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编号:10697151
大肠癌及癌旁组织中P73基因的表达
http://www.100md.com 2001年2月15日 《世界华人消化杂志》 2001年第2期
结肠肿瘤;癌基因;P73基因;基因表达;基因,抑制,肿瘤;基因扩增;聚合酶链反应,本课题为山西省,98年科委基金资助项目,No.982156,项目负责人,主题词,1材料和方法,1.1材料,1.2方法,2结果,表,1结肠癌组织P73基因mRNA表达情况,3讨论
     1中国人民解放军264医院内镜中心 山西省太原市 030001

    2中国人民解放军第四军医大学全军基因诊断技术应用研究所 陕西省西安市 710033

    本课题为山西省98年科委基金资助项目, No.982156

    项目负责人
刘变英 中国人民解放军264医院内镜中心 山西省太原市 030001

    Tel. 0086-351-4926111 Ext.88131

    收稿日期 2000-07-17 接受日期 2000-07-21

    主题词 结肠肿瘤;癌基因;P73基因;基因表达;基因,抑制,肿瘤;基因扩增;聚合酶链反应

    刘变英, 崔大祥, 潘胜武, 闫小君, 雷宇锋, 栗彤. 大肠癌及癌旁组织中P73基因的表达. 世界华人消化杂志,2001;9(2):229-230

    大肠癌是常见的消化道肿瘤,是多因素、多阶段、多基因共同作用的结果. 目前已证实关系密切的有K-ras,C-myc,P53,APC,DCC等. P73是新近发现的基因,与大肠癌关系尚不明确[1-9],我们通过检测大肠癌及癌旁组织中的P73表达,以期探讨P73基因在大肠癌发生发展中的作用.

    1 材料和方法

    1.1 材料
大肠癌组织40例及相应远离癌灶5cm的非癌组织由264医院消化内镜中心提供,标本取得后立即用液氮冷却或放至-20℃冰箱保存. 腺癌36例,其中低分化17例,中高分化19例;Ⅰ,Ⅱ期14例,Ⅲ,Ⅳ期22例. 息肉癌变4例,其中Ⅰ,Ⅱ期2例,Ⅲ,Ⅳ期2例. 酚、氯仿、无水乙醇、蛋白酶K、异丙醇等化学试剂购自原平试剂公司;mRNA提取采用Promega公司PolyATtract System1000试剂盒,反转录采用SMARTTM PCR cDNA Synthesis Kit(Clontech公司),PCR产物纯化试剂盒采用Promega公司Wizard Plus Minipreps DNA Purification System;α-32P-dATP购自北京福瑞公司;PCR采用Clontech公司Advantage 2 PCR试剂盒;PCR扩增仪采用PE-5700型定量PCR仪. PCR引物采用第2外显子序列设计并合成. 从基因组DNA中扩增P73基因第2外显子引物为:P1:5'-CAGGCCCACTTGCCTGCC-3', P2:5'-AGAGGTGCTCAAACGTGG-3', 扩增片段为229bp; RT-PCR扩增第二外显子5'端非编码区引物为:P3:5'-GGCTGCGACGGCTGCAGA-3', P4:5'-CGCGGCTGCTCATCTGGT-3'; 内参照β-actrn引物为:5'-CACTGTGTTGGCGTACA GGT-3', 5'-TCATCACCATTGCAATGAG-3', 扩增片段为:154bp. ......

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