慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡的意义
肝炎病毒，乙型;外周血单核细胞;细胞凋亡;血清诊断;免疫耐受;流式细胞术,项目负责人,Subjectheadings,主题词,1材料和方法,1.1材料,1.2方法,2结果,3,讨论,4参考文献
1中国人民解放军第三军医大学西南医院全军传染病专科中心 重庆市 4000382重庆市儿童医院流式细胞仪室
项目负责人 李玲中国人民解放军第三军医大学西南医院全军传染病专科中心 重庆市 400038
收稿日期 2000-06-06 接受日期 2000-06-09
Subject headings hepatitis B virus; peripheral blood mononuclear cells; apoptosis; serodiagnosis; immune tolerance; flow cytometry
主题词 肝炎病毒，乙型；外周血单核细胞；细胞凋亡；血清诊断；免疫耐受；流式细胞术
李玲, 顾长海, 李欣. 慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡的意义. 世界华人消化杂志，2000；8(10)：1186-1187
迄今，对乙型病毒性肝炎慢性化和重性化的机制仍缺乏了解，近年发现免疫细胞经刺激活化后发生凋亡的现象(AICD)可能是形成免疫耐受的一种机制. 我们利用正常人与慢性乙型病毒性肝炎患者外周血PBMC在PHA刺激下短期培养，通过流式细胞仪检测凋亡情况并相互比较，从而探讨AICD在乙型病毒性肝炎慢性化和重型化中的作用.
1 材料和方法
1.1 材料 住院慢性乙型肝炎患者20例均符合1995年第二次全国病毒性肝炎会议诊断标准. 男18例，女2例，年龄岁22～44岁，平均34岁±5岁. 其中慢性肝炎14例，慢性重型肝炎6例. 10例健康人取自我院输血科献血员，男8例，女2例，年龄28岁～45岁，平均36岁±6岁. 无菌抽取肝素抗凝全血6mL～8mL,用淋巴细胞分离液(上海化学试剂二厂产品)，按常规分离PBMC，经台盼蓝染色证实活细胞>95%. 将PBMC调成1×109·L-1浓度，每孔接种1mL于12孔培养板上，加植物血凝素(PHA-P，美国Sigma公司产品)10μg/孔，37℃ 50mL·L-1 CO2培养箱孵育72h. 培养液为含100mL·L-1小牛血清(我科自制)及青霉素和链霉素各100mg·L-1的RPMI1640(美国Gibcobrl公司产品). ......
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