用基因工程表达的Cag-A和Hsp-58抗原检测人血清幽门螺杆菌抗体
1北京军区总医院消化内科 北京市 100700
2中国预防医学科学院病毒学研究所 北京市 100052
项目负责人 韩英北京军区总医院消化内科 北京市 100700
收稿日期 1998-12-22 接收日期 1999-02-04
Subject headings Helicobacter pylori; antibody, bacterial; HSP-antigen; Cag-A antigen; Helicobacter infections
主题词 螺杆菌，幽门；抗体，细菌；HSP-58抗原；Cag-A抗原；螺杆菌感染
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 消化门诊及住院患者共计121例. 其中33例分别进行CagA和Hsp-58基因Hp抗体的检测(29例与常规尿素酶法进行比较)；88例血清标本用CagA及Hsp-58抗原混合包被药盒进行检测.
1.2 方法 Cag-A和Hsp-58抗原购自MICROGEN生物技术有限公司，酶标抗体为羊抗人IgG(DAKO,p214). 常规尿素酶检测(HPU)试剂盒由协和医药集团提供；基因工程表达的CagA及Hsp-58抗原混合包被试剂盒由北京贝尔生物快检技术有限公咎峁 Cag-A和Hsp-58抗原经SDS-PAGE确定蛋白质纯度达98%以上.
2 结果
, 百拇医药
2.1 Hp特异性抗体 用Cag-A和Hsp-58分别包被ELISA板，检测33例中Cag-A抗体阳性27例，阳性率(82%)，Hsp-58抗体阳性22例(67%)，两种抗体均阳性者20例，均阴性者4例，Hp抗体总检出率为88%. 另有2例Cag-A抗体阴性者Hsp-58抗体阳性.
2.2 Cag-A和Hsp-58抗体与HPU抗体比较 29例血清Cag-A和Hsp-58抗体阳性率分别为79%(23/29)和59%(7/29)，而常规尿素酶检测结果抗体阳性率为52%(15/29). 国产诊断试剂盒与德国MICROGEN公司的诊断试剂盒检测结果显示两者呈平行关系，检出率分别为66%(58/88)和62%(55/88)，符合率为97%.
3 讨论
, http://www.100md.com
Hp具有很强的尿素酶活性，但不同来源的Hp菌株尿素酶基因存在着差异[1]. 目前国内已有多种Hp抗体检测试剂盒上市，其中大多用培养的Hp菌体抽提物作为抗原，检测人血清中的Hp抗体(如抗尿素酶抗体)，其特异性和敏感性均不理想，主要用于检测人群中的Hp感染率，对于Hp感染菌株的分型以及鉴别是否根治抑或相同菌株或不同菌株再感染等有一定意义.
采用基因工程表达的Hp优势抗原表位，经纯化的蛋白作为诊断抗原，建立ELISA检测Hp抗体，一方面克服了使用粗制抗原造成的非特异性，同时也提高了检测的敏感性和特异性，为科研以及流行病学研究和临床诊断提供了有效手段. 我们曾用北京贝尔生物快检技术有限公司试剂盒(将Cag-A和Hsp-58抗原混合包被)对111例患者进行检测，并与常规尿素酶(HPU)进行比较. 结果证实Cag-A和Hsp-58抗原混合包被的试剂Hp检出率明显高于常规尿素酶检测[2].
, 百拇医药
近年来国外采用基因工程表达的Cag-A抗原制备的产细胞毒素Hp抗体酶联免疫检测试剂盒，提高了敏感性和特异性. 然而，本研究结果发现，尽管Ⅰ型和Ⅱ型Hp抗体在Hp 感染时有相当程度的重叠，但是如果单纯采用Cag-A抗原制备的试剂盒进行临床检测，势必导致部分Ⅱ型Hp感染的患者漏诊.
4 参考文献
1 王蔚红，胡伏莲. 幽门螺杆菌的分子生物学. 幽门螺杆菌感染的基础与临床. 见：胡伏莲，周殿元，贾博琦，主编. 第1版. 北京：
中国科学技术出版社，1997：162-170
2 韩英，武子涛， 李世荣， 皮国华. Ⅰ型与Ⅱ型幽门螺杆菌血清学检测. 华人消化杂志，1998；6：501, 百拇医药(韩 英1 武子涛1 李世荣1 皮国华2 张素香2 谷淑燕2)
2中国预防医学科学院病毒学研究所 北京市 100052
项目负责人 韩英北京军区总医院消化内科 北京市 100700
收稿日期 1998-12-22 接收日期 1999-02-04
Subject headings Helicobacter pylori; antibody, bacterial; HSP-antigen; Cag-A antigen; Helicobacter infections
主题词 螺杆菌，幽门；抗体，细菌；HSP-58抗原；Cag-A抗原；螺杆菌感染
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1 材料和方法
1.1 材料 消化门诊及住院患者共计121例. 其中33例分别进行CagA和Hsp-58基因Hp抗体的检测(29例与常规尿素酶法进行比较)；88例血清标本用CagA及Hsp-58抗原混合包被药盒进行检测.
1.2 方法 Cag-A和Hsp-58抗原购自MICROGEN生物技术有限公司，酶标抗体为羊抗人IgG(DAKO,p214). 常规尿素酶检测(HPU)试剂盒由协和医药集团提供；基因工程表达的CagA及Hsp-58抗原混合包被试剂盒由北京贝尔生物快检技术有限公咎峁 Cag-A和Hsp-58抗原经SDS-PAGE确定蛋白质纯度达98%以上.
2 结果
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2.1 Hp特异性抗体 用Cag-A和Hsp-58分别包被ELISA板，检测33例中Cag-A抗体阳性27例，阳性率(82%)，Hsp-58抗体阳性22例(67%)，两种抗体均阳性者20例，均阴性者4例，Hp抗体总检出率为88%. 另有2例Cag-A抗体阴性者Hsp-58抗体阳性.
2.2 Cag-A和Hsp-58抗体与HPU抗体比较 29例血清Cag-A和Hsp-58抗体阳性率分别为79%(23/29)和59%(7/29)，而常规尿素酶检测结果抗体阳性率为52%(15/29). 国产诊断试剂盒与德国MICROGEN公司的诊断试剂盒检测结果显示两者呈平行关系，检出率分别为66%(58/88)和62%(55/88)，符合率为97%.
3 讨论
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Hp具有很强的尿素酶活性，但不同来源的Hp菌株尿素酶基因存在着差异[1]. 目前国内已有多种Hp抗体检测试剂盒上市，其中大多用培养的Hp菌体抽提物作为抗原，检测人血清中的Hp抗体(如抗尿素酶抗体)，其特异性和敏感性均不理想，主要用于检测人群中的Hp感染率，对于Hp感染菌株的分型以及鉴别是否根治抑或相同菌株或不同菌株再感染等有一定意义.
采用基因工程表达的Hp优势抗原表位，经纯化的蛋白作为诊断抗原，建立ELISA检测Hp抗体，一方面克服了使用粗制抗原造成的非特异性，同时也提高了检测的敏感性和特异性，为科研以及流行病学研究和临床诊断提供了有效手段. 我们曾用北京贝尔生物快检技术有限公司试剂盒(将Cag-A和Hsp-58抗原混合包被)对111例患者进行检测，并与常规尿素酶(HPU)进行比较. 结果证实Cag-A和Hsp-58抗原混合包被的试剂Hp检出率明显高于常规尿素酶检测[2].
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近年来国外采用基因工程表达的Cag-A抗原制备的产细胞毒素Hp抗体酶联免疫检测试剂盒，提高了敏感性和特异性. 然而，本研究结果发现，尽管Ⅰ型和Ⅱ型Hp抗体在Hp 感染时有相当程度的重叠，但是如果单纯采用Cag-A抗原制备的试剂盒进行临床检测，势必导致部分Ⅱ型Hp感染的患者漏诊.
4 参考文献
1 王蔚红，胡伏莲. 幽门螺杆菌的分子生物学. 幽门螺杆菌感染的基础与临床. 见：胡伏莲，周殿元，贾博琦，主编. 第1版. 北京：
中国科学技术出版社，1997：162-170
2 韩英，武子涛， 李世荣， 皮国华. Ⅰ型与Ⅱ型幽门螺杆菌血清学检测. 华人消化杂志，1998；6：501, 百拇医药(韩 英1 武子涛1 李世荣1 皮国华2 张素香2 谷淑燕2)