肝炎后肝硬化患者血清sVCAM-1和TNF-α检测的临床意义
山东省济南市中心医院消化内科 250013
项目负责人 王德荣山东省济南市中心医院消化内科 250013
收稿日期 1999-07-03 接收日期 1999-11-14
Subject headings liver cirrhosis/immunology; soluble vascular cell adhesion molecule/blood; tumor necrosis factor/metabolism
主题词 肝硬化/免疫学；可溶性血管粘附分子/血液；肿瘤坏死因子/代谢；酶联免疫吸附试验
, http://www.100md.com
经研究证实，在炎症、自身免疫性疾病和肿瘤患者中，血清可溶性血管细胞粘附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1 sVCAM-1)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α TNF-α)水平明显增高，而且检测其动态变化可能成为监测某些疾病状况和患者免疫功能的指标. 本研究旨在用双抗体夹心ELISA法测定肝炎后肝硬变患者血清sVCAM-1及TNF-α水平，并探讨其在肝硬变发生发展中的作用及临床意义.
1 材料和方法
1.1 材料 32例肝炎后肝硬变患者均为住院患者，男15例，女17例，年龄28岁～74岁，平均52岁±13岁. 诊断符合1995年(北京)全国传染病与寄生虫病学术会议修订的临床诊断标准. 并按肝功能Child-pugh分级法分为A、B、C级三组，其中A级9例，B级11例，C级12例. 20例健康献血员作为对照组，除外感染自身免疫病、恶性肿瘤等疾病.
, 百拇医药
1.2 方法 受检者于清晨空腹肘静脉采血，4h内分离血清并于-20℃储存待测. 所留标本同时检测肝功能及乙肝病毒标志物. 血清sVCAM-1及TNF-α测定采用双抗体夹心ELISA法，sVCAM-1试剂盒为Bender Medsystem公司产品，TNF-α试剂盒由北京晶美生物工程公司提供.
统计学处理 均数以±s表示，组间均数比较用t检验，相关性研究用Spearman等级相关分析法.
2 结果
2.1 肝硬变患者血清sVCAM-1及TNF-α水平 见表1.
表1 肝硬变患者血清sVCAM-1及TNF-α变化
, 百拇医药
肝硬变患者血清sVCAM-1和TNF-α均高于正常对照组(P<0.01).
2.2 见表2.
表2 肝硬变患者各分级间血清sVCAM-1及TNF-α变化
, 百拇医药
肝炎后肝硬变血清sVCAM-1水平随着肝功能分级增加而升高，其中C级患者高于A级患者(P<0.01)；B级患者高于A级患者(P<0.05)；B级和C级之间比较差异无显著性(P>0.05). 肝硬变患者血清TNF-α水平亦随着肝功能C-P分级的程度而逐渐增高，其中B级患者高于A级患者(P<0.01)；C级患者明显高于B级患者(P<0.05).
肝硬变患者血清sVCAM-1与TNF-α 之间呈明显正相关(r=0.39，P<0.05).
3 讨论
血管细胞粘附分子-1(Vascular Cell Adhesion Molecule 1, VCAM-1)属于免疫球蛋白超基因家族成员，又命名为CD106，可表达在内皮细胞、上皮细胞、巨噬细胞和树突状细胞等多种细胞表面. 在正常生理条件下不表达，在某些炎性细胞因子如TNF-α，IL-1，IFN-γ及细菌脂多糖(LPS)诱导下表达，VCAM-1在某些肝脏疾病时表达明显增强. 目前研究认为，VCAM-1不仅可以促进中性粒细胞，还可以促进单核细胞及T淋巴细胞浸入到肝脏实质，Lim et al[1]报道原发性胆汁性肝硬变(PBC)患者血清sVCAM-1较正常人明显增高，而且其增高程度与病变的分期以及白细胞的粘附聚集有关. Marui et al[2]报道在慢性肝炎、肝硬变及肝癌患者中血清sVCAM-1有不同程度的增高，接受干扰素治疗的慢性肝炎患者血清sVCAM-1较治疗前有明显下降，因此认为检测血清sVCAM-1可以作为疗效观察指标. 本资料表明，肝硬变时血清sVCAM-1明显增高，与国外报道一致. 在肝硬变时，血清转氨酶、胆红素及清蛋白是反映肝细胞受损程度的重要指标，本结果显示，肝硬变患者血清sVCAM-1水平与其血清转氨酶及胆红素呈正相关；与血清清蛋白呈负相关. 研究表明，肝硬变患者血清sVCAM-1表达水平明显升高与肝细胞损害程度、细胞免疫密切相关，表明血清sVCAM-1水平检测可以作为病毒性肝病炎症活动和判断预后的监测指标. 本研究显示，肝硬变患者血清sVCAM-1水平和肝功能Child-Pugh分级密切相关，即肝硬变患者血清sVCAM-1表达水平反映肝功能损害程度和疾病状况. 至于sVCAM-1的来源，目前认为可能的途径是膜型VCAM-1的脱落、主动分泌以及细胞坏死等几种方式. 但其排出降解途径目前尚不清楚，可能和肝硬变时肝功能损害导致sVCAM-1降解减少而致使其血清水平增高. 从表面上看，血清sVCAM-1水平升高与肝硬变的疾病状况的加重相一致，似乎它促进了肝功能的损害程度，但其在慢性肝病、肝硬变发病中的确切作用及作用机制尚待进一步阐明.
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TNF-α是一种典型的炎症递质，亦是肝细胞损伤因子之一，在各种慢性肝病中均有不同程度的表达. 研究证实，肝硬变患者的血浆TNF-α水平均明显升高，伴有感染的肝硬变患者中血浆TNF-α水平尤其增高. 本结果显示，肝硬变患者血清TNF-α显著高于正常对照组，而且其血清TNF-α水平与其血清转氨酶、胆红素及清蛋白密切相关. 随着肝硬变分级的增高其血清TNF-α水平亦随之升高. 表明血清TNF-α水平是反映肝硬变炎症活动性和肝功能损害程度的良好的监测指标. 各种慢性肝病、肝硬变患者均发生不同程度的内毒素血症，合并感染时内毒素血症更明显，而内毒素是刺激TNF-α产生的最强物质，单核巨噬 细胞系统和中性粒细胞在介导TNF-α对肝脏的毒性中起重要作用. 本研究中，肝硬变患者血清sVCAM-1与TNF-α间密切相关，也可能和肝硬变时高内毒素血症能同时促进sVCAM-1与TNF-α的表达水平有关.
综上所述，肝炎后肝硬变患者血清sVCAM-1及TNF-α表达水平和肝硬变的病变程度密切相关，两者呈正相关关系，其血清水平的高低反映了肝细胞损害的程度和炎症活动性，临床上动态观察其水平变化，可对病情作出有价值的评估. 另外上述指标可作为肝硬变肝功能分级的重要检测指标，和肝功能分级的传统指标相比，检测血清sVCAM-1及TNF-α水平更能反映患者免疫功能状况及细胞因子的紊乱程度.
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4 参考文献
1 Lim AG, Jazrawi RP, Levy JII. Soluble E-selectin and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) in primary biliary cirrhosis.
J Hepatol, 1995;22:416-422
2 Marui A, Fukuda Y, Koyama Y. Serum levels of soluble intercellular adhesion molecule-1 in liver disease, and their changes
by treatment with interferon. J Int Med Res, 1996;24:258-265, 百拇医药(王德荣 丁 浩 张伯新 浴开)
项目负责人 王德荣山东省济南市中心医院消化内科 250013
收稿日期 1999-07-03 接收日期 1999-11-14
Subject headings liver cirrhosis/immunology; soluble vascular cell adhesion molecule/blood; tumor necrosis factor/metabolism
主题词 肝硬化/免疫学；可溶性血管粘附分子/血液；肿瘤坏死因子/代谢；酶联免疫吸附试验
, http://www.100md.com
经研究证实，在炎症、自身免疫性疾病和肿瘤患者中，血清可溶性血管细胞粘附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1 sVCAM-1)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α TNF-α)水平明显增高，而且检测其动态变化可能成为监测某些疾病状况和患者免疫功能的指标. 本研究旨在用双抗体夹心ELISA法测定肝炎后肝硬变患者血清sVCAM-1及TNF-α水平，并探讨其在肝硬变发生发展中的作用及临床意义.
1 材料和方法
1.1 材料 32例肝炎后肝硬变患者均为住院患者，男15例，女17例，年龄28岁～74岁，平均52岁±13岁. 诊断符合1995年(北京)全国传染病与寄生虫病学术会议修订的临床诊断标准. 并按肝功能Child-pugh分级法分为A、B、C级三组，其中A级9例，B级11例，C级12例. 20例健康献血员作为对照组，除外感染自身免疫病、恶性肿瘤等疾病.
, 百拇医药
1.2 方法 受检者于清晨空腹肘静脉采血，4h内分离血清并于-20℃储存待测. 所留标本同时检测肝功能及乙肝病毒标志物. 血清sVCAM-1及TNF-α测定采用双抗体夹心ELISA法，sVCAM-1试剂盒为Bender Medsystem公司产品，TNF-α试剂盒由北京晶美生物工程公司提供.
统计学处理 均数以±s表示，组间均数比较用t检验，相关性研究用Spearman等级相关分析法.
2 结果
2.1 肝硬变患者血清sVCAM-1及TNF-α水平 见表1.
表1 肝硬变患者血清sVCAM-1及TNF-α变化
| 组别 | n | sVCAM-1 (ng/mL) | TNF-α(ng/L) |
| 正常对照组 | 20 | 818.00±238.50 | 6.14±2.10 |
| 肝硬变组 | 32 | 3237.50±1827.50 | 50.10±30.46 |
, 百拇医药
肝硬变患者血清sVCAM-1和TNF-α均高于正常对照组(P<0.01).
2.2 见表2.
表2 肝硬变患者各分级间血清sVCAM-1及TNF-α变化
| C-P分级 | n | sVCAM-1 (ng/mL) | TNF-α(ng/L) |
| A级 | 9 | 1827.78±863.54 | 20.99±11.42 |
| B级 | 11 | 3000.00±1522.33 | 51.76±20.02 |
| C级 | 12 | 4262.50±1720.10 | 75.28±25.36 |
, 百拇医药
肝炎后肝硬变血清sVCAM-1水平随着肝功能分级增加而升高，其中C级患者高于A级患者(P<0.01)；B级患者高于A级患者(P<0.05)；B级和C级之间比较差异无显著性(P>0.05). 肝硬变患者血清TNF-α水平亦随着肝功能C-P分级的程度而逐渐增高，其中B级患者高于A级患者(P<0.01)；C级患者明显高于B级患者(P<0.05).
肝硬变患者血清sVCAM-1与TNF-α 之间呈明显正相关(r=0.39，P<0.05).
3 讨论
血管细胞粘附分子-1(Vascular Cell Adhesion Molecule 1, VCAM-1)属于免疫球蛋白超基因家族成员，又命名为CD106，可表达在内皮细胞、上皮细胞、巨噬细胞和树突状细胞等多种细胞表面. 在正常生理条件下不表达，在某些炎性细胞因子如TNF-α，IL-1，IFN-γ及细菌脂多糖(LPS)诱导下表达，VCAM-1在某些肝脏疾病时表达明显增强. 目前研究认为，VCAM-1不仅可以促进中性粒细胞，还可以促进单核细胞及T淋巴细胞浸入到肝脏实质，Lim et al[1]报道原发性胆汁性肝硬变(PBC)患者血清sVCAM-1较正常人明显增高，而且其增高程度与病变的分期以及白细胞的粘附聚集有关. Marui et al[2]报道在慢性肝炎、肝硬变及肝癌患者中血清sVCAM-1有不同程度的增高，接受干扰素治疗的慢性肝炎患者血清sVCAM-1较治疗前有明显下降，因此认为检测血清sVCAM-1可以作为疗效观察指标. 本资料表明，肝硬变时血清sVCAM-1明显增高，与国外报道一致. 在肝硬变时，血清转氨酶、胆红素及清蛋白是反映肝细胞受损程度的重要指标，本结果显示，肝硬变患者血清sVCAM-1水平与其血清转氨酶及胆红素呈正相关；与血清清蛋白呈负相关. 研究表明，肝硬变患者血清sVCAM-1表达水平明显升高与肝细胞损害程度、细胞免疫密切相关，表明血清sVCAM-1水平检测可以作为病毒性肝病炎症活动和判断预后的监测指标. 本研究显示，肝硬变患者血清sVCAM-1水平和肝功能Child-Pugh分级密切相关，即肝硬变患者血清sVCAM-1表达水平反映肝功能损害程度和疾病状况. 至于sVCAM-1的来源，目前认为可能的途径是膜型VCAM-1的脱落、主动分泌以及细胞坏死等几种方式. 但其排出降解途径目前尚不清楚，可能和肝硬变时肝功能损害导致sVCAM-1降解减少而致使其血清水平增高. 从表面上看，血清sVCAM-1水平升高与肝硬变的疾病状况的加重相一致，似乎它促进了肝功能的损害程度，但其在慢性肝病、肝硬变发病中的确切作用及作用机制尚待进一步阐明.
, http://www.100md.com
TNF-α是一种典型的炎症递质，亦是肝细胞损伤因子之一，在各种慢性肝病中均有不同程度的表达. 研究证实，肝硬变患者的血浆TNF-α水平均明显升高，伴有感染的肝硬变患者中血浆TNF-α水平尤其增高. 本结果显示，肝硬变患者血清TNF-α显著高于正常对照组，而且其血清TNF-α水平与其血清转氨酶、胆红素及清蛋白密切相关. 随着肝硬变分级的增高其血清TNF-α水平亦随之升高. 表明血清TNF-α水平是反映肝硬变炎症活动性和肝功能损害程度的良好的监测指标. 各种慢性肝病、肝硬变患者均发生不同程度的内毒素血症，合并感染时内毒素血症更明显，而内毒素是刺激TNF-α产生的最强物质，单核巨噬 细胞系统和中性粒细胞在介导TNF-α对肝脏的毒性中起重要作用. 本研究中，肝硬变患者血清sVCAM-1与TNF-α间密切相关，也可能和肝硬变时高内毒素血症能同时促进sVCAM-1与TNF-α的表达水平有关.
综上所述，肝炎后肝硬变患者血清sVCAM-1及TNF-α表达水平和肝硬变的病变程度密切相关，两者呈正相关关系，其血清水平的高低反映了肝细胞损害的程度和炎症活动性，临床上动态观察其水平变化，可对病情作出有价值的评估. 另外上述指标可作为肝硬变肝功能分级的重要检测指标，和肝功能分级的传统指标相比，检测血清sVCAM-1及TNF-α水平更能反映患者免疫功能状况及细胞因子的紊乱程度.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 Lim AG, Jazrawi RP, Levy JII. Soluble E-selectin and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) in primary biliary cirrhosis.
J Hepatol, 1995;22:416-422
2 Marui A, Fukuda Y, Koyama Y. Serum levels of soluble intercellular adhesion molecule-1 in liver disease, and their changes
by treatment with interferon. J Int Med Res, 1996;24:258-265, 百拇医药(王德荣 丁 浩 张伯新 浴开)