肠化生、胃癌组织中幽门螺杆菌感染与ras基因表达
上海市浦东新区人民医院 上海市 201200
项目负责人 陆和平 上海市浦东新区人民医院 上海市 201200
Tel. 0086-21-58981990 Ext.2135
收稿日期 2000-10-10 接受日期 2000-10-12
主题词 螺杆菌，幽门；胃肿瘤；癌前状态；基因表达；基因，ras；免疫组织化学；基因，抑制，肿瘤
陆和平, 郑银宝. 肠化生、胃癌组织中幽门螺杆菌感染与ras基因表达. 世界华人消化杂志，2001；9(2)：218-219
幽门螺杆菌(Hp)感染引起慢性活动性胃炎、萎缩性胃炎、肠腺化生、不典型增生，最终导致肠型胃癌的链状改变虽被公认，但并非Hp高感染率的地区胃癌的发生率一定升高. 胃癌的发生、发展是癌基因的突变与抑癌基因失活逐渐演变的复杂过程，而癌基因突变与抑癌基因失活并非Hp单一因素，而是多因素参与的结果. 通过病理染色、快速尿素酶试验检测Hp感染，免疫组织化学染色检测P21蛋白，了解在肠化生、胃癌组织中Hp感染与ras基因表达之间的关系.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 经病理证实肠腺化生61例，胃癌26例. 对照组经病理证实浅表性胃炎24例. 每个患者在行内镜检查时在胃窦部四壁各活检1块，迅速放入40g·L-1甲醛固定，常规脱水、石蜡包埋连续切片，HE染色后作病理学诊断和免疫组织化学染色.
1.2 方法 Hp感染患者用吉氏染色法. 使用上海试剂三厂生产的5g·L-1吉氏染色水溶液，石蜡切片3μm～5μm，脱蜡水洗后染色，由高倍镜观察，寻找菌体，呈蓝色； 快速尿素酶试验. 活检胃粘膜组织1块放入由海口南科科技公司生产的诊断试纸，由黄色变成樱红色为阳性；免疫组织化学染色法. 使用上海中达试剂公司生产的即用型试剂，常规石蜡切片3μm～4μm，应用DAKO Envision Systen免疫组织化学染色法，以核内见棕黄色细颗粒为阳性.
, 百拇医药
统计学处理 G检验.
2 结果
P21蛋白在胃癌组织中阳性表达率显著高于浅表性胃炎(P<0.05). 肠化生组织中的阳性表达率也显著高于浅表性胃炎(P<0.05，表1). 肠化生组与胃癌P21蛋白表达比较无显著性(P>0.05). Hp阳性的肠化生及胃癌组织中P21蛋白的表达，肠化生组内的Hp阳性与阴性P21蛋白的表达无显著性(P>0.05，表2). 胃癌组内的Hp阳性与阴性P21蛋白的表达也无显著性(P>0.05). 肠化生、胃癌与浅表性胃炎Hp阳性率比较均无显著性(P>0.05).
表1 肠化生及胃癌组织中P21蛋白的表达(n，%)
, http://www.100md.com
表2 Hp阳性组织中P21蛋白的表达(n，%)
3 讨论
ras基因族包括3个癌基因H-ras，K-ras，N-ras. 它的表达产物为188个氨基酸组成的12Kn蛋白质，为P21蛋白. 它通过点突变致癌. 研究发现在细胞尚未有形态学改变前就可以有ras基因的过度表达，当胃粘膜发生肠化生与不典型增生时P21蛋白有过度表达. 在胃癌表达率为50%～60%，在肠化生、异型增生与胃癌组织中比较无显著性[1]. 说明ras基因的激活和表达在胃粘膜恶变中可能起作用，并且主要发生于癌前病变与胃癌早期[2-4]. 为肠化生和异型增生作为胃癌癌前病变提供有力证据. 本研究结果显示P21蛋白在肠化生组织中表达率显著高于浅表性胃炎(P<0.05). 在胃癌组织中P21蛋白阳性的表达率也显著高于浅表性胃炎(P<0.05). 肠化生组与胃癌组P21蛋白的表达无显著性(P>0.05). 结果表明ras基因的激活确实在胃癌的启动、发生、发展过程中起作用，同时也表明肠化生为癌前病变是无疑的，尤其是大肠腺化生，应加强随访观察.
, 百拇医药
肠型胃癌发生前的链状改变包括Hp感染、慢性胃炎、胃粘膜萎缩、肠化生、不典型增生和产生胃癌的过程已被公认[5,6],也有认为与弥漫性胃癌也有关[7]. 但最近有报道显示Hp阳性和阴性的早期胃癌患者在分子生物学方面的改变并无异常[8]. 本研究显示肠化生组内Hp阳性与阴性P21蛋白的表达无显著性(P>0.05). 胃癌组内Hp阳性与阴性P21蛋白的表达也无显著性(P>0.05). 肠化组、胃癌组与浅表性胃炎Hp阳性率比较均无统计学意义(P>0.05). 这些结果均提示Hp感染与P21蛋白表达无相关性，为非ras癌基因激活的唯一途径. 也可能通过非Hp依赖途径实现. 诸如氧自由基的作用、N-亚硝基化合物的形成、抗坏血酸降低等. 所以在治疗慢性胃炎、溃疡病时除考虑根除Hp外，也要考虑改变生活方式.
, 百拇医药 4 参考文献
1 任小龙，施依霖. 诊断免疫组织化学. 北京：军事医学科学出版社，1996:34-35
2 胡玲, 劳绍贤. 胃癌癌前期病变的研究. 新消化病学杂志, 1997;5:390
3 Lu Y, Li Z, Sun M. Multiple gene alterations involved in processor of human gastric carcinogenesis.
Zhonghua Yixue Zazhi, 1995;75:679-682
4 于君，张锦坤. 胃癌变过程ras基因活化和DNA含量的综合研究. 中华内科杂志, 1998；6：829-830
, http://www.100md.com
5 王吉耀. 幽门螺杆菌感染与胃癌关系的研究近况. 华人消化杂志, 1998;6:829-830
6 Liu WZ, Zheng X, Shi Y, Dong QJ, Xiao SD. Effect of Helicobacter pylori infection on gastric epithelial proliferation in
progression from normal mucosa to gastriccarcinoma. World J Gastroenterol, 1998;4:246-248
7 张万岱, 萧树东, 胡伏莲, 胡品津, 徐智民. 幽门螺杆菌若干问题的共识意见. 世界华人消化杂志， 2000;8:219-220
8 吴云林，陈善康. 幽门螺杆菌致癌变机理研究进展. 胃肠病学和肝病学杂志，2000；9(增刊)：22-24, http://www.100md.com(陆和平 郑银宝)
项目负责人 陆和平 上海市浦东新区人民医院 上海市 201200
Tel. 0086-21-58981990 Ext.2135
收稿日期 2000-10-10 接受日期 2000-10-12
主题词 螺杆菌，幽门；胃肿瘤；癌前状态；基因表达；基因，ras；免疫组织化学；基因，抑制，肿瘤
陆和平, 郑银宝. 肠化生、胃癌组织中幽门螺杆菌感染与ras基因表达. 世界华人消化杂志，2001；9(2)：218-219
幽门螺杆菌(Hp)感染引起慢性活动性胃炎、萎缩性胃炎、肠腺化生、不典型增生，最终导致肠型胃癌的链状改变虽被公认，但并非Hp高感染率的地区胃癌的发生率一定升高. 胃癌的发生、发展是癌基因的突变与抑癌基因失活逐渐演变的复杂过程，而癌基因突变与抑癌基因失活并非Hp单一因素，而是多因素参与的结果. 通过病理染色、快速尿素酶试验检测Hp感染，免疫组织化学染色检测P21蛋白，了解在肠化生、胃癌组织中Hp感染与ras基因表达之间的关系.
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1 材料和方法
1.1 材料 经病理证实肠腺化生61例，胃癌26例. 对照组经病理证实浅表性胃炎24例. 每个患者在行内镜检查时在胃窦部四壁各活检1块，迅速放入40g·L-1甲醛固定，常规脱水、石蜡包埋连续切片，HE染色后作病理学诊断和免疫组织化学染色.
1.2 方法 Hp感染患者用吉氏染色法. 使用上海试剂三厂生产的5g·L-1吉氏染色水溶液，石蜡切片3μm～5μm，脱蜡水洗后染色，由高倍镜观察，寻找菌体，呈蓝色； 快速尿素酶试验. 活检胃粘膜组织1块放入由海口南科科技公司生产的诊断试纸，由黄色变成樱红色为阳性；免疫组织化学染色法. 使用上海中达试剂公司生产的即用型试剂，常规石蜡切片3μm～4μm，应用DAKO Envision Systen免疫组织化学染色法，以核内见棕黄色细颗粒为阳性.
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统计学处理 G检验.
2 结果
P21蛋白在胃癌组织中阳性表达率显著高于浅表性胃炎(P<0.05). 肠化生组织中的阳性表达率也显著高于浅表性胃炎(P<0.05，表1). 肠化生组与胃癌P21蛋白表达比较无显著性(P>0.05). Hp阳性的肠化生及胃癌组织中P21蛋白的表达，肠化生组内的Hp阳性与阴性P21蛋白的表达无显著性(P>0.05，表2). 胃癌组内的Hp阳性与阴性P21蛋白的表达也无显著性(P>0.05). 肠化生、胃癌与浅表性胃炎Hp阳性率比较均无显著性(P>0.05).
表1 肠化生及胃癌组织中P21蛋白的表达(n，%)
| 病变 | n | P21 |
| 肠化生 | 61 | 42(68.8) |
| 胃癌 | 26 | 18(69.2) |
| 浅表性胃炎 | 24 | 8(33.3) |
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表2 Hp阳性组织中P21蛋白的表达(n，%)
| 病变 | n | P21 |
| 肠化生 Hp阳性 | 40 | 26(65.0) |
| Hp阴性 | 21 | 16(76.2) |
| 胃癌 Hp阳性 | 14 | 11(78.6) |
| Hp阴性 | 12 | 7(58.6) |
3 讨论
ras基因族包括3个癌基因H-ras，K-ras，N-ras. 它的表达产物为188个氨基酸组成的12Kn蛋白质，为P21蛋白. 它通过点突变致癌. 研究发现在细胞尚未有形态学改变前就可以有ras基因的过度表达，当胃粘膜发生肠化生与不典型增生时P21蛋白有过度表达. 在胃癌表达率为50%～60%，在肠化生、异型增生与胃癌组织中比较无显著性[1]. 说明ras基因的激活和表达在胃粘膜恶变中可能起作用，并且主要发生于癌前病变与胃癌早期[2-4]. 为肠化生和异型增生作为胃癌癌前病变提供有力证据. 本研究结果显示P21蛋白在肠化生组织中表达率显著高于浅表性胃炎(P<0.05). 在胃癌组织中P21蛋白阳性的表达率也显著高于浅表性胃炎(P<0.05). 肠化生组与胃癌组P21蛋白的表达无显著性(P>0.05). 结果表明ras基因的激活确实在胃癌的启动、发生、发展过程中起作用，同时也表明肠化生为癌前病变是无疑的，尤其是大肠腺化生，应加强随访观察.
, 百拇医药
肠型胃癌发生前的链状改变包括Hp感染、慢性胃炎、胃粘膜萎缩、肠化生、不典型增生和产生胃癌的过程已被公认[5,6],也有认为与弥漫性胃癌也有关[7]. 但最近有报道显示Hp阳性和阴性的早期胃癌患者在分子生物学方面的改变并无异常[8]. 本研究显示肠化生组内Hp阳性与阴性P21蛋白的表达无显著性(P>0.05). 胃癌组内Hp阳性与阴性P21蛋白的表达也无显著性(P>0.05). 肠化组、胃癌组与浅表性胃炎Hp阳性率比较均无统计学意义(P>0.05). 这些结果均提示Hp感染与P21蛋白表达无相关性，为非ras癌基因激活的唯一途径. 也可能通过非Hp依赖途径实现. 诸如氧自由基的作用、N-亚硝基化合物的形成、抗坏血酸降低等. 所以在治疗慢性胃炎、溃疡病时除考虑根除Hp外，也要考虑改变生活方式.
, 百拇医药 4 参考文献
1 任小龙，施依霖. 诊断免疫组织化学. 北京：军事医学科学出版社，1996:34-35
2 胡玲, 劳绍贤. 胃癌癌前期病变的研究. 新消化病学杂志, 1997;5:390
3 Lu Y, Li Z, Sun M. Multiple gene alterations involved in processor of human gastric carcinogenesis.
Zhonghua Yixue Zazhi, 1995;75:679-682
4 于君，张锦坤. 胃癌变过程ras基因活化和DNA含量的综合研究. 中华内科杂志, 1998；6：829-830
, http://www.100md.com
5 王吉耀. 幽门螺杆菌感染与胃癌关系的研究近况. 华人消化杂志, 1998;6:829-830
6 Liu WZ, Zheng X, Shi Y, Dong QJ, Xiao SD. Effect of Helicobacter pylori infection on gastric epithelial proliferation in
progression from normal mucosa to gastriccarcinoma. World J Gastroenterol, 1998;4:246-248
7 张万岱, 萧树东, 胡伏莲, 胡品津, 徐智民. 幽门螺杆菌若干问题的共识意见. 世界华人消化杂志， 2000;8:219-220
8 吴云林，陈善康. 幽门螺杆菌致癌变机理研究进展. 胃肠病学和肝病学杂志，2000；9(增刊)：22-24, http://www.100md.com(陆和平 郑银宝)