自发性腹膜炎患者血清及腹水一氧化氮检测的意义
中国人民解放军第一军医大学附属珠江医院 1肝胆外科 2检验科 广东省广州市 510282
项目负责人 汪爽中国人民解放军第一军医大学附属珠江医院肝胆外科 广东省广州市 510282
Tel. 0086-20-85143556
Email. wangs@fimmu.edu.cn
收稿日期 2000-07-05 接受日期 2000-07-12
Subject headings peritonitis; ascites; serology; nitric oxide; liver cirrhosis; liver neoplasms
, 百拇医药
主题词 腹膜炎；腹水；血清学；一氧化氮；肝硬化；肝肿瘤
汪爽, 俞金龙, 陈建锋, 周东耀, 蒋泽生, 高毅. 自发性腹膜炎患者血清及腹水一氧化氮检测的意义.
世界华人消化杂志，2000；8(11)：1311-1312
一氧化氮(nitric oxide, NO)是近年来发现的人体中具有多种生理、病理作用的活跃分子[1,2]，其作用引起了众多学者的关注[3-6]. NO能促使肝硬变患者门脉血流动力学紊乱，其增高与腹水的有无呈非常显著相关[7]，且与感染和炎症有密切关系[8,9]. 为进一步探讨NO在自发性腹膜炎中的作用，我们分别测定了自发性腹膜炎、肝硬变及肝癌患者血清、腹水中NO的水平，现报告如下.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 所有病例来自第一军医大学珠江医院消化内科和肝胆外科1998-08/2000-03入院患者. 自发性腹膜炎治疗前23例. 诊断标准：不同程度的腹膜炎表现；腹水常规白细胞>0.2×109·L-1,多形核细胞>50%，李凡它阳性；腹水细菌培养阳性；排除外伤、穿孔所致腹膜炎以及癌性腹水. 治疗后18例. 除5例因病情恶化死亡，其余经抗感染治疗后明显好转. 肝硬变失代偿组20例. 其中乙型肝炎后肝硬变18例，丙型肝炎后肝硬变2例，均排除感染和肿瘤. 肝癌合并腹水组22例. 诊断符合1995年全国肝癌协作会议拟定标准. 正常对照组45例. 为体检健康志愿者.
1.2 方法 空腹采血2mL，待有血清游离出来后分离血清，置-20℃保存待测；抽出腹水2mL，立即离心5min (1500r·min-1),取上清液置-20℃保存待测. NO测定用硝酸盐还原酶法检测，试剂盒购自深圳晶美生物试剂公司，操作按说明书进行.
, 百拇医药
统计学处理 测试数据用X±s表示，各组间均数差异性比较用方差分析，P<0.05为显著性界限.
2 结果
各组血清及腹水中NO水平均明显高于正常对照组(P<0.05)，自发性腹膜炎组血清中NO水平与肝硬变腹水组及肝癌腹水组无显著差异性(P>0.05)，而腹水中NO水平明显高于其他二组(P<0.05，表1). 自发性腹膜炎治疗前后血清NO水平无显著变化(P>0.05)，而治疗后腹水NO水平明显低于治疗前(61.5μmol·L-1±17.5μmol·L-1 vs 83.6μmol·L-1±20.7μmol·L-1，P<0.05).
表1 各组血清、腹水一氧化氮水平(x±s，μmol·L-1)
, 百拇医药
aP<0.05, vs 正常对照组; bP<0.05 vs 自发性腹膜炎组.
3 讨论
自发性腹膜炎常发生于失代偿期肝硬变患者，其原因可能与肠道细菌分布异常、门脉高压、门体循环短路造成的菌血症及机体抵抗力、免疫功能低下有关，且革兰阴性杆菌感染和内毒素血症十分常见，病情凶险，死亡率较高. 其诊断除临床表现、腹水常规、腹水细菌培养外，目前尚无其他更为敏感的检测指标. NO是一种广泛存在于生物体内的小分子生理递质，由L-精氨酸(L-Arg)经一氧化氮合成酶(NOS)催化生成，对维持机体的代谢平衡起重要作用. NO不但具有细胞毒作用，还具有病理性血管扩张和组织损伤的生物活性[10]. NO可通过多种不同机制在肝脏感染与炎症、肝硬变门脉高压症、梗阻性黄疸、肝损伤及肝癌和肝移植等肝脏疾病过程中发挥广泛的病理生理作用并影响其发生、发展及转归. 革兰阴性杆菌菌体成分和多种致炎因子可诱导肝脏合成NO. 这种肝源性NO对机体具有双重作用[11]. 一方面可通过抑制线粒体酶、核酸酶和介导OH的产生等机制杀灭病原微生物；另一方面NO可通过抑制蛋白质合成以及介导OH产生从而对机体造成损害. 若发生革兰阴性杆菌败血症时，肝源性NO合成增加，使蛋白质合成受到明显抑制. 在多种炎症中，NO是升高的，而NO的产生过度可能是造成多器官功能衰竭的重要递质. 内毒素所致肝损伤与NO关系密切，肝硬变患者因门体分流，导致肠源性内毒素未经肝脏处理，直接进入体循环，高水平内毒素可通过刺激巨噬细胞、库氏细胞释放细胞因子，细胞因子诱导NOS合成大量的NO. 在不同程度的肝功能损害中，随着病情的进行，肝功能损害的加重，肝硬变患者的NO水平进行性增高，失代偿期患者高于代偿期患者[12]. NO水平与腹水的有无显著相关，腹水中NO水平增加与腹水中炎症细胞存在有密切关系[13]. 失代偿期肝硬变易合并自发性腹膜炎，腹水感染时，由于细菌及内毒素作用，使腹水中炎症细胞浸润，巨噬细胞增多，导致肝硬变患者因多形核细胞而使NO合成增高.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 徐东红, 李定国, 陆汉明. 一氧化氮和肝硬变. 新消化病学杂志, 1997;5(特刊6):69-70
2 彭曦, 汪仕良. 一氧化氮与胃肠运动. 华人消化杂志, 1998;6:445-446
3 Yun J, Guo F, Ebert MPA, Malfertheiner P. Expression of inducible nitric oxide synthase in human gastric cancer.
World J Gastroenterol, 1999;5:430-431
4 Zhao WM, Ma XH, Li ZJ, Yang CF. The effect of nitric oxide on gastric carcinoma metastasis.
, http://www.100md.com
World J Gastroenterol, 1998;4(Suppl 2):78-79
5 彭曦, 冯晋斌, 汪仕良. 大鼠消化道肌间神经丛中一氧化氮合酶的分布. 华人消化杂志, 1998;6:250-252
6 黄颖秋, 张德中, 莫剑忠, 李蓉蓉, 萧树东. 肝硬变大鼠食管一氧化氮含量与血流动力学改变. 新消化病学杂志, 1997;5:558-559
7 李蕴铷, 孙静媛, 王笑梅, 张首省, 杨胜彩. 一氧化氮和内皮素在肝硬变合并肝肾综合征患者中的变化及意义.
世界华人消化杂志，2000；8：484-485
8 Rockey D. The cellular pathogenesis of portal hypertension: stellate cell contractility, endothelin, and nitric oxide.
, 百拇医药
Hepatology, 1997;25:2-5
9 Campillo B, Bories PN, Benvenuti C, Dupeyron C. Serum and urinary nitrate levels in liver cirrhosis: endotoxemia, renal function
and hyperdynamic circulation. J Hepatol, 1996;25:707-714
10 曾运红，袁汉尧. 血清一氧化氮检测在肾病诊断中的意义. 广东医学，2000;21:227-228
11 杨路亭，邹玉安，刘昭. 一氧化氮对肝脏的病理生理作用. 临床肝胆病杂志，1998;14:208-211
, http://www.100md.com 12 Hori N, Okanoue T, Mori T, Kashima K, Nishimura M, Nanbu A, Yoshimura M, Takahashi H. Endogenous nitric oxide production
is augmented as the severity advances in patients with liver cirrhosis. Clin Exp Pharmacol Physiol, 1996;23:30-35
13 Laffi G, Foschi M, Masini E, Simoni A, Mugnai L, La-Villa G, Barletta G, Mannaioni PF, Gentilini P. Increased production of nitric oxide
by neutrophils and monocytes from cirrhotic patients with ascites and hyperdynamic circulation. Hepatology,1995;22:1666-1673, 百拇医药(汪 爽1 俞金龙1 陈建锋1 周东耀2 蒋泽生1 高 毅1 )
项目负责人 汪爽中国人民解放军第一军医大学附属珠江医院肝胆外科 广东省广州市 510282
Tel. 0086-20-85143556
Email. wangs@fimmu.edu.cn
收稿日期 2000-07-05 接受日期 2000-07-12
Subject headings peritonitis; ascites; serology; nitric oxide; liver cirrhosis; liver neoplasms
, 百拇医药
主题词 腹膜炎；腹水；血清学；一氧化氮；肝硬化；肝肿瘤
汪爽, 俞金龙, 陈建锋, 周东耀, 蒋泽生, 高毅. 自发性腹膜炎患者血清及腹水一氧化氮检测的意义.
世界华人消化杂志，2000；8(11)：1311-1312
一氧化氮(nitric oxide, NO)是近年来发现的人体中具有多种生理、病理作用的活跃分子[1,2]，其作用引起了众多学者的关注[3-6]. NO能促使肝硬变患者门脉血流动力学紊乱，其增高与腹水的有无呈非常显著相关[7]，且与感染和炎症有密切关系[8,9]. 为进一步探讨NO在自发性腹膜炎中的作用，我们分别测定了自发性腹膜炎、肝硬变及肝癌患者血清、腹水中NO的水平，现报告如下.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 所有病例来自第一军医大学珠江医院消化内科和肝胆外科1998-08/2000-03入院患者. 自发性腹膜炎治疗前23例. 诊断标准：不同程度的腹膜炎表现；腹水常规白细胞>0.2×109·L-1,多形核细胞>50%，李凡它阳性；腹水细菌培养阳性；排除外伤、穿孔所致腹膜炎以及癌性腹水. 治疗后18例. 除5例因病情恶化死亡，其余经抗感染治疗后明显好转. 肝硬变失代偿组20例. 其中乙型肝炎后肝硬变18例，丙型肝炎后肝硬变2例，均排除感染和肿瘤. 肝癌合并腹水组22例. 诊断符合1995年全国肝癌协作会议拟定标准. 正常对照组45例. 为体检健康志愿者.
1.2 方法 空腹采血2mL，待有血清游离出来后分离血清，置-20℃保存待测；抽出腹水2mL，立即离心5min (1500r·min-1),取上清液置-20℃保存待测. NO测定用硝酸盐还原酶法检测，试剂盒购自深圳晶美生物试剂公司，操作按说明书进行.
, 百拇医药
统计学处理 测试数据用X±s表示，各组间均数差异性比较用方差分析，P<0.05为显著性界限.
2 结果
各组血清及腹水中NO水平均明显高于正常对照组(P<0.05)，自发性腹膜炎组血清中NO水平与肝硬变腹水组及肝癌腹水组无显著差异性(P>0.05)，而腹水中NO水平明显高于其他二组(P<0.05，表1). 自发性腹膜炎治疗前后血清NO水平无显著变化(P>0.05)，而治疗后腹水NO水平明显低于治疗前(61.5μmol·L-1±17.5μmol·L-1 vs 83.6μmol·L-1±20.7μmol·L-1，P<0.05).
表1 各组血清、腹水一氧化氮水平(x±s，μmol·L-1)
| 组别 | n | 血清 | 腹水 |
| 自发性腹膜炎组 | 23 | 76.8±26.3a | 83.2±18.9 |
| 肝硬变腹水组 | 20 | 73.2±21.2a | 62.5±15.3b |
| 肝癌腹水组 | 22 | 72.0±18.6a | 60.4±12.5b |
| 正常对照组 | 45 | 45.2±14.2 |
, 百拇医药
aP<0.05, vs 正常对照组; bP<0.05 vs 自发性腹膜炎组.
3 讨论
自发性腹膜炎常发生于失代偿期肝硬变患者，其原因可能与肠道细菌分布异常、门脉高压、门体循环短路造成的菌血症及机体抵抗力、免疫功能低下有关，且革兰阴性杆菌感染和内毒素血症十分常见，病情凶险，死亡率较高. 其诊断除临床表现、腹水常规、腹水细菌培养外，目前尚无其他更为敏感的检测指标. NO是一种广泛存在于生物体内的小分子生理递质，由L-精氨酸(L-Arg)经一氧化氮合成酶(NOS)催化生成，对维持机体的代谢平衡起重要作用. NO不但具有细胞毒作用，还具有病理性血管扩张和组织损伤的生物活性[10]. NO可通过多种不同机制在肝脏感染与炎症、肝硬变门脉高压症、梗阻性黄疸、肝损伤及肝癌和肝移植等肝脏疾病过程中发挥广泛的病理生理作用并影响其发生、发展及转归. 革兰阴性杆菌菌体成分和多种致炎因子可诱导肝脏合成NO. 这种肝源性NO对机体具有双重作用[11]. 一方面可通过抑制线粒体酶、核酸酶和介导OH的产生等机制杀灭病原微生物；另一方面NO可通过抑制蛋白质合成以及介导OH产生从而对机体造成损害. 若发生革兰阴性杆菌败血症时，肝源性NO合成增加，使蛋白质合成受到明显抑制. 在多种炎症中，NO是升高的，而NO的产生过度可能是造成多器官功能衰竭的重要递质. 内毒素所致肝损伤与NO关系密切，肝硬变患者因门体分流，导致肠源性内毒素未经肝脏处理，直接进入体循环，高水平内毒素可通过刺激巨噬细胞、库氏细胞释放细胞因子，细胞因子诱导NOS合成大量的NO. 在不同程度的肝功能损害中，随着病情的进行，肝功能损害的加重，肝硬变患者的NO水平进行性增高，失代偿期患者高于代偿期患者[12]. NO水平与腹水的有无显著相关，腹水中NO水平增加与腹水中炎症细胞存在有密切关系[13]. 失代偿期肝硬变易合并自发性腹膜炎，腹水感染时，由于细菌及内毒素作用，使腹水中炎症细胞浸润，巨噬细胞增多，导致肝硬变患者因多形核细胞而使NO合成增高.
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4 参考文献
1 徐东红, 李定国, 陆汉明. 一氧化氮和肝硬变. 新消化病学杂志, 1997;5(特刊6):69-70
2 彭曦, 汪仕良. 一氧化氮与胃肠运动. 华人消化杂志, 1998;6:445-446
3 Yun J, Guo F, Ebert MPA, Malfertheiner P. Expression of inducible nitric oxide synthase in human gastric cancer.
World J Gastroenterol, 1999;5:430-431
4 Zhao WM, Ma XH, Li ZJ, Yang CF. The effect of nitric oxide on gastric carcinoma metastasis.
, http://www.100md.com
World J Gastroenterol, 1998;4(Suppl 2):78-79
5 彭曦, 冯晋斌, 汪仕良. 大鼠消化道肌间神经丛中一氧化氮合酶的分布. 华人消化杂志, 1998;6:250-252
6 黄颖秋, 张德中, 莫剑忠, 李蓉蓉, 萧树东. 肝硬变大鼠食管一氧化氮含量与血流动力学改变. 新消化病学杂志, 1997;5:558-559
7 李蕴铷, 孙静媛, 王笑梅, 张首省, 杨胜彩. 一氧化氮和内皮素在肝硬变合并肝肾综合征患者中的变化及意义.
世界华人消化杂志，2000；8：484-485
8 Rockey D. The cellular pathogenesis of portal hypertension: stellate cell contractility, endothelin, and nitric oxide.
, 百拇医药
Hepatology, 1997;25:2-5
9 Campillo B, Bories PN, Benvenuti C, Dupeyron C. Serum and urinary nitrate levels in liver cirrhosis: endotoxemia, renal function
and hyperdynamic circulation. J Hepatol, 1996;25:707-714
10 曾运红，袁汉尧. 血清一氧化氮检测在肾病诊断中的意义. 广东医学，2000;21:227-228
11 杨路亭，邹玉安，刘昭. 一氧化氮对肝脏的病理生理作用. 临床肝胆病杂志，1998;14:208-211
, http://www.100md.com 12 Hori N, Okanoue T, Mori T, Kashima K, Nishimura M, Nanbu A, Yoshimura M, Takahashi H. Endogenous nitric oxide production
is augmented as the severity advances in patients with liver cirrhosis. Clin Exp Pharmacol Physiol, 1996;23:30-35
13 Laffi G, Foschi M, Masini E, Simoni A, Mugnai L, La-Villa G, Barletta G, Mannaioni PF, Gentilini P. Increased production of nitric oxide
by neutrophils and monocytes from cirrhotic patients with ascites and hyperdynamic circulation. Hepatology,1995;22:1666-1673, 百拇医药(汪 爽1 俞金龙1 陈建锋1 周东耀2 蒋泽生1 高 毅1 )