钙通道阻滞剂对重症急性胰腺炎大鼠氧自由基的影响
高友兵，汪训实，张兆林，陈玉石,广州军区武汉总医院普通外科湖北省武汉市 430070
项目负责人 高友兵，430070，湖北省武汉市，广州军区武汉总医院普通外科
收稿日期 2002-03-14 接受日期 2002-04-08
摘要
目的:探讨钙通道阻滞剂(CCB)对重症急性胰腺炎(CCB )大鼠氧自由基的影响以及胰腺病理学改变.
方法: Wistar大鼠45只，随机分为三组.A组，假手术组；B组，SAP 组；C组，SAP +CCB治疗组.分别观察各组动物血浆及胰腺组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD )含量及胰腺病理学变化.
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结果: CCB治疗组血浆MDA为1.32±0.16nmol/ml，胰腺组织中MDA为2.35±0.24nmol/g，均较SAP组显著降低(P<0.05) ；胰腺组织SOD含量438.7±35.2 u/g，较SAP组升高(P<0.05) ；CCB治疗组胰腺病理损害程度显著减轻(P<0.05).
结论:CCB可抑制SAP 氧自由基的生成，减轻胰腺病理损害，对SAP 大鼠具有一定的保护作用.
高友兵，汪训实，张兆林，陈玉石.钙通道阻滞剂对重症急性胰腺炎大鼠氧自由基的影响.世界华人消化杂志 2002;10(9):1098-1099
0 引言重症急性胰腺炎(SAP )的发病机制目前尚未完全清楚，已有研究表明氧自由基在SAP 的发病过程中起着重要作用[1].本实验旨在探讨钙通道阻滞剂(CCB)对SAP 大鼠氧自由基的影响以及胰腺病理学改变.
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1 材料和方法
1.1 材料 Wistar大鼠45只，雌雄不限，体重250-300g，由广州军区武汉总医院实验中心提供，各组动物实验前12 h禁食，不禁水.采用“逆行胰胆管注射法”建立SAP 模型：大鼠用1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉后，从上腹正中开腹，于系膜对侧缘在十二指肠壁作一小切口找到胰胆管开口，插入细塑料管，注入5%牛磺胆酸钠(1.5 ml/kg,0.1 ml/min)，10 min 后除去细塑料管，缝合十二指肠壁及腹壁，即形成SAP 大鼠模型，模型均一、稳定.大鼠随机分三组，每组15只.A组，假手术组，仅作十二指肠壁切开缝合术；B组，SAP组；C组，SAP+CCB治疗组，制成SAP模型后，立即给予维拉帕米(25mg/kg)腹腔内注射；A、B两组注射等量的生理盐水.
1.2 方法 实验开始后6h，检测如下指标：(1)血清及腹水淀粉酶;(2)血浆丙二醛(MDA)、胰腺组织中MDA和超氧化物歧化酶(SOD)含量;(3)胰腺病理学变化，取胰腺组织，10%甲醛固定，石蜡包埋切片，HE染色后，光镜下观察，胰腺病损按Schmidt [2]评分系统评分后取平均值.
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统计学处理 采用t检验，方差分析，P<0.05认为差异具有显著性.
2 结果
2.1 动物一般情况 6h内，A组大鼠全部存活，B组死亡3只，C组死亡 1只.
2.2 各组大鼠血清及腹水淀粉酶的含量 A组血清淀粉酶为(1120±85)u/L，B组为(3840±410)u/L，C组为(2450±230)u/L.B、C组血清淀粉酶均较A组显著升高(P <0.01 ).腹水淀粉酶B组为(47920±2680)u/L，C组为(35670±1560)u/L，两组比较，C组腹水淀粉酶的含量较B组显著降低(P<0.05 ).
2.3 各组血浆MDA、胰腺组织MDA和SOD 的含量 结果分析显示，SAP 组血浆及胰腺组织中MDA的含量均较假手术组显著升高(P<0.01 ),胰腺组织中SOD 的含量显著降低(P<0.01 ).CCB治疗组血浆及胰腺组织中MDA含量均较SAP 组显著降低(P<0.05 ),胰腺组织中SOD 含量显著升高(P<0.05).(表1)
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表1 各组大鼠血浆MAD及胰腺组织MAD、SOD的含量(n =15,)
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aP<0.01，vs A组；bP<0.05，vs B组；dP<0.01，vs B组
2.4 各组胰腺病理评分 A组光镜下胰腺组织结构正常.B、C两组比较，C组胰腺病理损害显著减轻(P<0.05) (表2).
表2 各组大鼠胰腺病理计分 (n=15,)
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aP<0.05,vs B组；bP<0.01,vs B组
3 讨论急性胰腺炎(AP)的发病机制仍有许多问题未能解决，随着氧自由基(OFR)生物学研究的不断深入，OFR在AP发病中的作用受到人们重视.我们的实验研究发现，SAP的病理变化与OFR关系密切，SAP 血浆及胰腺组织中MDA含量升高，胰腺组织中SOD 活性降低.
SAP 时OFR的来源可能有以下途径：(1)糜蛋白酶转化D型黄嘌呤氧化酶为O型，其在催化次黄嘌呤反应中产生OFR；(2)SAP 时脂肪酶及胆汁酸诱发中性粒细胞释放OFR;(3)AP时胰血流量降低[3]，组织灌注不足、缺氧，通过氧化还原循环形成OFR.
本实验研究发现，CCB可显著降低血、胰腺组织中MDA的含量，提高SOD 活性，减轻胰腺的病理损害程度.
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CCB可抑制Ca2+跨膜内流，避免高Ca2+诱导的水解酶激活，抑制黄嘌呤脱氢酶向氧化型转化及与之相伴的OFR的生成，减少OFR造成的胰腺组织损害[4].
CCB可改善AP时胰腺微循环障碍[5]，降低血粘度，纠正血液流变学紊乱.减轻胰腺缺血/再灌注损伤，改善胰腺组织缺血和缺氧状态，减少OFR的生成，减轻胰腺组织的病理损害程度.
4 参考文献1 姚国和，邵明德.氧自由基与急性胰腺炎.医师进修杂志 1994;2:40-41
2 Schmidt J,Lewandrowski K, Castillo CF,Mandavilli U ,Compton CC, Warshaw AL ,Rattner DW .Histopatholgic correlates
, 百拇医药
of serum amlayse activity in acute pancreatitis.Dig Dis Sci 1992;37:1426-1433
3 Ishida H,Makina T,Kobayshi M,Tsuneoka K .Laparoscopic measurement of panereatic blood flow.Endoscopy
1983;15:107-110
4 蒲青凡,严律南,刘占培,谭建三,左凤琼，沈骥，吴北锋.氧自基及钙超负荷在急性胰腺炎突发过程中的作用.四川医学
1998;19:4-5
5 许春芳,蒋文平,蔡衍郎,张泳康,刘世增. 维拉帕米对实验性急性胰腺炎的保护作用.新消化病学杂志 1997;5:295-96, 百拇医药
项目负责人 高友兵，430070，湖北省武汉市，广州军区武汉总医院普通外科
收稿日期 2002-03-14 接受日期 2002-04-08
摘要
目的:探讨钙通道阻滞剂(CCB)对重症急性胰腺炎(CCB )大鼠氧自由基的影响以及胰腺病理学改变.
方法: Wistar大鼠45只，随机分为三组.A组，假手术组；B组，SAP 组；C组，SAP +CCB治疗组.分别观察各组动物血浆及胰腺组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD )含量及胰腺病理学变化.
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结果: CCB治疗组血浆MDA为1.32±0.16nmol/ml，胰腺组织中MDA为2.35±0.24nmol/g，均较SAP组显著降低(P<0.05) ；胰腺组织SOD含量438.7±35.2 u/g，较SAP组升高(P<0.05) ；CCB治疗组胰腺病理损害程度显著减轻(P<0.05).
结论:CCB可抑制SAP 氧自由基的生成，减轻胰腺病理损害，对SAP 大鼠具有一定的保护作用.
高友兵，汪训实，张兆林，陈玉石.钙通道阻滞剂对重症急性胰腺炎大鼠氧自由基的影响.世界华人消化杂志 2002;10(9):1098-1099
0 引言重症急性胰腺炎(SAP )的发病机制目前尚未完全清楚，已有研究表明氧自由基在SAP 的发病过程中起着重要作用[1].本实验旨在探讨钙通道阻滞剂(CCB)对SAP 大鼠氧自由基的影响以及胰腺病理学改变.
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1 材料和方法
1.1 材料 Wistar大鼠45只，雌雄不限，体重250-300g，由广州军区武汉总医院实验中心提供，各组动物实验前12 h禁食，不禁水.采用“逆行胰胆管注射法”建立SAP 模型：大鼠用1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉后，从上腹正中开腹，于系膜对侧缘在十二指肠壁作一小切口找到胰胆管开口，插入细塑料管，注入5%牛磺胆酸钠(1.5 ml/kg,0.1 ml/min)，10 min 后除去细塑料管，缝合十二指肠壁及腹壁，即形成SAP 大鼠模型，模型均一、稳定.大鼠随机分三组，每组15只.A组，假手术组，仅作十二指肠壁切开缝合术；B组，SAP组；C组，SAP+CCB治疗组，制成SAP模型后，立即给予维拉帕米(25mg/kg)腹腔内注射；A、B两组注射等量的生理盐水.
1.2 方法 实验开始后6h，检测如下指标：(1)血清及腹水淀粉酶;(2)血浆丙二醛(MDA)、胰腺组织中MDA和超氧化物歧化酶(SOD)含量;(3)胰腺病理学变化，取胰腺组织，10%甲醛固定，石蜡包埋切片，HE染色后，光镜下观察，胰腺病损按Schmidt [2]评分系统评分后取平均值.
, http://www.100md.com
统计学处理 采用t检验，方差分析，P<0.05认为差异具有显著性.
2 结果
2.1 动物一般情况 6h内，A组大鼠全部存活，B组死亡3只，C组死亡 1只.
2.2 各组大鼠血清及腹水淀粉酶的含量 A组血清淀粉酶为(1120±85)u/L，B组为(3840±410)u/L，C组为(2450±230)u/L.B、C组血清淀粉酶均较A组显著升高(P <0.01 ).腹水淀粉酶B组为(47920±2680)u/L，C组为(35670±1560)u/L，两组比较，C组腹水淀粉酶的含量较B组显著降低(P<0.05 ).
2.3 各组血浆MDA、胰腺组织MDA和SOD 的含量 结果分析显示，SAP 组血浆及胰腺组织中MDA的含量均较假手术组显著升高(P<0.01 ),胰腺组织中SOD 的含量显著降低(P<0.01 ).CCB治疗组血浆及胰腺组织中MDA含量均较SAP 组显著降低(P<0.05 ),胰腺组织中SOD 含量显著升高(P<0.05).(表1)
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表1 各组大鼠血浆MAD及胰腺组织MAD、SOD的含量(n =15,)
| 血浆 MDA(nmol/ml) | 胰腺组织 | ||
| MDA(nmol/g湿重) | SOD | (u/g湿重) | |
| A组 | 0.68±0.12 | 1.71±0.25 | 492.3±38.0 |
| B组 | 1.87±0.22a | 3.78±0.47a | 346.5±30.5a |
| C组 | 1.32±0.16b | 2.35±0.24d | 438.7±35.2 |
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aP<0.01，vs A组；bP<0.05，vs B组；dP<0.01，vs B组
2.4 各组胰腺病理评分 A组光镜下胰腺组织结构正常.B、C两组比较，C组胰腺病理损害显著减轻(P<0.05) (表2).
表2 各组大鼠胰腺病理计分 (n=15,)
| 水肿 | 腺泡坏死 | 脂肪坏死 | 出血 | 炎性细胞浸润 | |
| A组 | 0.23±0.02 | 0 | 0 | 0 | 0.37±0.03 |
| B组 | 2.83±0.14 | 3.37±0.15 | 3.60±0.18 | 3.23±0.14 | 3.57±0.18 |
| C组 | 2.37±0.13a | 2.77±0.14b | 3.03±0.15a | 2.97±0.13a | 3.07±0.13a |
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aP<0.05,vs B组；bP<0.01,vs B组
3 讨论急性胰腺炎(AP)的发病机制仍有许多问题未能解决，随着氧自由基(OFR)生物学研究的不断深入，OFR在AP发病中的作用受到人们重视.我们的实验研究发现，SAP的病理变化与OFR关系密切，SAP 血浆及胰腺组织中MDA含量升高，胰腺组织中SOD 活性降低.
SAP 时OFR的来源可能有以下途径：(1)糜蛋白酶转化D型黄嘌呤氧化酶为O型，其在催化次黄嘌呤反应中产生OFR；(2)SAP 时脂肪酶及胆汁酸诱发中性粒细胞释放OFR;(3)AP时胰血流量降低[3]，组织灌注不足、缺氧，通过氧化还原循环形成OFR.
本实验研究发现，CCB可显著降低血、胰腺组织中MDA的含量，提高SOD 活性，减轻胰腺的病理损害程度.
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CCB可抑制Ca2+跨膜内流，避免高Ca2+诱导的水解酶激活，抑制黄嘌呤脱氢酶向氧化型转化及与之相伴的OFR的生成，减少OFR造成的胰腺组织损害[4].
CCB可改善AP时胰腺微循环障碍[5]，降低血粘度，纠正血液流变学紊乱.减轻胰腺缺血/再灌注损伤，改善胰腺组织缺血和缺氧状态，减少OFR的生成，减轻胰腺组织的病理损害程度.
4 参考文献1 姚国和，邵明德.氧自由基与急性胰腺炎.医师进修杂志 1994;2:40-41
2 Schmidt J,Lewandrowski K, Castillo CF,Mandavilli U ,Compton CC, Warshaw AL ,Rattner DW .Histopatholgic correlates
, 百拇医药
of serum amlayse activity in acute pancreatitis.Dig Dis Sci 1992;37:1426-1433
3 Ishida H,Makina T,Kobayshi M,Tsuneoka K .Laparoscopic measurement of panereatic blood flow.Endoscopy
1983;15:107-110
4 蒲青凡,严律南,刘占培,谭建三,左凤琼，沈骥，吴北锋.氧自基及钙超负荷在急性胰腺炎突发过程中的作用.四川医学
1998;19:4-5
5 许春芳,蒋文平,蔡衍郎,张泳康,刘世增. 维拉帕米对实验性急性胰腺炎的保护作用.新消化病学杂志 1997;5:295-96, 百拇医药
