难治性黄疸动物模型研究
1汕头市龙湖医院 广东省汕头市 515041汕头大学医学院 2第一附属医院外科 3医学院外科教研室 广东省汕头市 515041
项目负责人 许建衡汕头市龙湖医院 广东省汕头市 515041
Tel. 0086-754-8258290
Email. xujh@pub.shantou.gd.cn
收稿日期 2000-06-18 接受日期 2000-07-01
主题词 黄疸；模型，动物；实验；狗；胆管；甲醛
林薇, 许建衡, 刘婉秀, 陈葵. 难治性黄疸动物模型研究. 世界华人消化杂志，2001；9(3)：335
, 百拇医药
难治性黄疸是一种临床处理十分困难的病症，大多病因十分复杂，疗效欠佳[1]. 本研究目的就是建立一种难治性黄疸动物病理模型以供实验研究之用.
1 材料和方法
1.1 材料 健康成年狗20只，雌雄不限. 平均体重18.10kg. 随机分模型组16只，对照组4只.
1.2 方法 20g·L-1戊巴比妥钠iv麻醉(30mg·kg-1). 上腹正中切口，显露胆总管及肝门部. 用5号针头注射器在整个肝外胆管壁内均匀细致地浸润注射10g·L-1甲醛溶液. 注射量多少以看见管壁颜色变白为宜. 胆囊内置一蘑菇头导管引出腹壁固定. 常规关腹. 对照组手术中胆管壁浸润注射生理盐水. 术后第2，3，4wk末，模型组每周处死2～3只，对照组1只狗. 取胆管壁及周围组织做光镜和扫描电镜观察. 部分狗于术后当天和1mo分别行胆道造影. 手术前后定期采集外周静脉血测ALT、总胆红素和直接胆红素，仪器为半自动生化分析仪. 手术前后定期采集胆囊内胆汁作粘度测定. 仪器为NXE型锥板式粘度计(成都仪器厂). 在切变率为2305-1下测定.
, 百拇医药
2 结果
模型组术后均有不同程度的发热、呕吐、萎靡不振，持续2d～5d，其间每日输液1000mL～1500mL. 对照组因无上述症状即进食不输液. 模型组存活1mo以上的共10只；另有5只死于造瘘管脱出后的腹膜炎，1只死于胆道感染. 对照组无死亡. 模型组术后1mo麻醉下开腹. 见腹腔内轻度粘连. 整段的肝外胆管均呈灰白色，质硬，壁明显增厚. 模型组16只均有不同程度胆管腔狭窄，其中有混浊胆汁. 模型组2只狗术后1mo经胆囊造瘘管用300g·L-1河捌习沸械ǖ涝煊 造影显示肝外胆管的节段性狭窄. 对照组1只造影正常.
2.1 病理学检查 模型组术后1wk即有广泛粘膜下炎症细胞浸润，部分粘膜坏死脱落. 术后2wk脱落加重并有浆细胞浸润. 术后3wk胆道粘膜大部分脱落，管壁大量炎症细胞浸润、水肿和纤维化，造成管腔狭窄. 术后1mo粘膜几乎完全脱落，管壁严重纤维化，管腔狭窄. 对照组术后1mo无明显胆管病理改变. 扫描电镜观察见模型组术后3wk粘膜的绒毛结构排列紊乱、大小不等，次级绒毛大部脱落，裸露出粘膜下层的网状结构. 对照组粘膜分布均匀、大小基本一致. 次级绒毛清晰可见.[HJ*2]
, 百拇医药
2.2 生化学检查 动态观察胆汁粘度发现，模型组d10～d14后胆汁粘度呈逐渐升高趋势，而对照组无明显变化(P<0.01). 血清ALT模型组开始显著升高后又渐下降，但未降至正常水平. 对照组正常(P<0.05). 模型组总胆红素和直接胆红素呈平行升高的趋势. 10d～15d达高峰，后又有轻度下降. 对照组无明显变化(P<0.01).
3 讨论
难治性黄疸病因复杂，研究工作有相当难度. 但无论其致病因子为何种，除外恶性黄疸，大多都导致炎症和狭窄. 我们所作动物模型的主要病理特征是慢性胆道炎症性狭窄，并由此引起黄疸，这与临床所见的难治性黄疸的病理改变是大体一致的. 以往曾有一些急性胆管炎动物模型的文献报告[2]. 但尚未见有难治性黄疸或慢性胆管炎的病理模型报告. 我们采用稀甲醛溶液胆管壁内注射，是受到以往肝包囊虫病外科治疗的启发. 肝包囊虫的囊常有与肝内小胆管相通的瘘管(Cystic-biliary Fistula),若向包囊内注入甲醛有时可造成胆道损害而继发硬化性胆管炎[3-16]. 我们将稀释的甲醛直接注入胆管壁，目的是刺激胆管壁发生炎症并纤维化狭窄. 稀释的目的是避免高浓度甲醛造成胆管壁的坏死穿孔. 预试验中我们曾用无水酒精和高渗盐水，但均不如稀甲醛效果好.
, 百拇医药
4 参考文献
1 许建衡，宋继昌. 利胆膏治疗难治性黄疸实验研究. 中国医药学报，1997；12：60
2 吴荣庆. 大白鼠胆管炎模型制作方法介绍. 武汉医学院学报，1983；14：364
3 Houry S. Sclerosing cholangitis induced by formaldehyde solution injected into the biliary tree of rats. Arch Surg,
1990;125:1059
4 危北海, 陈治水, 陈维养, 马连生. 中国中西医结合学会第四届全国消化系统疾病学术会议论文纪要. 新消化病学杂志, 1993;1:56-58
, 百拇医药
5 董家鸿, 黄志强, 韩本立, 段恒春, 李昆, 彭志明, 王敖川. 实验性胆源性脓毒症的临床病理特征. 新消化病学杂志， 1994;2:140-143
6 杨汉新, 严修源, 王勇强, 宋念, 姚辉华. 医源性胆管损伤和狭窄37例的处理. 新消化病学杂志, 1996;4:275-276
7 王友顺, 杨继震. 自由基与胆道疾病. 新消化病学杂志, 1996;4:279-280
8 吴云林, 陈金联, 俞丽芬. 第3届香港-上海国际胃肠病大会学术集锦. 新消化病学杂志, 1997;5:268-269
9 王庆, 许锋, 张晓东, 鲁焕章. 胆道阻塞与逆行胆道造影对机体影响的实验研究. 新消化病学杂志, 1997;5:359-360
, 百拇医药
10 陈德珍, 魏睦新. 大鼠脾阴虚证病理模型的建立. 新消化病学杂志, 1997;5:8-10
11 杨新波, 黄正明, 曹文斌, 郑鸣, 陈鸿雁, 张敬珍, 陶建华, 卢立军, 眭翔, 刘军, 刘琳, 黄英. CCl4, D-Gal, ANIT致小鼠肝损伤模型的实验
研究. 华人消化杂志, 1998;6:19-20
12 赵尔增, 岳茂兴, 李成林, 米晓森, 罗放, 周金莲, 柏文田. 实验性兔多器官功能障碍综合征的病理学研究. 华人消化杂志,1998;6:334-336
13 王佐佑, 苗继延, 樊代明. 原发性硬化性胆管炎12例. 华人消化杂志, 1998;6:339
14 石景森, 任斌, 马庆久, 程力, 罗健, 孟清翠, 田和平, 韩梅荣. 利胆溶石胶囊防止胆石形成的实验研究. 华人消化杂志,1998;6:564-566
15 李端阳, 吴金生, 马庆久, 高德明, 褚延魁. 梗阻性黄疸大鼠血及肝组织内皮素水平. 世界华人消化杂志, 1999;7:891-892
16 郭振武, 王连福, 史美媛, 安新, 邓茂君. 中药胆胰和胃冲剂对胆道内成石因素的影响和预防术后复发的效果. 世界华人消化杂志,1999;7:132-134, 百拇医药(林 薇1 许建衡2 刘婉秀2 陈 葵3 )
项目负责人 许建衡汕头市龙湖医院 广东省汕头市 515041
Tel. 0086-754-8258290
Email. xujh@pub.shantou.gd.cn
收稿日期 2000-06-18 接受日期 2000-07-01
主题词 黄疸；模型，动物；实验；狗；胆管；甲醛
林薇, 许建衡, 刘婉秀, 陈葵. 难治性黄疸动物模型研究. 世界华人消化杂志，2001；9(3)：335
, 百拇医药
难治性黄疸是一种临床处理十分困难的病症，大多病因十分复杂，疗效欠佳[1]. 本研究目的就是建立一种难治性黄疸动物病理模型以供实验研究之用.
1 材料和方法
1.1 材料 健康成年狗20只，雌雄不限. 平均体重18.10kg. 随机分模型组16只，对照组4只.
1.2 方法 20g·L-1戊巴比妥钠iv麻醉(30mg·kg-1). 上腹正中切口，显露胆总管及肝门部. 用5号针头注射器在整个肝外胆管壁内均匀细致地浸润注射10g·L-1甲醛溶液. 注射量多少以看见管壁颜色变白为宜. 胆囊内置一蘑菇头导管引出腹壁固定. 常规关腹. 对照组手术中胆管壁浸润注射生理盐水. 术后第2，3，4wk末，模型组每周处死2～3只，对照组1只狗. 取胆管壁及周围组织做光镜和扫描电镜观察. 部分狗于术后当天和1mo分别行胆道造影. 手术前后定期采集外周静脉血测ALT、总胆红素和直接胆红素，仪器为半自动生化分析仪. 手术前后定期采集胆囊内胆汁作粘度测定. 仪器为NXE型锥板式粘度计(成都仪器厂). 在切变率为2305-1下测定.
, 百拇医药
2 结果
模型组术后均有不同程度的发热、呕吐、萎靡不振，持续2d～5d，其间每日输液1000mL～1500mL. 对照组因无上述症状即进食不输液. 模型组存活1mo以上的共10只；另有5只死于造瘘管脱出后的腹膜炎，1只死于胆道感染. 对照组无死亡. 模型组术后1mo麻醉下开腹. 见腹腔内轻度粘连. 整段的肝外胆管均呈灰白色，质硬，壁明显增厚. 模型组16只均有不同程度胆管腔狭窄，其中有混浊胆汁. 模型组2只狗术后1mo经胆囊造瘘管用300g·L-1河捌习沸械ǖ涝煊 造影显示肝外胆管的节段性狭窄. 对照组1只造影正常.
2.1 病理学检查 模型组术后1wk即有广泛粘膜下炎症细胞浸润，部分粘膜坏死脱落. 术后2wk脱落加重并有浆细胞浸润. 术后3wk胆道粘膜大部分脱落，管壁大量炎症细胞浸润、水肿和纤维化，造成管腔狭窄. 术后1mo粘膜几乎完全脱落，管壁严重纤维化，管腔狭窄. 对照组术后1mo无明显胆管病理改变. 扫描电镜观察见模型组术后3wk粘膜的绒毛结构排列紊乱、大小不等，次级绒毛大部脱落，裸露出粘膜下层的网状结构. 对照组粘膜分布均匀、大小基本一致. 次级绒毛清晰可见.[HJ*2]
, 百拇医药
2.2 生化学检查 动态观察胆汁粘度发现，模型组d10～d14后胆汁粘度呈逐渐升高趋势，而对照组无明显变化(P<0.01). 血清ALT模型组开始显著升高后又渐下降，但未降至正常水平. 对照组正常(P<0.05). 模型组总胆红素和直接胆红素呈平行升高的趋势. 10d～15d达高峰，后又有轻度下降. 对照组无明显变化(P<0.01).
3 讨论
难治性黄疸病因复杂，研究工作有相当难度. 但无论其致病因子为何种，除外恶性黄疸，大多都导致炎症和狭窄. 我们所作动物模型的主要病理特征是慢性胆道炎症性狭窄，并由此引起黄疸，这与临床所见的难治性黄疸的病理改变是大体一致的. 以往曾有一些急性胆管炎动物模型的文献报告[2]. 但尚未见有难治性黄疸或慢性胆管炎的病理模型报告. 我们采用稀甲醛溶液胆管壁内注射，是受到以往肝包囊虫病外科治疗的启发. 肝包囊虫的囊常有与肝内小胆管相通的瘘管(Cystic-biliary Fistula),若向包囊内注入甲醛有时可造成胆道损害而继发硬化性胆管炎[3-16]. 我们将稀释的甲醛直接注入胆管壁，目的是刺激胆管壁发生炎症并纤维化狭窄. 稀释的目的是避免高浓度甲醛造成胆管壁的坏死穿孔. 预试验中我们曾用无水酒精和高渗盐水，但均不如稀甲醛效果好.
, 百拇医药
4 参考文献
1 许建衡，宋继昌. 利胆膏治疗难治性黄疸实验研究. 中国医药学报，1997；12：60
2 吴荣庆. 大白鼠胆管炎模型制作方法介绍. 武汉医学院学报，1983；14：364
3 Houry S. Sclerosing cholangitis induced by formaldehyde solution injected into the biliary tree of rats. Arch Surg,
1990;125:1059
4 危北海, 陈治水, 陈维养, 马连生. 中国中西医结合学会第四届全国消化系统疾病学术会议论文纪要. 新消化病学杂志, 1993;1:56-58
, 百拇医药
5 董家鸿, 黄志强, 韩本立, 段恒春, 李昆, 彭志明, 王敖川. 实验性胆源性脓毒症的临床病理特征. 新消化病学杂志， 1994;2:140-143
6 杨汉新, 严修源, 王勇强, 宋念, 姚辉华. 医源性胆管损伤和狭窄37例的处理. 新消化病学杂志, 1996;4:275-276
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8 吴云林, 陈金联, 俞丽芬. 第3届香港-上海国际胃肠病大会学术集锦. 新消化病学杂志, 1997;5:268-269
9 王庆, 许锋, 张晓东, 鲁焕章. 胆道阻塞与逆行胆道造影对机体影响的实验研究. 新消化病学杂志, 1997;5:359-360
, 百拇医药
10 陈德珍, 魏睦新. 大鼠脾阴虚证病理模型的建立. 新消化病学杂志, 1997;5:8-10
11 杨新波, 黄正明, 曹文斌, 郑鸣, 陈鸿雁, 张敬珍, 陶建华, 卢立军, 眭翔, 刘军, 刘琳, 黄英. CCl4, D-Gal, ANIT致小鼠肝损伤模型的实验
研究. 华人消化杂志, 1998;6:19-20
12 赵尔增, 岳茂兴, 李成林, 米晓森, 罗放, 周金莲, 柏文田. 实验性兔多器官功能障碍综合征的病理学研究. 华人消化杂志,1998;6:334-336
13 王佐佑, 苗继延, 樊代明. 原发性硬化性胆管炎12例. 华人消化杂志, 1998;6:339
14 石景森, 任斌, 马庆久, 程力, 罗健, 孟清翠, 田和平, 韩梅荣. 利胆溶石胶囊防止胆石形成的实验研究. 华人消化杂志,1998;6:564-566
15 李端阳, 吴金生, 马庆久, 高德明, 褚延魁. 梗阻性黄疸大鼠血及肝组织内皮素水平. 世界华人消化杂志, 1999;7:891-892
16 郭振武, 王连福, 史美媛, 安新, 邓茂君. 中药胆胰和胃冲剂对胆道内成石因素的影响和预防术后复发的效果. 世界华人消化杂志,1999;7:132-134, 百拇医药(林 薇1 许建衡2 刘婉秀2 陈 葵3 )