阳性. 40例大肠癌中，Fas抗原阳性14例，其Fas抗原均匀分布于胞膜及胞质中，与正常粘膜相比，有显著性(P<0.05). 不同分化程度大肠癌其Fas阳性表达情况为高分化腺癌100%(5/5)，中分化腺癌28%(9/32)，两组间差异有显著性(P<0.05). 低分化腺癌3例均未检测到Fas抗原表达. Fas的表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移间差异无意义(P>0.05). 40例中有29例TIL细胞Fas阳性.
2.2 FasL表达 10例正常大肠粘膜无FasL表达. 40例大肠癌中，FasL阳性34例(85%)，其FasL抗原均匀分布在胞膜及胞质中. FasL的表达与细胞的分化程度，肿瘤浸润深度及淋巴结转移间差异均无明显显著性(P>0.05). 此外31例TIL细胞FasL阳性. 10例淋巴结转移癌中的癌细胞FasL均强阳性表达.
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2.3 HLA-DR表达 10例正常大肠粘膜HLA-DR均表达阳性. 40例大肠癌中，有13例HLA-DR阳性，HLA-DR均分布在胞膜及胞质中. HLA-DR表达在高分化腺癌100%(5/5)，中分化腺癌25%(8/32)，低分化腺癌3例均无表达. HLA-DR 的表达与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移间无明显关系(P>0.05).
3 讨论
本研究中10例正常大肠粘膜Fas均表达阳性，而40例大肠癌中仅14例检测到Fas表达；10例正常大肠粘膜HLA-DR表达均阳性，而40例大肠癌中仅13例有HLA-DR表达，且Fas及HLA-DR均阴性的病例为17例，推测大肠癌细胞通过Fas及HLA-DR抗原的下调表达，逃避机体活化的CTL的杀伤，合并MHCI类分子的下调表达[1]；共刺激分子B7的缺乏[2]；免疫抑制因子如TGF-β[3]的分泌共同完成免疫逃逸. 肿瘤周围浸润淋巴细胞中FasL表达阳性，FasL阳性的肿瘤细胞与FasL阳性的TIL细胞相互作用，主要取决于对Fas介导凋亡的相对敏感性. 推测大肠癌细胞可能通过Fas抗原的下调表达及对FasL介导凋亡的抗性而逃逸机体的免疫监视并对活化的TIL细胞发生免疫反攻击，对肿瘤的最终形成创造了条件.
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大肠癌细胞通过Fas，HLA-DR的下调表达，部分Fas阳性肿瘤细胞对FasL介导凋亡的抗性，逃避机体的免疫攻击；同时，通过FasL的上调表达，杀伤TIL，进行免疫反攻击. Fas, FasL及HLA-DR在肿瘤的发生、发展及转移过程中具有重要的作用，如何使肿瘤细胞重新表达功能性的Fas抗原、提高HLA-DR的表达及如何阻断肿瘤细胞对TIL的杀伤，将对未来肿瘤治疗策略的设定具有重要的意义.
4 参考文献
1 Restifo NP, Esquivel F, Kawakami Y, Yewdll JW, Mule JJ, Rosenberg SA, Bennink JR. Identification of human cancers deficient
in antigen processing. J Exp Med, 1993;177:265-272
, 百拇医药
2 Chen L, Ashe S, Brady WA, Hellstrom I, Hellstrom KE, Ledbetter JA, McGowan P, Linsley PS. Costimulation of antitumor immunity
by the B7 counterrecepter for the lymphocyte molecules CD28 and CTL-4. Cell, 1992；71：1093-1102
3 Sulitzeanu D. Immunosuppressive factors in human cancer. Adv. Cancer Res,1993;60;247-271, 百拇医药(刘政国 银平章 王宝梅 孔令非 赵跃武)